单克隆抗体技术

首先要了解什么是噬菌体噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或者螺旋体等微生物病毒的总称，在电子显微镜下有三种形态：蝌蚪形、丝形、微球形，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。跟别的病毒一样，噬菌体只是一团由蛋白质外壳包裹的遗传物质，大部分噬菌体还长有“尾巴”，用来将遗传物质注入宿主体内。更狠的是，噬菌体颗粒感染一个细菌细胞后可迅速生成几百个子代噬菌体颗粒，每个子代颗粒又可感染细菌细胞，再生成几百个子代噬菌体颗粒。当把细 ...

DimAb®重组单克隆抗体开发平台缔码生物拥有独创的DimAb®重组单克隆抗体开发平台，可以在完成动物免疫后直接从外周血中获取阳性B细胞并克隆抗体基因序列。从单只免疫动物中我们可以得到上千个靶点结合阳性B细胞克隆，从中我们能够更为高效的筛选出具有高特异性，高灵敏度，和高亲和力重组单克隆抗体。1. DimAb®平台流程2.DimAb®平台优势3. DimAb®与其它抗体开发平台比较 B细胞抗体开发平台可成药性更高一个新开发的 ...

zhuxiangling123 主要有两个问题请高手指教一、我们现有一个单抗，氨基酸序列已知，如何分析其二级结构?如何分析其是否存在游离半胱氨酸及其存在位置。有没有专门分析抗体二级结构的软件？二、现在得到一个新的单抗的重、轻链基因，有没有软件能分析单抗重轻链匹配程度？freecell 1. Try Igblast.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/igblast/2. http://www.lib.cau ...

抗海带多糖单克隆抗体的制备一 实验目的利用单克隆抗体的制备原理和技术，将纯化的重组钙网蛋白片段（CRT39-272）和海带多糖（laminarin）偶联作为抗原免疫小鼠，增强海带多糖的免疫原性，制备抗海带多糖（LAM）的单克隆抗体。 二 实验原理骨髓瘤细胞在体外培养时能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体，而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲 ...

Evolution of production methodsThe total number of anticancer mAbs in clinical study by companies has risen steadily over time. In fact, the rate at which new oncology mAbs entered clinical study sponsored by commercial organizations has more than tripled since the 1980s, from 4.3 per year in the ...

单克隆抗体的制备过程单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大，它不仅被广泛应用于生化和免疫检测，而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。动物免疫取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原（20 μg/只），第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化，0.2 mL/只；两周后进行第二次免疫，抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化，皮下注射，0.2mL/只；两周后进行第三次免疫，免疫方法及剂量同 ...

单克隆抗体的制备过程单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大，它不仅被广泛应用于生化和免疫检测，而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。动物免疫取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原（20 μg/只），第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化，0.2 mL/只；两周后进行第二次免疫，抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化，皮下注射，0.2 mL/只；两周后进行第三次免疫，免疫方法及剂量同第 ...

一、免疫失败的可能原因及应采取的措施 有时不能获得满意的抗血清，可从下列几方面找原因，并改进之。 1、免疫动物的种属及品系是否合适，可考虑改变动物的种属或品系，或扩大免疫动物的数量。 2、抗原质量是否良好，可改用其它厂家的产品或改用同一厂家的其它批号，也可考虑改变抗原分子的部分结构，或改进提取方法。一、免疫失败的可能原因及应采取的措施有时不能获得满意的抗血清，可从下列几方面找原因，并改进之。1、免疫动物的种属及品系是否合适，可 ...

单克隆抗体制备技术Burnef（1957）细胞系群选择学说（clonal selection theory）认为，每一个淋巴细胞只具备单一的受体特异性，受到刺激后，只能产生一种针对其可识别的抗原决定簇的抗体；抗体的多样性是由机体遗传存在着能与众多抗原决定簇起反应的淋巴细胞系而决定的；一个祖先抗体形成细胞分裂繁殖而成的细胞系（克隆clone或无性繁殖细胞系）产生的抗体具有完全相同的分子结构和性状；从一个克隆细胞系产生的 ...

1. 为什么免疫后没有效价或免疫后效价低？ 答：可以从这几个方面一一考虑： （1）设计的抗原与被免疫的动物内源蛋白有极高的同源性或者抗原是免疫原性极差的小分子物质。对于前一种情况应该重新设计抗原，设计抗原时尽量选取目标蛋白特异性的序列，可以设计为短肽然后再与载体蛋白偶联之后免疫；对于后一种情况，首先确认小分子物质是否已经正确地和载体蛋白偶联，如果偶联没有问题，可以更换其它的载体蛋 ...

