DNA标记

摘要:腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒，目前因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。构建重组AAV(rAAV)涉及到用一个目的基因替换病毒基因组的大部分，然后将这个重组基因组包装到一个有感染性的病毒颗粒里。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。此方法的局限性包括(1) Ad辅助病毒污染rAAV，(2)rAAV的低产出，(3)生成 ...

原理： 如何获得高的大肠杆菌感受态——可算是【一块砖头】吧 感受超级感受态细胞的制备 感受超级感受态细胞的制备1 超级感受态制备2 E.coli感受态：一步法制备感受态： 一步法制感受态急－关于感受态细胞 关于一步法制感受态的疑问 我所用过的最简单的制备感受态的方法！CaCl2法： 感受态细胞的制备 【鸡毛蒜皮】之6 Ultra-感受态 交流：大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法 因为最近数次制作感受态转染生长失败，求助精英们的标准制作方法。多谢！ 分子克隆第三版中感受态 ...

基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol 上海南方模式生物研究中心 技术顾问 周效华从2011年科学家实现TALEN技术，2013年科学家实现CRISPR/Cas9技术，这些技术的迅速成熟都给基础生物学研究、临床医学研究提供了更为方便和快捷的分子生物学工具。技术进步必将在未来给科学研究及基因治疗研究带来更为广泛的发力！这在2014年以来的频频出现的Cas9 ...

玛丽和乔是一对孪生子，她们拥有相同的遗传学特征而且共同生活在一个幸福的家庭里。随着他们的不断成长，两个人都非常喜爱体育和艺术，同样学习成绩优良而且几乎在每一个方面哪怕是细节方面都显示出了惊人的相似。然而等到成年以后，她们的生活和个性却产生了明显的差异：在玛丽二十岁出头的时候，一件恶梦般的事情发生了，她被诊断患有精神分裂症。类似这样的例子长期以来一直使遗传学家们感到困惑：尽管拥有相同的DNA甚至常常是同样的成 ...

第一章 质粒DNA的分离、纯化和鉴定 第一节 概 述　　把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 　　质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所 ...

《分子克隆参考》编写已经进入收稿阶段，请各位战友抓紧时间编写，计划在年底前出书，收稿截止至12月15日。已经PM给报名参加撰写的战友，请将文稿用word发送至我的邮件，或以附件形式贴在跟帖中。同时希望你们在以下贴中回帖，以便加分（初步定为5分）和核实内容，违期将示为自动放权，谢谢您的合作！请各位斑竹根据目前收稿情况选择几章较熟悉的，然后我再具体安排章节进行校正审稿，特殊章节（不属于实验技术范畴）再讨论，也请战友投稿 ...

我现在正在做的是AFLP方面的东西，结果检测必须要做变性胶电泳才能看到，但是前一阵子我做的一直不顺，条带少，我试着减少引物的筛选个数和降低退火温度结果还是这样，一时不知道从何处找原因，想求教你的是1、先看看我前两天做的变性胶电泳图片，条带太少，我看到的文献都是说条带在50到100的样子，为什么我跑的是这样子的呢，我做了减少引物的筛选碱基的个数和降低退火温度，结果还是差不多，请问各位做过AFLP的或者是跑变性聚 ...

此资源转自小木虫，都可以下，相当清晰，但是需要安装米人，本人测试过了。希望好心的版主可以给点积分，谢谢了先对于刚进实验室的新手来说，有太多仪器不懂，有太多操作不了解，现在把浙大基因工程实验操作讲解视频分享给大家，希望能对实验室新手有帮助~1.细菌基因组DNA的提取.wmvhttp://d.namipan.com/d/ba51df852bf4755d02e6a74a8ef3e04000f112bd57a77f042.P ...

Blast指南http://www.dxy.cn/bbs/user/download/385095/BLAST%20tutorial%20%28part%201%29.htm如何进行BLAST,如何分析BLAST后的结果,请访问http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Education/BLASTinfo/tut1.htmlblast 讲座幻灯片http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&i ...

摘要：荧光条形码标记的单分子检测技术是一种全新的高通量检测基因表达谱、miRNA等分子的技术，其定量结果可与real-time PCR相媲美。由于它的高通量和高精确性填补了基因芯片和real-time PCR之间的技术空白，一经问世大受欢迎，其检测结果频频登载在nature、science、cell等顶级杂志上。NanoString公司研发的荧光条形码标记的单分子检测技术最早诞生于Leroy Hood博士创立的系统生物 ...

