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化学生物学实验技术

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细菌的保存方法与无菌操作

细菌的保存方法1。细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保存)。2。细菌保存于含有甘油的培养物中:(1):在液体培养基中生长的细菌培养物:取0.85 ...

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药物合成反应中常用的缩略语

aelectron-pairacceptorsite电子对-接受体位置Acacetyl(e.g.AcOH=aceticacid)乙酰基(如AcOH乙酸)Acacacetylacetonate乙酰丙酮酸酯Addnaddition加入AIBNαα’-azobisisobutyroniytileαα’-偶氮双异丁腈Amamyl=pentyl戊基anhanh ...

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葡萄糖生产中的结晶控制

随着近几年来葡萄糖在医药、化工、食品行业的广泛应用,国内葡萄糖生产得到了快速的发展,但是国内葡萄糖生产工艺过程、操作方式大都比较简单落后,多数操作都是由人工现场来完成,技术指标很难保证。随着DCS的快速发展和广泛应用,国内葡萄糖生产工业的自动化、连续化水平也有了很大的提高,各个生产厂家为了适应未来市场对不同产品的需求、降低成本、优化生产工艺过程,大都已经或准备在其生产过程中采用DCS控制生产过程。 ...

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4-羟基-2,6-二甲氧基苯甲醛合成工艺

升三口瓶中,加入770 g (5.00 mol) of 35-二甲氧基苯酚和936 mL (10.04 mol) POCl3,搅拌10min,冷却到0度,控制温度低于10度,再4小时内滴加入582 mL (7.52 mol)无水DMF,然后升温至室温,搅拌16小时,反应液倒入到11.5 kg冰中,再用3X2升水将三口瓶涮干净,室温搅拌1小时,加入NaOH(~1.2 kg)至 pH6.0,过滤,40 ...

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如何提高原料药合成的效率(中英对照)

有机化学面对持续的挑战,开发和优化了积极的药物成分(API)的的合成。 These challenges involve a multitude of issues designed to improve yield purity stereoselectivity process conditions (ie temperature and pressure) scalability and p ...

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处方禁忌

1、处方 生理盐水 100ml + 奥美拉唑 40mg + 维生素B6 0.3 结果:输液逐渐变成黄色,最后变成黑色。 分析:奥美拉唑和维生素B6的配伍未见文献报道,说明书也未说明。奥美拉唑是一种碱性药物,能升高生理盐水的PH值,维生素B6又名盐酸吡多辛,含酚羟基,PH值为3~4,两者作用发生酸碱中和,变色可能是维生素B6的酚羟基在碱性条件下被氧化的缘故,所以两者不应在 ...

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香菇菌种生产的方法与步骤

(一)母种生产培养基的配方选择一是马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA):去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂16~23克,水1 000毫升。氢离子浓度1 000~10000纳摩/升(pH5~6),用于分离、培养菌种。二是PDA改良培养基(甲):马铃薯(去皮)200克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾(KH2PO4)2克,硫酸镁(MgSO4)0.5克,维生素B110毫克,琼脂20克,水1000毫升,灭菌后 ...

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牛人实验经验,都是细节

变性条件——SDS LB直接裂解:用常温或者高温预热过(预热更有利于阻止蛋白水解或者磷酸酶去磷酸化,但容易遗忘,LB久煮某些性质会改变)的undefinedSDSLB(或者略高1.undefined)直接加到细胞或者组织上并煮样。通常6孔板细胞80%以上密度,需200ul,其他按平板面积比类推。通常条件下,SDSLB都是过量的(因此不一定要严格参考SDS LB稀释比);如果SDSLB不够,样品核酸、蛋白浓度过高时,煮样后会发 ...

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脂多糖预处理和己酮可可碱对大鼠急性肺损伤的

北京大学第一医院麻醉科 100034薛昀 吴新民目的 观察小剂量脂多糖预处理和己酮可可碱对脂多糖致急性肺损伤大鼠肺部病变的影响,并探讨其机制。方法 成年Wistar大鼠48只,随机分为4组:对照组(12只),腹腔内注射生理盐水(C组);脂多糖组(12只),腹腔内注射脂多糖6mg/Kg(LPS组);己酮可可碱组(12只),腹腔内注射己酮可可碱20mg/Kg后半小时,再注射脂多糖6mg/Kg(P ...

