多克隆抗体制备

抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。一般而言，抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体 ，由多个B淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体， 本篇主要讲述兔源性多克隆抗体制备的相关流程。抗原有两个基本特性，即抗原性和免疫原性。有抗原性的物质不一定有免疫原性， ...

目前国内用于全自动系列化分析仪的免疫透射比浊法试剂 CRP，出现了两种：普通 CRP 和超敏 CRP。普通 CRP 有较高的线性，但灵敏度不好；超敏CRP有较高的灵敏度，但线性较低；这样就出现了一种试剂两种名称，其用途也有所区别。近年来，随着检验技术的发展，开始出现了一种全量程的 CRP，这种 CRP 既能满足较高的灵敏度，又能满足较高的线性。当前国内多家 IVD 企业推出了全量程 CRP 免疫透射比浊法诊断试剂盒，而其免疫透射比浊法 CRP 的抗体原料绝大多数来源于国 ...

david9931 请问各位大侠，有没有订做过磷酸化的丝氨酸或磷酸化的苏氨酸抗体，哪家公司做的比较好，小弟想订做目的蛋白特异位点的丝氨酸、苏氨酸的磷酸化的抗体，帮忙给指点下，多谢啦euthor_hsu 这种抗体定做很难。毕竟要的是抗一个特异的氨基酸的磷酸化位点。就我所知cisbio有anti-phosphothronine 和anti-phosphotyrosine的抗体，PAb和MAb都有，但是没有anti-phosph ...

利用家兔的多抗制备方法

Rabbit anti-GAPDH(SF-PA005)（兔抗 GAPDH 多克隆 IgG 抗体）背景甘油醛 -3- 磷 酸脱氢酶（ Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）是糖酵解（glycolysis）过程中的关键酶，分子量为37kDa 左右。它催化甘油醛-3-磷酸的氧化磷酸化反应。GAPDH 作为看家基因 在同种细胞 或者组织中一般是恒定、高水平表达的，常用作 Western Blot 实验的内参照.来源兔抗GAPDH多克隆IgG ...

最近要免疫动物，所以搜集整理了一点方法。想请做过的ggjjddmm指导一下。看看有没有需要改进的地方？　　　　　　　制备多克隆抗体实验方案动物：新西兰兔（年龄＞３个月）免疫佐剂：福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂方法一：１００ug Hexon protein 溶于0.5ml Tris-HCL缓冲液中, ，与等体积的福氏完全佐剂混合后，于家兔后肢及后脚掌多点皮下注射。以后每隔两周加强免疫1次，抗原改用福氏不完全佐剂配制，用量同前，在每次加强免疫7d后，用免疫双 ...

免疫检测法 抗体制备技术　 抗体（antibody，Ab）是机体免疫系统受到抗原刺激后产生的特异性球蛋白，称免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。根据其重链稳定区的分子结构和抗原性的不同，可将为类Ig分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大类。由遗传基因决定所产生的抗体，称天然抗体（natural antibody），由抗原激发免疫细胞产生的抗体，称免疫抗体（immune antibody）或称特异地性抗体。人工制 ...

本人利用该方法制备了高效价的多克隆抗体，与大家分享！AnimalsHealthy male New Zealand rabbits aged 3-6 months (body weight ~ 2.5 kg) lived in animal house at least for 3-4 days for adapting to the new circumstance.Polyclonal antisera productionSample A: Emulsify your aimed protein 200-300 mg in PBS with same volu ...

一、抗血清的制备　　有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。　　（一）用于免疫的动物　　作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为/// ...

1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多 ...

QuickAntibody系列免疫佐剂是由北京康碧泉公司研发的一类具有自主知识产权、独特配方的新型免疫佐剂，专业用于制备小鼠单克隆和多克隆抗体。 与常规使用的弗氏佐剂的比较 QuickAntibody佐剂特色详解： 1、为什么无需乳化？ QuickAntibody系列佐剂为水溶性佐剂，抗原与佐剂仅需用移液器吹打几下，即可混匀；弗式佐剂为油性佐剂，需要繁琐的乳化，形成 ...