15天构建三个重组质粒经验－－态度决定成败－－献给刚刚进入实验室的新战友前言：我自己的课题是单克隆抗体的制备及其初步应用，总共花了六个月的时间基本做完。做完了之后我想现在单抗的文章不可能发到比较好的杂志，就想能不能利用剩下的将近一年的时间来再做一个比较好的课题。下面是从我的试验记录上面摘抄的一部分，也就是构建载体的这一段时间所记录的东西。第一天：同实验室的一位同学是做某蛋白上面的一段的免疫活性的研究，我就像我 ...

一些分子生物学常用实验技术方法大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第一节 概 述　　在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。　　转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种 ...

真核细胞的mRNA在加工过程中有一个比喻为“穿鞋戴帽”的过程，因此mRNA的3'末端都带有一段Poly A，这是利用逆转录酶制备cDNA文库的基础。但是由于cDNA的5'端的序列各不相同，如何获得全长的cDNA，如何扩增由微量的mRNA逆转录得到的cDNA文库、如何利用已知片断序列得到全长的cDNA（即RACE），曾经是一个令人困扰的问题。常见的做法是在合成cDNA的双链后在两端连上接头，利用已知的接头序列再进行扩增 ...

以下是我翻译的脂质体说明书，请多指教————————————————————————————InvitrogenLipofectamineTM 2000Cat. No. 11668-027 Size: 0.75 mlCat. No. 11668-019 Size: 1.5 ml含量及保存：LipofectamineTM 2000 为液态，浓度为1mg/ml。储存在4℃，注意不能冻存。重要原则：进行转染时应遵循下面的原则：1．对大多数细胞来说，DNA(ug)与脂质体(ul)混合的比例应为1:2至1:3。例如 ...

对于刚开始做实验的人来说，收集资料比不可少，然而现在重复性资料很多很杂，要想在较短的时间内获得更过的信息，就必须找到高效的信息资源，我以下的内容也是从各种渠道收集来的资料，我把它们做了整理，截取了其中比较有价值的内容进行编排，希望你看过之后能对核酸杂交有个全面的认识，在做实验时少犯错误。核酸杂交（Nucleicacid hybridization），又称核酸分子杂交。原理：是核酸变性和复性理论。双链的核酸分子在某些理 ...

标题：【申请上传】Molecular Biology of the Gene (Watson J.D., et al., 5th edition, 2004)内容：Molecular Biology格式：PDF大小：110 MB语种：英文简介：http://www.pearsoned.co.uk/Bookshop/detail.asp?item=300126#Description位置：老赵一号航母核酸基因技术区/pub/Molecular Biology of the Gene--------------- ...

本人倾情上传本校基因工程专业的试题及答案。作为送给核酸技术讨论版的礼物。希望版主加分。基因工程与基因体外表达练习题及其答案一、填空题1． 基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。2． 基因工程的两个基本特点是： (1)____________，(2)___________。3． 基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。4． 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小 的片段，可以构建显示该区域各 ...

看到很多网友还在找这些相关的书籍，在这里再提供给大家。已测试可以下。文件名称: 现代分子生物学实验技术全套(第二版 卢圣栋主编) 文件格式： PDF文件大小: 55.09MBhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/11310519文件名称: 精编分子生物学实验指南 中译本 奥斯伯 文件格式： PDF文件大小: 20.22MBhttp://down.aybook.cn/book7/aybook.cn_xiandaishengwu1012.pdf文件名称: 分子 ...

半个月前我正式进入实验室学习，老实说，这半个月是痛苦的，也让我感受颇多，这里我愿意把自己的心得和大家分享，尤其希望对那些和我一样刚进实验室或将要进的园友有点帮助。今年是我研究生的第二年，第一年是理论学习，没有进实验室，我老板是领导，脱离科研好多年了，对我们的学习几乎没什么指导，对这一阶段，我的惨痛教训如下：⒈学习，学习，努力学习，千万别逃课，崩管老师好不好，听听总好，说不定什么时候就有启发，千千万万是那门分子生物学及技 ...

整理整个定向园的关于细胞转染的内容如下：干细胞转染率的问题骨髓基质干细胞转染BMP-2骨形成蛋白后分化为骨细胞，之后其转染基因还会长期表达吗？★以上为干细胞与组织工程讨论版版块发表的帖子，共：2个★p19 细胞转染的请教promega用于细胞转染的试剂盒的质粒提取问题,谢谢关于PC12细胞转染请教关于稳定转染的问题，是在受不了了。中秋节，顺便祝丁香园的各位兄弟姐妹中秋快乐,试验顺利！请教关于细胞转染的问题？请教关于 ...