【求助】ly294002处理细胞添加浓度

最近用ly294002处理2种细胞系，添加浓度为20uM处理2-12小时，wb检测p-Akt的量发现不但没减少，反而增加，很奇怪的！百思不得其解，不知是何原因？用50uM处理时也是这样?看来只有向高手求助了。

用50uM处理后的结果也差不多，请高手帮忙分析一下原因，呵呵

其实，我也出现过类似的情况啊！当时我在用MAPK/ERK1/2 特异性抑制剂U0126预处理食管癌细胞系，处理的浓度都达到了50uM了，但是用western-blotting检测p-ERK1/2的表达水平，一点都没有减少的意思，反而好像增加了（与低浓度相比），当时很郁闷啊！后来分析其原因，可能是高浓度的U0126中含有的DMSO的体积较高，高浓度的DMSO会激活ERK1/2通路的表达。

其实，我也出现过类似的情况啊！当时我在用MAPK/ERK1/2 特异性抑制剂U0126预处理食管癌细胞系，处理的浓度都达到了50uM了，但是用western-blotting检测p-ERK1/2的表达水平，一点都没有减少的意思，反而好像增加了（与低浓度相比），当时很郁闷啊！后来分析其原因，可能是高浓度的U0126中含有的DMSO的体积较高，高浓度的DMSO会激活ERK1/2通路的表达。

请问当你把DMSO的浓度降下来后，检测到的p-ERK1/2水平变了没？

高浓度的DMSO会激活ERK1/2通路的表达。？？？这个高浓度具体会是超过多好就会成为刺激作用呢？

你好，我现在也用LY294002处理HCT116细胞，也出现Akt S473升高的现象，不知有什么问题，你是处理什么细胞，最后又能看到LY294002抑制Akt磷酸化现象吗？谢谢

你好，你知道答案了么？为什么p－akt水平用ly294002处理后没有降低那？谢谢

您好，关于LY294002的配制，麻烦指点行吗，1mgLY294002要进行腹腔注射，剂量应该是多少啊，不胜感激。。