其他试剂

PriCells: 小鼠单个核细胞分离去除脾脏细胞悬液中的红细胞脾脏细胞悬液在进行淋巴细胞计数之前最好先去除红细胞（RBC）。胸腺和淋巴结细胞悬液则不必去除红细胞。脾脏细胞的亚群分离也需先去除红细胞。

支原体污染是细胞培养中令人头痛的问题，有研究表明25%的细胞系中感染了支原体，而研究人员却并不知晓！支原体检测常规采用PCR的方法，虽然灵敏，但假阳性和假阴性率高，面对得之不易的细胞，研究人员往往很难取舍。对此，R&D Systems 公司在这个领域有重大突破，利用Elisa技术研发的新产品—MycoProbe® Mycoplasma Detection Kit（Catalog # CUL001B）可以高通量（96undefined8种支原体）快速（检测时间也仅需要4.5个小时）有效地检测支原体污染，并且避免出现假阴性和假阳性现象。

本文介绍了Hepes缓冲液的配制方法

PBS的配制： 在800ml蒸馏水中溶解8g NaCL，0.2g KCL，1.44g 磷酸氢二钠和0.24克磷酸二氢钾，用HCL调节溶液的pH值至7.4，加水定容至1升，在1.034x10（5），高压蒸汽灭菌20分钟。室温保存。一般用于实验室中的PBS缓冲液都是这样配制，而不用摩尔分数表示。 PBS(Phosphate-buffered Saline) 分子克隆上的配方 NaCl: 8g KCl: ...

丁香园网友yuanjianmei的问题为： 胶原酶2一定要用D-hank's液配制吗？ 消化血管细胞一次要用多少啊？ 丁香园网友张艳红的观点为： 用D-hank's液配制也可，但不一定。我做的是软骨细胞的原代培养，用的是1640完全培养基配制的。你消化血管细胞如果是做原代培养，我估计用6-8ml就可。我用时每次用8-10ml。当然，这也得视取用的组织特性和组织的量而定。仅供参考。 丁香园网友ww ...

1.毕赤酵母表达常用溶液及缓冲液的配制 1.1 各种母液的配制 1undefinedYNB：（含有硫酸铵、无氨基酸的13.4%酵母基础氮源培养基） 4℃保存。34g酵母基础氮源培养基（无硫酸铵）+100g硫酸铵，溶于1000ml水中，过滤除菌。 50undefinedB：（0.02%生物素 Biotin） 4℃保存 保存期为1年。20mg的生物素溶于100ml水中，过滤除菌。 10undefinedH：（0.4%Histidi ...

器材与试剂 干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器等 具体步骤 1. 水： 细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水. 2. PBS (也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)： 主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗 溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HP ...

血清是细胞培养中最重要的元素之一。因此，我们特别整理了一些实验室里常会遇到的问题，供大家参考： 1、保存血清最好的方法是什么？ 我们建议血清应保存在-5℃至-2O℃。但是，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。反复冻融会对血清的品质造成不良影响。 2、如何解冻血清才不会使产品质量受损? 我们建议您将血清从冷冻箱取出后，先置于2 ...

一、关于血清使用的几点建议： 1、血清必须贮存-20℃，如存放于4℃，请勿超过两周，对于某些单位一次无法用完一瓶，可在无菌条件下将其40-45ml分装于无菌50ml离心管中(或血清瓶中)，由于血清解冻时体积会增加10％，必须预留此膨胀体积的空间，否则易发生污染或容器冻裂的情形。 2、一般公司所提供的血清一般为200ml和500ml装量，因此建议在使用中宜采取逐步解冻的方法解冻血清：-20℃&rar ...

一、血清灭活问题。 1、问：加到培养基中的血清必须灭活吗？ 答：不是必须的，看做什么实验了。 2、问：四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗？ 回答a：血清都是灭活是56℃30min。每次我都是这样灭活的。 回答b：应该是分血清的吧，若已灭活，就不用灭活了，未灭活，最好还是要灭活的。 回答c：如果用于培养大多数的肿瘤细胞，血清一般是不需要灭活的，这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养 ...

