细胞免疫荧光

网络 第一章　白细胞分化抗原 　　机体免疫系统是由中枢淋巴器官、外周淋巴器官、免疫细胞和免疫分子所组成。免疫应答过程有赖于免疫系统中细胞间的相互作用，包括细胞间直接接触和通过释放细胞因子或其它介质的相互作用。免疫细胞间或细胞与介质间相互识别的物质基础是免疫细胞膜分子，包括细胞表面的多种抗原、受体和其它分子。细胞膜分子通常也称为细胞表面标记（cell sur ...

网络 第一章　白细胞分化抗原 　　机体免疫系统是由中枢淋巴器官、外周淋巴器官、免疫细胞和免疫分子所组成。免疫应答过程有赖于免疫系统中细胞间的相互作用，包括细胞间直接接触和通过释放细胞因子或其它介质的相互作用。免疫细胞间或细胞与介质间相互识别的物质基础是免疫细胞膜分子，包括细胞表面的多种抗原、受体和其它分子。细胞膜分子通常也称为细胞表面标记（cell sur ...

一、基本原理： 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应.其优点是方法简便. 特异性高，非特异性荧光染色少.缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体.此法常用于细菌. 病毒等微生物的快速检查和肾炎活检. 皮肤活检的免疫病理检查。 二、试剂与仪器： 1. 磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01 mol/L，pH7.4 ...

一、基本原理： 染色程序分为两步，第一步，用未知未标记的抗体（待检标本）加到已知抗原标本上，在湿盒中37℃保温30 min，使抗原抗体充分结合，然后洗涤，除去未结合的抗体。第二步，加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG. IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应，标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合，从而可鉴定未知抗体。 二、试剂与仪器： 1. ...

1、问：做间接法免疫荧光染色，要怎么设置对照？ 参考见解：最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照，看是否非特异性染色。 （1）空白对照：如果你作的是石蜡切片的免疫组化，这一个对照必须有，目的是看自发荧光。脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。 （2）阴性对照：标本直接滴加二抗，呈阴性反应。 （3）抗原对照：标本加同种动物的未免疫血清，以PBS冲洗后，在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性 ...

一、免疫荧光的标本制作的基本程序同DAB显色的免疫组化，不同点如下： 1. 免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其它相同。 2. 免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3. 二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4. 免疫荧光在封片使用专用封片剂或甘油：0.01MPBS （ ...

一、制片 选无自发性荧光的石英玻片或普通优质玻片，洗净后浸泡于无水乙醇和乙醚等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。 二、固定 除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外，一般均应固定。 固定的作用有三： 1. 防止标本从玻片上脱落。 2. 除去防碍抗原-抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染 ...

1、荧光显微镜 荧光显微镜是免疫荧光组织化学的基本工具，分透谢和落射二种类型，落射光无需镜内操作，方便、效果更好。它是由超高压光源、滤板系统（包括激发和压制滤板）和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。 2、荧光显微镜标本制作要求 （1）载玻片 载玻片厚度应在0.8~1.2 mm之间，太厚的玻片，一方面光吸收多，另一方面不能使激 ...

免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白，主要包括蛋白和一抗结合，其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗，荧光显微镜下即可观察到荧光，下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤。 一、zo-1的免疫荧光，步骤如下： 1. 细胞在盖片上生长融合到95%-100%时，从孵箱中取出。 2. 用预温的1×PBS洗3次，每次10 ...