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        蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性

        互联网

        3415

        张 韵
        (浙江大学医学院附属第一医院 浙江 杭州 310006)

        目的 应用微机生物信号采集处理系统测定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位,观察刺激、神经损伤、药物对神经兴奋性、兴奋传导的影响并探讨其机制

        1 材料和方法

        1.1 实验动物 蟾蜍(中华蟾蜍指名亚种,Zhuoshan Toad)

        1.2 药品 任氏液,氯化钾

        1.3 器材 RM6240微机生物信号处理系统(成都 仪器 厂)、神经干标本盒。

        1.4 坐骨神经干制备 蟾蜍毁脑脊髓,去上肢和内脏,下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;标本腹面向上,用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛,用线在近脊柱处结扎,剪断神经;将神经干从腹面移向背面。标本背面向上固定,从大腿至跟腱分离坐骨神经。坐骨神经标本置任氏液中备用。

        1.5 仪器 连接和参数 神经干标本盒两对引导电极分别接微机 生物 信号处理系统1、2通道。 仪器参数:1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、灵敏度5mV,采样频率:100KHz,扫描速度:0.2ms/div。单刺激激方式,刺激幅度1.0V,刺激波宽0.1ms,延迟2ms,同步触发。

        1.6 动作电位引导 神经干标本置于标本盒的电极上,神经与电极接触良好,调节刺激电压,记录动作电位。

        2 观察

        2.1 观察中枢端复合动作电位(compound action potention,CAP) 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干末梢端,观察中枢端CAP正、负向振幅(amplitude,A)和时程(duration,D)。

        2.2 测定双相动作电位(biphasic action potential, BAP) 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端BAP正相振幅(Ap 1 )、正相时程(Dp 1 )、正相振幅(Ap 2 )、正相时程(Dp 2 )。

        2.3 传导速度测定 用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差Δt ,根据V= S R1- R2- / Δt 计算出AP的传导速度。

        2.4 测定单相动作电位(monophasic action potential,MAP) 用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干,然后用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端MAP振幅(Am)和时程(Dm)。

        2.5 观察刺激强度与动作电位振幅的关系 刺激波宽0.1ms,刺激电压从0.1V开始, 按步长0.05V增加,刺激电压每增加一次刺激神经干一次,并记录刺激电压和MAP振幅。测定阈刺激(U th )和最大刺激(U max )。

        2.6 测定KCl处理前后MAP振幅 刺激电压1.0V,刺激波宽0.1ms,将3 mol/L KCl 滤纸 置于第1对引导电极的第一电极处,记录KCl处理前,处理后5min时MAP的振幅(Aap)。

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