原代培养

1 材料 1.1 动物 出生后 1-4 天 SD 乳鼠 15 只。 1.2 试剂 低糖 DMEM、胰酶(含 EDTA)、青链霉素、碳酸氢钠液、新生牛血清、谷氨酰胺、D-Hank's 液。0.1%新洁尔灭、碘酒、75%酒精。 培养液：培养液(DMEM，新生牛血清，青链霉素)。 1.3 手术器械和仪器 铝盒、眼科直剪、眼科弯剪、眼科直镊、 ...

原理： 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度，如果染料与含有脂类的试样接触，便有大量染料进入脂类物质的结构内，使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈色。也可用四氧化锇染色，脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。 配制试剂： 1.苏丹红Ⅲ染色液：将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用； 2.甲醛钙固定液：将10ml甲醛和1 ...

一、实验原理 细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养， 即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或DMSO作保护剂 ...

1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存 24 小时，室温下不超过 6 小时，否则废弃） 2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次，将污血冲洗干净为止。 3. 用手术钳夹紧脐带下端，加入 15ml 的胶原酶（1mg/ml）室温下消化 15-20分钟，并不时上下摇动脐带。 4. 消化完后，将下端手术钳松开，消 ...

实验器材 手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。 实验试剂 无Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞（MEF）生长培养基：高糖DMEM加10%FCS。 实验动物 孕期14至16天的孕鼠 实验步骤 1. 处死孕鼠，置于75%酒精 ...

血管新生和在旧血管里构造新血管对在胎儿的生长、创伤治愈、肿瘤增殖及转移等各种过程中有重要作用。特别它是肿瘤生长、转移的必经阶段，一直以来不少科研人员将血管新生的抑制剂用于抗肿瘤药物的研究。至于血管新生促进剂，它主要是用于治疗血流灌注不足等诸多症状，但实际应用不多，主要是因为除了从生物体提取的增殖因子以外，科研人员很少能识别出其他有此作用的物质。血管新生治疗在血流灌注不足等方面被寄予厚望。血流灌注不足是由于糖尿病患者的慢性闭塞性动脉硬化、脉管炎病及其他动脉硬化等各种血管闭塞等引起的。但是现在进行的血管新生治疗只限于向患者注射增殖因子和进行基因治疗等方法，众人期待能研发出可以替代这些方法的稳定、便宜的低分子。本文作者及研究团队介绍新型低分子化合物2-Cl-C.OXT-A在血管新生方面的作用。

近日，德国马普学会法兰克福脑研究所和弗赖堡免疫学与表观遗传学研究所的科研人员利用末梢神经干细胞成功培育出了中枢神经细胞，而且在其刊登在2011年第31期《神经科学》杂志上的研究论文中称，在该新方法中他们没有利用基因技术。 研究人员先将末梢神经干细胞置于特殊的具有合适环境条件的细胞培养皿中，其后围绕脑中枢神经细胞逐渐发育形成了新的支持细胞髓鞘。研究人员发现，温度和营养盐浓度等外部环境因素对于神经干 ...

近十几年来，由于生物制品行业的飞速发展，传统的通过生物化学技术从动物组织获取生物制品的方法已经远远不能满足市场的需求，通过动物细胞在体外大规模培养来表达特定的蛋白、单克隆抗体、干扰素及病毒疫苗制品已成为目前最普遍的技术。 动物细胞体外大规模培养技术是在人工条件下，设定pH、温度、溶氧等，在细胞培养载体（容器）中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。常用的大规模培养的动物细胞有鸡胚成纤维细 ...

我们通过联合原代培养的骨骼肌成肌细胞与水凝胶骨架，制作出一种外科手术可植入式组织构成物。该生肌构成物能作为心脏上位腔室和低位腔室之间的电学导管。

人类胚胎干细胞必须被仔细地照料，以维持其健康和不分化。至少每天要更换一次培养基，目的是补充消耗掉的营养物质以及去除不需要的分化因子。

电穿孔是将质粒DNA或siRNA导入原代细胞最有效的途径。Gene Pulser Mxcell电穿孔系统以及Gene Pulser电穿孔缓冲液是专为将核酸导入哺乳动物细胞及难转染的细胞而设计的。在本视频中，我们演示了如何从老鼠骨髓中制备原代造血细胞培养物，以及随后地利用Mxcell电穿孔系统进行细胞电穿孔。

成年啮齿动物心脏细胞原代培养是一种重要的心血管研究模式系统。然而对于许多研究者来说，建立切实可行的成年心肌细胞培养方法不但具有技术挑战性，而且还是一个限速步骤。这里我们介绍一种高产出的成年大鼠心肌细胞培养方法。

视频以小鼠胚胎成纤维细胞为例，详细介绍了利用Gene Pulser Mxcell电穿孔系统高效转染原代细胞的方法，如细胞的准备、仪器的设置及电转过程，并附上了转染后细胞的图像。

LAK/TIL细胞的制备1、LAK细胞的制备【试剂及材料】①PHA②rhIL-2③20％NCS-RPMI-1640培养液【操作方法】（1）常规分离PBM或将正常人外伤摘除的脾脏按常规方法制备成单个脾细胞悬液，用含20％NCS的RPMI-1640完全培养液调整细胞浓度至1×106/ml；（2）将上述细胞加入24孔培养板孔中，同时加入60μg PHA，rhIL-2（终浓度为500U/ml），将细胞置 ...

一、组织块直接培养法1、取材，用Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块，再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶，并贴附于瓶底面。4、轻轻将培养瓶翻转，瓶底朝上，向瓶内注入适量的培养液，将培养瓶放置在37℃恒温箱内培养。5、放置待组织小块贴附后，将培养瓶慢慢翻转平放，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。二、消化 ...

1、准备计数板 2、制备细胞悬液 3、加样 4、计数

细胞培养的倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。细胞培养的代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。 ...

概述肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。，根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子。肿瘤组织分离为肿瘤细胞原代培养的方法主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。

PriCells - 正常人脐静脉原代内皮细胞培养

PriCells –正常大鼠原代心肌细胞培养一、实验试剂1、培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液： 1×PBS（pH 7.4）+ 1% P/S4、染色液： 0.4% Trypan Blue 5、消化液： PriCel ...