植物生理

实验24 根系体积的测定 原理 　　根据阿基米德原理，根系浸没在水中，它排开水的体积即为根系本身的体积。利用简单的体积计，用水位取代法，即可测知根系的体积。 仪器 　　长足漏斗　　　 移液管 　　橡皮管　　　　 铁架 操作步骤 　　1．仪器装置 　　用橡皮管连接作为体积计的长足漏斗 ...

实验25 根系活力的测定 　　植物根系的作用，主要有(1)对地上部的支持和固定；(2)物质的贮藏；(3)对水分和盐类的吸收；(4)合成氨基酸、激素等物质。因此根系的活力是植物生长的重要生理指标之一。这里介绍两种测定方法，供选用。 Ⅰ.α—萘胺氧化法 原理 　　植物的根系能氧化吸附在根表面的α─萘胺，生成红色的α—羟基—1—萘胺，沉 ...

实验26 硝酸还原酶活性的测定 原理 　　硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中关键性酶，与作物吸收和利用氮 　 　　 　　简单易行，在一般条件下都能做到。 红色的偶氮染料。反应液的酸度大则增加重氮化作用的速度，但降低偶联作用的速度，颜色比较稳定。增加温度可以增加反应速度，但降低重氮盐的稳定度，所以反应需要在相同条件下进行。这种方法非常灵敏，能测定每m ...

实验29 叶绿体色素的提取和分离（纸层析法） 原理 　　叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质，主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性，可用丙酮提取。 　　分离色素的方法有多种，纸层析是其中最简便的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时，由于混合物中各成分在两 ...

实验30 叶绿体色素的分离（柱层析法） 原理 　　吸附剂如蔗糖、Al2O3、MgO、CaCO3等对各种物质有不同的吸附力，吸附力的大小随吸附剂的种类而异；同一吸附剂在不同的溶剂中吸附力的大小也不同。被吸附的物质由于其结构中极性基团的种类和数量不同，吸附力也不相同。各种官能团的极性大小次序为；－CH2－CH2－＜－CH=CH＜－CH=CH－CH=CH－＜－OCH3＜ ...

实验31 植物体色素及其性质 原理 　　植物色素包括脂溶性的叶绿体色素和水溶性的细胞液色素，前者存在于叶绿体，与光合作用有关，如叶绿素；后者存在于液泡中，特别与花朵的颜色有关，如花青素属黄酮类物质。了解它们的性质有助于对其生理功能的理解。 仪器药品 　　分光计 　　　　　　天平 　　研钵　　　　　　　 分液漏斗 　　移 ...

实验32 叶绿素a和b的吸收光谱曲线 原理 　　叶绿素能够吸收一定波长的可见光，而让其他波长的光透过，这是叶绿素的光学特性之一。将叶绿素的吸光度对波长作图，绘成的曲线，称为叶绿素的吸收光谱曲线。了解叶绿素的吸收光谱曲线，有助于理解光合作用中的光性质。 仪器药品 　　751型（或721型）分光光度计 　　　　 台天平 ...

实验28 真核生物钙调素的酶联免疫测定法 原理 　　本法是一种测定抗体的竞争性固相酶联免疫测定法(enzyme linked immunosorbent assayELISA)。先将抗原──CaM与固相载体（聚苯乙烯微量滴定板）结合，然后将经待检CaM（标准样品或检样）部分中和的兔抗CaM抗体加入微量滴定板孔中，抑制固相CaM和抗体的反应。接着，废弃上清液 ...

实验35 改良半叶法测定大田光合强度 原理 　　改良半叶法系将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处，另一部分则留在光下进行光合作用，过一定时间后，在这两部分叶片的对应部位取同等面积，分别烘干称重。因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重，开始时被视为相等，照光后叶片重量超过暗中的叶重，超过部分即为光合作用产物的产量，并通过一定的计算可得到光合作用强度。 ...

实验33 叶绿素a和b含量的测定（分光光度法） 原理 　　如果混合液中的两个组分，它们的光谱吸收峰虽有明显的差异，但吸收曲线彼此又有些重叠，在这种情况下要分别测定两个组分，可根据Lambert—Beer定律，通过代数方法，计算一种组分由于另一种组分存在时对吸光度的影响，最后分别得到两种组分的含量。 　　如图9叶绿素a和b的吸收光谱曲线，叶绿素a的最大吸收峰在66 ...

实验37 植物光合强度的测定（氧电极法） 原理 　　植物进行光合作用放出氧气，可以用薄膜氧电极进行测定，它具有灵敏度高，操作简便，可以连续测定水溶液中溶解氧含量及其变化过程（参阅实验88）。 仪器药品 　　氧电极仪　　　　 记录仪 　　电磁搅拌器 　　　超级恒温水浴 　　放映灯　　　　　 照度计 　　大号注射器 　　　碳酸氢钠 　　饱和亚硫酸钠 　　0.1mol/L磷酸缓 ...