1.培养板(如96孔等)细胞实验的缺氧装置: :塑料泡沫盒 1 个;橡胶导管两个;玻璃胶; :如图; :进气孔应该在里下位出气孔应在上外位(因为通的气体密度较大);导管 与泡沫盒连接处用玻璃胶封好. :将培养板放入盒子后盖上盖子用纸胶封好然后往里通气(CO2和N2的混合气)10分接着用止血钳把两个导管夹住密封.最后可以把整个盒子放入37度孵箱内. 2.细胞瓶内细胞实验的缺氧装置: :医用输液器; ...

我所在的实验室有用于培养细胞的超净台，内置酒精灯一个。老师传授授说在打开培养瓶或培养液之前要用酒精灯的火焰快速的烧一下，目的是消毒，减少污染。自己很怀疑这样做的有效程度，因为瞬间的火焰不可能将瓶口的温度升高很多，又如何达到消毒的目的呢？在网上搜索后找到一些资料，认为不应在超净台内使用火焰。现将其放到丁香园上供大家参考，希望有经验的同学给个说法，超净台内到底应不应该有酒精灯。 Open flames ...

因为自己做PC12细胞培养，想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被，到园子里搜索了下，关于多聚赖氨酸的帖子不少，看了一些帖子，将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题，这些帖子里面都解释了。 注：我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位战友。 一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水，或者PBS，浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。 二、其他常用包被方法比较( ...

细胞培养用的筛网的相关知识，单位的含义及其与相关单位的换算。

细胞培养板的选择和使用

1.滤器高压消毒时滤膜变小，为什么 丁香园网友dongwp的观点为：旋紧压住膜后高压灭菌就可以了，醋酸纤维膜会收缩，尼龙膜会好点。 2.滤膜破了，真空泵惹得祸？ 丁香园网友worm27的观点为： 防细菌滤膜的网孔的直径为0.45微米以下，当溶液通过滤液后，细菌的细胞和真菌的孢子等因大于滤膜直径而被阻，在需要过滤灭菌的液体量大时，常使用抽滤装置；液量小时，可用注射器。使用前对其高压灭菌，将滤膜装在 ...

1.针头滤器的使用 丁香园网友heyj的观点为：用滤膜孔径为0.22um的一次性针头滤器过滤胰酶，一次可以过滤100ml。如果想一次性过滤完可以准备1-2个备用的。注意在配胰酶溶液时尽量完全溶解，否则未溶的颗粒会堵住滤孔影响过滤速度。本人认为过滤效果与滤过的液体量无关。 丁香园网友ssl3304的观点为：过滤0.25的胰酶，一次可以滤1L，没有问题的，培养基最多300-400ml，总之一定要充分溶 ...

1.小过滤器如何清洗 丁香园网友bnucell的观点为：先用针管反复抽吸蒸馏水，之后超声20分钟左右，最后用蒸馏水浸泡5个小时以上，取出，40度左右烘干即可。其中的垫圈不要烘，自然晾干就可以了。 丁香园网友飘泊的观点为：小滤器使用后的清洗、消毒和其它可高压的塑料制品（聚丙烯、聚酯和聚偏二氯乙烯等等）一样，但聚乙烯不能高压。A. 流水反复冲十遍，干燥（高压时的温度是多少？之后还得干燥，垫圈我们同样拿 ...

1.不锈钢正压滤器 丁香园网友zhyjd的观点为：买不锈钢正压器时，看看厂家是否给带气囊，如果带就没有必要买了，其实买膜的地方他都会有不锈钢正压器的，滤器先要洗干净，装好滤膜，包装起来高压后，在超净工作台上操作。 2.玻璃滤器 多年前（80年代）刚开始做细胞培养时，使用的是G6型玻璃滤器用于除菌过滤培养液，使用前必须经过泡酸，自来水清洗，蒸馏水过滤，然后再包装，高压灭菌后用于过滤培养液。 3.过 ...

血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题，价格不菲的血清中含有诸如生长因子，维生素，氨基酸等珍贵物质，而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此，在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行，多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子，氨基酸等成分带来的负面影响，在我们的技术热线中最常被提到的就是否该对血清进行热灭活，下面我们就对胎牛血清的热灭活进行一些探讨和解释。