免疫记忆是适应性免疫的特征 1．记忆细胞来自抗原选择下发生扩增的淋巴细胞克隆 只有克隆选择学说而非侧链理论才可以解释免疫记忆现象。这是因为发生克隆扩增的淋巴细胞可以长期存活，而脱落下来的受体和抗体分子寿命很短。可见经历抗原克隆选择而留下的记忆细胞必然显示抗原特异性，这是牛痘疫苗可以预防天花却不能保护人体免受其他疾病侵扰的原因。在这个意义上，免疫记忆只出现在由淋巴细胞介导的适应性免疫应 ...

抗体在疾病的诊断和免疫防治中的重要作用，使人们对抗体的需求越来越大。人工制备抗体是大量获得抗体的重要途径。早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物，获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位，加之所获得的抗血清也未经免疫纯化，因此，获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物，即多克隆抗体(polyclonal antibody)。用于制备抗血清的动物也因抗体需求量的增加 ...

饱和硫酸铵盐析沉淀法纯化多克隆抗体 　【材料和试剂】　　(1)饱和硫酸铵(saturated ammonium sulfate，SAS)。　　(2)透析袋。　　(3)PBS。　　(4)高速低温离心机。　　【操作步骤】　　（1）待提取样品经4℃或室温离心13 000r/min(20000×g)，30min，收集上清；　　（2）取上清约20ml与等体积生理盐水混合后，于搅拌下缓慢滴加40ml ...

制备多克隆抗体免疫方案及免疫效价的检测 抗原注射途径可根据不同抗原及试验要求，选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌、淋巴结周围、耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2～4周。常规免疫方案为抗原加CFA皮下多点注射进行基础免疫；再以免疫原加IFA作2～5次加强免疫，每次间隔2～3周，皮下或腹腔注射加强免疫。完成免疫程 ...

辛酸提取法纯化多克隆抗体　 　该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。　　【材料和试剂】　　（1）正辛酸。　　（2）60mmol/L，pH4.0醋酸缓冲液，PBS。　　（3）透析袋。　　（4）高速低温离心机。　　【操作步骤】　　（1）将待提取样品用60mmol/L，pH4.0醋酸缓冲液稀释3～4倍，调pH至4.5，对含脂质较高的标本可采用二 ...

DEAE-纤维素提取法纯化多克隆抗体 该法提取IgG简便，既可小量提取，也可大量制备。 1．批量提取法 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50g，置于1000ml烧杯中，先以蒸馏水漂浮除去细颗粒，再经酸碱处理后，用0.01～0.05mol/L，pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。将水分抽干，或用布氏滤斗(内放两层滤纸)过滤，收集湿纤维素，以降低其离子强度。按 ...

多克隆抗体和单克隆抗体的比较 免疫亲和层析技术使用单克隆抗体或经过亲和层析纯化的多克隆抗体。在某些情况下，可用未纯化的多克隆抗体，但一般不使用混合的单克隆抗体。1、应用多克隆抗体进行免疫亲和层析 使用多克隆抗体进行免疫亲和层析有一定的局限性，因为多克隆抗体通常结合抗原分子上的多个表位，虽然亲合力高，但洗脱困难。当一种抗原与多种不同的抗体结合后，需要很苛刻的洗脱条件，通常会损坏抗体层 ...

特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定【基本原理】 本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别特异性MHC/抗原肽复合物的细胞，即抗原特异性CTL ...

反向空斑形成试验（RHPA）【基本原理】 反向空斑形成试验（reversed hemolytic plaque assay，RHPA）是一种体外检测人类Ig分泌细胞的方法。该法将待检人的PBMC或组织来源的淋巴细胞（如扁桃体、脾细胞等）、SPA致敏的羊红细胞（SPA-SRBC）、抗人Ig抗体及补体4种成分混合，注入由两张玻片制成的小室内，密封小室，37℃温育3～5h。此时抗人IgG抗体的F ...