相关专题 1. 注意事项: 1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。 1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。 1.3. 注意冷冻保护剂之品质。DMSO 应为试剂级等级,无菌且无色(以0.22 mic ...
相关专题 1. 细胞库之细胞培养基不加抗生素 1.1. 培养自ATCC 引进之细胞株,培养基中不加抗生素。 1.2. 培养自其它实验室引进之细胞株,制作token freeze 前培养基须添加抗生素,待token freeze 通过污染测试后,大量培养时则不加抗生素。 2. 寄送活细胞时,须将培养液充满整个flask 时,则须添加抗生素(pe ...
最近隔壁老王的青年基金终于申请下来,可是老王是搞化学工程出身的,对生物这块压根就不懂(ta shi nao can),这不,今儿就来找我了。 老王:大师兄细胞咋养? 大师兄:你猜,或者你去丁香通找找 老王:我找了,内容太多,要不你给我讲讲 大师兄:那好吧,那我就先从无菌操作开始 首先,实验进行前,无菌室及无菌操作台,要用紫外灯照射 30-60 分钟灭菌,然后开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,用75% 酒精擦拭无菌操作台面,并才能开始实验操作。 每次操作只处理一株细胞株,即使培养基相同,不同的细胞株也不能共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 实验完毕后,将实验物品带出工作台,以75% ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。 2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70% ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 一、基础培养 ...
相关专题 1 实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响要求工作环境清洁空气清新干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧常规操作和封闭培养于一室而洗刷消毒在另一室. 2 常用设施及设备 (1)超净工 ...
相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37 oC 水槽中温热。 2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长不佳 ...
相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm氨基酸 氨基酸是组成蛋白质的基本单位.不同种类的细胞对氨基酸的要求各异但有几种氨基酸细胞自身不能合成必须依靠培养液提供这几种氨基酸称为必需氨基酸.其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必 ...
相关专题 1 合适的细胞培养基 合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境. 2 优质血清 目前大多数合成培养基都需要添加血清.血清是细胞培养液中最重要的成分之一含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分. 3 无菌无毒细胞培养环境 无菌无毒的 ...
相关专题 1. 种类 1.1. 细胞培养实验用品均为无菌,除了玻璃容器与pasteur pipet 外,其它均为塑料无菌制品。 1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附,培养容器种类有Tflask plates dishes roller bottle 等,依实验需要使用。 1.3. plastic steril ...
相关专题 一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快,使之迅速通过 ...
相关专题 基因组序列的迅速获得推动了一门新兴学科——功能基因组学的发展,这一学科重点关注基因功能的变化。扩增性片段长度多态性(Amplified restriction fragment length polymorphism,AFLP)分析以及反向遗传学都是功能基因组学的重要组成部分。传统的反向遗传学,例如用转座子(transposon)敲 ...
相关专题 细胞培养基的配制 Serologicals公司于7月26号宣布它的全资子公司Celliance引入了Onco-CYTE(TM)产品。Onco-CYTE(TM)是一种不需要血清的、替代含有胎牛血清(FBS)液体培养基的培养基,它可以用于许多癌症细胞株和一些生物培养的应用。 Onco-CYTE(TM)是EX-CYTE®家族的第二个产品。 ...
相关专题 细胞培养(Cell Culture)专题:http://ask.bbioo.com/special/experiment/Cellculture.htm高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则 ...
相关专题 (一)、透射电子显微镜1、基本原理在光学显微镜下无法看清小于0.2µm的细微结构,这些结构称为亚显微结构(submicroscopic structures)或超微结构(ultramicroscopic structures;ultrastructures)。要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。1932 ...
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相关专题 一、 实验目的 通过对作物品种某些数量性状的资料整理和数学分析,初步了解数量性状的基本特征。同时,学会和掌握对资料的分类、分组、制次数分配表,绘次数分布图及遗传力的测定等生物统计法及其在研究遗传变异和作物育种中的应用。 二、 实验说明 作物品种的各种性状,通常可分为质量性状和数量性状。如豌豆中的红花和白花,不同种子形态的饱满和皱皮, ...
相关专题 一、实验目的 通过实验,掌握空气干燥法制片技术。 二、实验原理 在骨髓细胞中,有丝分裂的指数是相当高的,因此可以直接得到中期细胞而不必像血淋巴细胞那样要经过体外培养。通过骨髓得到染色体是比较简便的,一般也无需无菌操作。在临床上多用于白血病的研究,在实验条件下,这种染色体是机体内真实情况的反映,而且用骨髓制片的方法易于观察毒性物质在体 ...
相关专题 一、实验目的 学习和掌握核型分析的方法。 二、实验原理 核型亦称染色体组型,是指体细胞有丝分裂中期细胞核(或染色体组)的表型。每一个体细胞含有两组同样的染色体,用2n表示。其中与性别直接有关的染色体,即性染色体,可以不成对。每一个配子带有一组染色体,叫做单倍体,用n表示。两性配子结合后,具有两组染色体, ...
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