胶原诱导性关节炎大鼠滑膜双向凝胶电泳图谱建立及差异分析

[摘要]

目的：类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一个多基因多因素参与的病理过程。实验中通过建立与RA发病机制相似的胶原诱导性关节炎（Collagen-induced arthritis，CIA）大鼠动物模型，运用蛋白质组技术对正常大鼠和CIA大鼠模型不同时间点滑膜组织的蛋白质点进行比较分析，为鉴定CIA大鼠滑膜病变相关蛋白质及研究RA发病机制奠定基础。

方法：用牛Ⅱ型胶原和完全福氏佐剂建立CIA大鼠模型，采用一步抽提法抽提滑膜蛋白质，运用固相pH梯度双向凝胶电泳分离各组大鼠滑膜组织的总蛋白质，用PDquest软件分析图谱，比较差异蛋白质，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）得到相应肽质指纹图谱，用Mascot查询软件搜索数据库，鉴定部分差异蛋白质。

结果：成功建立了CIA大鼠模型，获得分辨率较高、重复性较好的大鼠滑膜组织双向电泳凝胶图谱。正常组与25、35和45天模型组大鼠滑膜组织凝胶图谱的平均蛋白质点数分别为1 070±41、1 049±22、1 079±44和1 088±39。在4个组均有表达差异的蛋白质点中随机取20个点进行肽质指纹图分析，鉴定了部分与细胞代谢、信号转导及结构相关的差异表达蛋白质。

结论：建立了分辨率较高且重复性较好的正常大鼠与CIA大鼠不同时间点滑膜组织的双向凝胶电泳图谱，鉴定了一些与CIA大鼠滑膜病变相关的差异表达蛋白质，为识别RA病变相关蛋白质及推断RA病变过程奠定基础。