实验43 淀粉的合成──淀粉磷酸化酶

 

实验43 淀粉的合成──淀粉磷酸化酶

 

原理

 

　　植物的组织中有一种淀粉磷酸化酶，能利用1—磷酸葡萄糖合成淀粉，生成的淀粉可用I₂ —KI染色检出。

 

 

仪器药品

 

　　台天平 　　　　离心机

　　水浴锅 　　　　研钵

　　移液管 　　　　1%1—磷酸葡萄糖

　　0.1mol/L柠檬酸　　0.2mol/L磷酸缓冲液，pH6.5，（见附表2）。

　　I₂ —KI溶液：溶解1.5g KI于少量蒸馏水中，加入结晶碘0.3g，待溶解后，稀释成100ml。

 

操作步骤

 

　　1．取马铃薯块茎一个，削去皮，切成小块，称取10g，于研钵中加石英砂少许，用10ml 0.1mol/L柠檬酸—0.2mol/L磷酸缓冲溶液研磨成匀浆。

　　2．用纱布滤取汁液，于3500r/min离心15分钟，以除去淀粉，即为粗制酶液。

　　3．取小试管2支，分别加入1%1椓姿崞咸烟—1ml，再于1管中加入1ml粗制酶液，另1管中加入已经煮沸15分钟的粗制酶液。摇匀试管，立即各吸取1滴于白瓷板上，分别加1滴I₂ —KI溶液，测试有无淀粉存在。

　　4．以后每隔10分钟，取试管中混合液1滴，检查淀粉的生成。比较煮沸能否使酶失活？