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葡聚糖凝胶层析如何操作

1.凝胶的预处理 交联葡聚糖凝胶的市售商品多为干燥颗粒,使用前必须充分溶胀。方法是将欲使用的干凝胶缓慢地倾倒入5~10倍的去离子水中,参照相关资料中凝胶溶胀所需时间,进行充分浸泡,然后用倾倒法除去表面悬浮的小颗粒,并减压抽气排除凝胶悬液中的气泡,准备装柱。在许多情况下,也可采用加热煮沸方法进行凝胶溶胀,此法不仅能加快溶胀速率,而且能除去凝胶中污染的细菌,同时排除气泡。2.装柱 层 ...

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常用真空单位换算

常用的真空度单位有Pa、Kpa、Mpa、大气压、公斤(Kgf/cm2)、mmHg、mbar、bar、PSIatm等。近似换算关系如下:  1MPa=1000KPa  1KPa=1000Pa  1标准大气压=100KPa=0.1MPa(近似值,在要求不高的场合近似计算,用于粗略计算)  1标准大气压=1公斤(Kgf/cm2)(近似值,用于粗略计算)=760mmHg  1标准大气压=14.5PSI(近 ...

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肿瘤标志物的组合及意义

1、甲胎蛋白(AFP)AFP是胚胎期肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白,在正常成人血循环中含量极微<20μg/L。AFP是诊断原发性肝癌的最佳标志物,诊断阳性率为60%~70%。血清AFP>400μg/L持续4周,或200~400μg/L持续8周者,结合影像检查,可作出原发性肝癌的诊断。急慢性肝炎,肝硬化患者血清中AFP浓度可有不同程度升高,其水平常<300ug/L。生殖胚胎性肿瘤( ...

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胰岛素怎样计算用量

正常人的空腹血糖维持在3.3~6.1mmol/L(60~110mg/dl),餐后半小时到1小时之间一般在10.0mmol/L(180mg/dl)以下,最多也不超过11.1mmol/L(200 mg/dl),餐后2小时又回到7.8mmol/L(140 mg/dl)。 ­ 胰岛素怎样计算用量 ­ (一)怎样估算其初始用量: ­   糖尿病患者在开始使用胰岛素治疗时,一律采用短效胰岛素。而且,一定在饮 ...

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临床补液分析

对于标准50kg病人,除外其他所有因素,一般禁食情况下,每天生理需要水量为2500-3000ml,下面我讲补液的量和质:一。量:1。根据体重调整2。根据体温,大于37摄氏度,每升高一度,多补3-5ml/kg。3。特别的丢失:胃肠减压;腹泻;肠瘘;胆汁引流;各种引流管;呼吸机支持(经呼吸道蒸发增多)二。质:1。糖,一般指葡萄糖,250-300g (5% 葡萄糖注射液规格 100ml:5g, ...

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电泳缓冲液TAE起什么作用呢

缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e-2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e-2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基 ...

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subcloning

In molecular biology subcloning is a technique used to move a particular gene of interest from a parent vector to a destination vector in order to further study its functionality.Subcloning is not to ...

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NEB T4连接酶使用说明

介绍:Catalyzestheformationofaphosphodiesterbondbetweenjuxtaposed5'phosphateand3'hydroxylterminiinduplexDNAorRNA.ThisenzymewilljoinbluntendandcohesiveendterminiaswellasrepairsinglestrandednicksinduplexDN ...

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基因多态性的检测方法

多态性(polymorphism)是指处于随机婚配的群体中,同一基因位点可存在2种以上的基因型。在人群中,个体间基因的核苷酸序列存在着差异性称为基因(DNA)的多态性(gene polymorphism)。这种多态性可以分为两类,即DNA位点多态性(site polymorphism)和长度多态性 (longth polymorphism)。基因多态性的主要检测方法简述如下:1.限制性片段长度多态 ...

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蛋白酶K(Proteinase K)使用小贴士

蛋白酶K在BSE的检测中用来消化PrPc用来区别致病的PrPsc它的正确使用对检测特异性和敏感性都有重要影响,希望大家多多交流在使用中的心得,我就抛砖引玉,先总体说一个:概述: 蛋白酶K是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶 具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活 该酶在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性来源: 源于白色念球菌(Tritirach ...

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重组载体的构建及鉴定

重组载体的构建及鉴定 引言:根据实验目的,设计需要重组目的基因或RNAi片段,通过生物合成公司合成,需要说明的是设计的每条单链DNA其两端都应有没切位点,以便于重组。1. 合成 的 ssDNA ,分别命名:编码链为 Forward ssDNA 模板链为 Reverse ssDNA , 每1 OD ssDNA 各加33 μl 无菌去离子水溶解,分别取18 μl 进行退火。在1.5ml ...

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