1、动物免疫 (1) 抗原制备 制备单克隆抗体的免疫抗原，从纯度上说虽不要求很高，但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加，同时可以减轻筛选的工作量。因此，免疫抗原是越纯越好，应根据所研究的抗原和实验室的条件来决定。一般来说，抗原的来源有限，或性质不稳定，提纯时易变性，或其免疫原性很强，或所需单抗是用于抗原不同组分的纯化或分析等，免疫用的抗原只需初步提纯甚至不提纯，但抗原中混杂物很多，特别是如果这 ...

一、单克隆抗体的概念 抗体是机体在抗原刺激下产生的能与该抗原特异性结合的免疫球蛋白。常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的，因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇，所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体，仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。因而，常规血清抗体 ...

单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大，它不仅被广泛应用于生化和免疫检测，而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。 动物免疫 取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原（20 μg/只），第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化，0.2 mL/只；两周后进行第二次免疫，抗原与等量弗氏不完全佐剂乳化，皮下注射，0.2 mL/只；两 ...

1. 取第二轮筛选得到的阳性克隆贮存液上清。 2. 将过夜培养的 XL1-blueMRF' 细菌 2000 转/ 分离心 10 分钟，将细菌溶解在10mMMgSO4 中，调整细菌溶度到 OD600=1.0。 3. 在一个 EP 管中加入：200ul XL1-blueMRF' 细菌+250ul phagestock（步骤 1）+1 ul ExAssisthelper phage。 ...

一、实验目的： 单克隆抗体制备是细胞免疫学的一个重要里程碑，它涵盖了细胞培养、细胞融合、免疫动物和抗体效价检测等各个方面内容。了解单克隆抗体制备的原理、主要步骤和方法。 二、实验原理： 骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能 ...

如今，单克隆抗体市场炙手可热。一方面，由于巨大的应用价值，单克隆抗体需求强劲。另一方面，单克隆抗体制备工艺复杂、周期长。为此，能否快速制备出高质量的单克隆抗体已成为影响抗体研究应用的关键。46天制备出高质量的单克隆抗体在几年前在京天成生物技术（北京）有限公司得以实现，从而使之在全球制备高质量单克隆抗体服务竞争中占极大优势。 单克隆抗体具有理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于 ...

R&D of Monoclonal Antibodies for HSV1一、HSV1简介 HSV，又称为单纯疱疹病毒 (herpes simplex virus)是一种双链DNA病毒。主要有两个血清型：HSV-1和HSV-2。 HSV1是引起病毒性角膜炎、病毒性脑膜炎、口唇、生殖器黏膜和新生儿感染的主要病原体。其感染在全世界非常普遍，不仅可产生原发性感染，而且还能产生潜伏感染和复发性感 ...

嗜酸性粒细胞的分离嗜酸性粒细胞在支气管哮喘、过敏性鼻炎等发病过程中起重要作用，研究其功能需要制备高纯度和高活力的嗜酸性粒细胞。以下介绍一种根据中性粒细胞膜选择性表达FcγRIII（CD16），采用包被有抗CD16单克隆抗体的磁珠，通过负性选择方式快速简便的分离脐血嗜酸性粒细胞的方法。【试剂及配制】（1）各种比重的聚蔗糖-泛影葡胺分离液A液：12% 比重1.090的聚蔗糖-泛影葡胺分离液B液：9 ...

抗TCR介导的CTL活性酯酶分析法 细胞毒性T细胞对靶细胞杀伤的主要机制是通过释放的穿孔素-颗粒酶系统介导的溶靶细胞作用或通过fas/fasL系统介导的细胞凋亡作用。因此，对CTL颗粒酶的胞泌作用分析可反映细胞毒性T细胞功能。该方法操作简便且无需靶细胞作为指示细胞。【基本原理】应用直接针对TCR的单克隆抗体，模拟特异性靶细胞的作用，诱导CTL细胞内颗粒丝氨酸酯酶等的释放。抗TCR可与C ...

可溶性蛋白抗原特异性Th克隆的制备 与可溶性蛋白抗原反应的特异性Th克隆的制备需体内致敏，以及需要同系脾细胞作为抗原提呈细胞。有两种类型的辅助T细胞，即分泌IL-2的Th1和分泌IL-4的Th2，前者在克隆时需加入IFN-γ。 【材料和试剂】 （1）免疫用动物； （2）蛋白抗原和完全福氏佐剂（CFA）； （3）完全RPMI-1640培养液； （4）生长 ...