实验36 植物光合强度的测定（pH比色法） 原理 　　空气中的CO2可以溶解在水中形成碳酸，使得水溶液的pH值发生改变，当在一定温度下达到平衡时，溶液的pH即有一确定的数值。在这种情况下，如果知道了溶液的pH值，即可计算空气中CO2的浓度；知道了光合作用前后空气中CO2浓度的变化，即可计算光合强度。本方法使得上述平衡关系在一密闭系统中建立，以排除外界环境的影响，用NaH ...

实验39 藻类植物光合强度测定 原理 　　藻类植物在光合作用中吸收CO2，放出氧气。测定盛藻容器水中的含氧量，即可计算出藻类植物的光合强度。 　　以Winkler氏法测水中溶解的氧，方法准确而且简单易行。甚至极谱测氧都需用此法校准。 　　本法是根据向定量的水中加入二氯化锰（MnCl2）及氢氧化钠，二者反应产生氢氧化亚锰。水中如果有氧，则Mn(OH)2可被氧化成 ...

实验40 离体叶绿体对染料的还原作用（希尔反应） 原理 　　离体的完整叶绿体，在合适的氧化剂存在下，例如染料二氯靛酚（DCPIP），当照光时，可以使水光解释放氧气，同时使染料还原，结果染料从原来的蓝紫色变为粉红色至无色。此反应为希尔所发现，故常称为希尔反应。可用分光光度计测定反应前后染料吸光度A的变化，变化在4─5分钟内呈线性关系。 仪器药品 ...

实验42 乙醇酸氧化酶活性测定（比色法） 原理 　　乙醇酸氧化酶在光呼吸作用中起重要的作用，在它的作用下将乙醇酸氧化生成乙醛酸和过氧化氢，反应如下： 　　如果我们以二氯靛酚作为氢受体，接受乙醇酸氧化时脱下的H ，使二氯靛酚还原，此时原来为蓝色的染料则褪至无色，其反应如下： 　　利用染料颜色的变化，即可对酶的活性进行比色测定。由于在酶的粗制品中还 ...

实验43 淀粉的合成──淀粉磷酸化酶 原理 　　植物的组织中有一种淀粉磷酸化酶，能利用1—磷酸葡萄糖合成淀粉，生成的淀粉可用I2—KI染色检出。 仪器药品 　　台天平 　　　　离心机 　　水浴锅 　　　　研钵 　　移液管 　　　　1%1—磷酸葡萄糖 　　0.1mol/L柠檬酸　　0.2mol/L磷酸缓冲液，pH6.5，（见附表2）。 ...

实验44 植物呼吸强度的测定 　　呼吸作用是一切生活细胞所共有的生命活动，是新陈代谢的一个重要组成部分，是植物所有生理活动所需能量的来源，对植物有着十分重要的意义，一旦呼吸作用停止，也就预示生命的结束。 　　测定呼吸作用，一般测定呼吸过程消耗的O2量，或放出的CO2量。方法很多，除下面介绍的几种外，还可用华氏呼吸计（参阅实验87）和氧电极法（参阅实验88）。 ...

实验45 呼吸商的测定 原理 　　呼吸作用吸收的O2和放出的CO2的体积之比称为呼吸商（respiratory quotient，简称RQ）。呼吸商的大小则因呼吸作用消耗的基质而异，若以碳水化合物为基质时，呼吸商等于1，以有机酸为基质则大于1，以油类为基质则小于1。研究呼吸商对于了解呼吸作用的性质有很大帮助。 　　这里介绍测定呼吸商的方法，是利用丹尼（Denny，江 ...

实验47 离体线粒体的氧化作用和磷酸化作用 原理 　　当供给植物充足的氧气时，植物细胞可使底物完全氧化。以葡萄糖作为呼吸底物完全氧化时，最后生成CO2，吸收的O2被还原成水，并且每1摩（尔）葡萄糖的氧化产生38摩（尔）ATP： 　　C6H12O6 6O2 38ADP 38Pi→6CO2 6H2O 38ATP 　　其中大部分ATP是通过称为氧化磷酸化作用形成的， ...

实验48 植物组织中几种酶的组化定位鉴定 原理 　　在植物生理学的研究中，可利用组织化学的方法，来说明植物体内的生理活动问题。例如，当需要检定某种物质性质和在植物体内分布时，用组织化学的方法，可以达到定位和定性的目的，而且有时比用剥离的官或组织，作生化测定更能说明问题。植物组织中酶的组化鉴定的基本原理，是以某物质为底物在专一酶作用下，产生一种有颜色的化合物来表明有 ...