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细胞功能测定

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电穿孔与电融合技术

相关专题 【实验目的】1.了解细胞电穿孔和电融合的基本原理2.学习电穿孔和电融合基本技术【实验原理】当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法,电穿孔已被广泛用于各种细胞类型,包括细 ...

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线粒体的活体染色及电镜照片观察实验

相关专题 一、兔肝细胞线粒体的活体染色 (一)原理 线粒体是细胞内一种重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量,主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素 ...

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新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究

相关专题 新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究马大龙(北京大学人类疾病基因研究中心北京 100083) ...

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细胞冷冻和复苏[2]

相关专题 基本原理: 在长期的细胞培养过程中可能会出现微生物污染或基因型改变等情况,会导致具有优良特性细胞系的丢失。为防止这些细胞的丢失,细胞可以经快速冷冻并几乎无限期保存在非常低的温度下,如液氮(-176℃)。试剂和设备:冷冻液: 90%灭活血清+10%DMSO(或甘油),用0.45μm微孔滤膜过滤除菌,4℃保存; 培养液; 台盼蓝溶液 ...

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一氧化氮、总抗氧化能力对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响

相关专题 摘要:  目的: 探讨一氧化氮(nitric oxide NO) 、总抗氧化能力(total antioxide capacity T2AOC) 对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响。 方法: 健康SD 雄性大鼠20 只日龄22 d 时复制单侧隐睾模型。生物素2dUTP/ 酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡采用硝酸还原酶法测定睾丸组织 ...

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细胞计数和存活测试

相关专题 1. 原理: 1.1. 计算细胞数目可用血球计数盘或是Coulter counter 粒子计数器自动计数。 1.2. 血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber 中细刻9 个1 mm2 大正方形,其中4 个角落之正方形再细刻16 个小格,深度均为0.1 mm。当chamber 上方盖上盖玻片后,每个大正方形之体积为1 ...

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红细胞计数

相关专题 1、目的 临床上为红细胞增多、贫血或贫血的鉴别诊断提供依据。 2、适用范围  本法适用于人体血液中红细胞的测定。 3、职责 检测人员:负责按照本检测细则对样品进行检测。 复核人员:负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核。 科室负责人:负责对科室综合管理和检测报告的签收。 4、主要仪器  OLYMPUS显微镜 5、方法及操 ...

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细胞凋亡过程中c

相关专题 摘要:据文献报道c2erbB22可以介导细胞凋亡 为检验这一结论是否具有普遍性 用52氟尿嘧啶(52Fu) 诱导小鼠成纤维细胞NC3H10 TC3H10及人乳腺癌细胞MCF27的凋亡. 用Northern印迹法检测c2erbB22的表达状况1结果显示: c2erbB22基因表达在52Fu 作用6 h 开始降低 12 h降低更为明显. ...

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制备高效率感受态

相关专题 液氮或低温冰箱中取出的大肠杆菌E.COLI_DH5_JM109HB101等在LB平板上划线37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落可多个 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升锥形瓶的SOB培养基. 培养基量不可再多会影响效率.在18度 150-250RPM 培养19-50小时没有冷却摇床的可在室温 但不可高于 ...

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细胞计数

相关专题 实验目的 学习、掌握细胞培养中最基本的细胞计数方法。 实验原理 应用显微镜的成像原理,并借助血细胞计数板,计算单位体积的细胞或微小生物的数量。 材料用品 **材料:鸡血红细胞悬液 **药品:0.17mol/L氯化钠溶液 **仪器(请参看仪器图库):吸管及胶头、细胞计数板及计数器、显微镜 常用细胞计数板细胞计数板之计数小格一 ...

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结晶紫染色法测定细胞数

相关专题 1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。 2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递次稀释待检样品,每孔加0.1ml稀释的标准品或待检 ...

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凋亡相关蛋白TFAR19 在TF21细胞凋亡中出现细胞核转位

相关专题 凋亡相关蛋白TFAR19 在TF21 细胞凋亡中出现细胞核转位陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙(北京大学人类疾病基因研究中心北京 100083) ...

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人脐静脉内皮细胞的体外培养、鉴定与形态观察

相关专题 1. 标本采集 在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L KH2PO4 0.24 g/L NaCl 8.0g/L Na2HPO4•7H2O 1.56g/ ...

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MAPK信号转导通路与疼痛敏化调控研究进展

相关专题 广东省中医院麻醉科(广州市,510120) 项红兵 招伟贤 华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科(武汉市,430030) 董航 ...

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无血清培养基培养乳猪肝细胞的效果

相关专题 陈钟,丁义涛,南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科 江苏省南京市 210008 张鹤云,南京大学生化系 江苏省南京市 210093陈钟,男,1963-07-04生,江苏省靖江市人,汉族.1983年南通医学院医疗系本科毕业,1988年南通医学院外科硕士研究生毕业,1999年南京大学医学院肝胆外科博士生,副教授,副主任医师,主 ...

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细胞分裂素信号转导的分子遗传学机理

相关专题 细胞分裂素在植物生长和发育过程中通过调节细胞分裂和细胞分化起着非常重要的作用。尽管经过几十年的生物化学和遗传学研究,对细胞激动素作用机制和信号转导途径的了解仍极为有限。我们采用一个新颖的功能获得性遗传筛选系统,已分离鉴定了数个拟南芥的细胞分裂素信号转导突变体(pga突变体) ...

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内分泌干扰物诱导睾丸生精细胞凋亡的研究进展

相关专题 内分泌干扰物诱导睾丸生精细胞凋亡的研究进展王 晟 综述; 秦达念 审校(汕头大学医学院生理学教研室 广东汕头515031)摘要: 睾丸生精细胞存在着自发性和化学物质诱发性凋亡。现代工业造成大量污染物涌入环境中 而这其中许多物质被证实具有生殖毒性能够影响机体的生殖和发育。这类污染物被归属为内分泌干扰物( EDCsPEDs) 。研究ED ...

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细胞学技术的一般环节简介

相关专题 一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor) 在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。 在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水仙素,在终止培 ...

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流式检测细胞周期

相关专题 线粒体膜电位(MMP):使用几种染料中的其中一种就可以检测到细胞在凋亡过程中MMP的降低,如双氰基-双己氧基羰基靛蓝,它能够隐藏在活细胞的线粒体内。当MMP体系崩溃时,细胞的荧光就会减少。 磷脂酰丝氨酸(PS)在细胞表面的分布情况: PS一般分布在质膜的内侧上。在细胞凋亡过程中,PS残余物会曝露在细胞表面。这种变化可以通过复合蛋白钙 ...

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胸腹水染色体的标本制备

相关专题 一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中,并继续生长、增值。因此,由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多,异倍性,有结构畸变,常支持阳性诊断。 二、用品和试剂 同外周血染色体制备。 三、操作步骤 l.新鲜胸腹水20—40毫升,以1000rpm离心10分钟 ...

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