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kandr20051 最近在做细胞实验，用的是WST-1检测细胞活性。在检测的前72个小时，实验都符合预期，给药组的OD值比阴性对照组的要低，但是到了96个小时以后，WST-1的结果就逆转了。给药组的OD值远远高于阴性对照组。但最奇怪的是，WST-1的检测结果与我镜下观察到的细胞形态和多少完全不同！这是阴性对照组这是给药组的为什么会出现这种结果呢？zhuzhihui 这个我也在做，能有个稳定结果确实比较难。楼主可以考虑一 ...

fwangaust 我现在正在用NIH 3T3细胞转染质粒后，做CHIP实验。细胞裂解后超声，在验证超声效果时，超声前和超声后在600bp左右总有一很强的带，我用RNA酶处理过，这究竟是什么？是否会影响后面的实验？keaanu 我也遇到同样的问题，估计是蛋白-DNA复合物，带蛋白多的DNA电荷多，所以跑得快qyhxwxl 请问这种问题该怎么解决呢？解交联，还是提dna或者兼有之，盼复！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思 ...

aoc_chen 大家好，现在打算用BD Growth Factor Reduced Matrigel来做体外血管生成实验，请问这个胶买回来需要稀释吗？文献只说了24孔板每孔加250ul胶，然后上面再铺人脐静脉内皮细胞，我不明白这250ul是稀释后的还是原液？若是稀释后的，是多大比例稀释！不甚感激！ascorpio1 不需要稀释aoc_chen 谢谢楼上兄弟！roy2929 稀释一下省钱hlj8509_丁香 24孔做成管不太好。1、浪费matri ...

aalu 癌细胞与同种同类型正常组织细胞融合会出现什么现象？为什么？请标明文章的名称出处，谢谢!jiachengtang 你自己的看法呢？查过文献么？交流是相互的aalu 我没有查到文章，我不敢武断的下结论。不过我感觉应该试着从多个角度来分析。一方面，经典的癌基因、抑癌基因来看；另一方面，细胞质决定细胞命运（可能夸大了）的角度，这里包括两种甚至多种情况，我试着说两种，（1）癌细胞染色体完整（2）癌细胞染色体异常。。。本文由丁香园论坛 ...

hql219 HS-5细胞有谁养过，传代时大概需要消化多长时间，几天传一代？ysgoodluck 楼主，你养的HS-5是用的什么培养基啊？wjling2550 我前段时间养过，刚开始差不多三四天、四五天传一代，消化的时候也好消化，大约3分钟吧，后来就长得比较慢了，有一次是一周多才传一代wjling2550 培养基用的是H-DMEM本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙 ...

华仔123456 如题求助？在线等华仔123456 受体的表达量在哪些情况下会有改变呢？yyc5243 应该是不会变化的吧。某种受体在某一细胞或一定组织内的数量是有限的，所以即使加大配体浓度也不会增加结合值。正常情况下受体是无活性的或者不表达的，随着细胞内某些机制的改变，受体的活性增加或者说受体活化的数量增加。或者本来不表达，但是刺激后使受体表达了（受体也是一种蛋白，蛋白的表达必然要有转录和翻译）。我的理解是这样的wan ...

frankwolf 各位高手：小的新手上路，恳请各位不吝指导。小的想用带有绿色荧光蛋白的真核表达载体将一个长度在600-1000bp的cDNA和一段长度几十个bp的shRNA转染入人类的细胞中，希望目的基因能够比较稳定的表达，并且使得细胞能在激光共聚焦显微镜下显示绿色。能否恳请各位分别为推荐cDNA和shRNA各推荐一种比较常用的、可行性比较好的、不太容易发生意外情况的带有绿色荧光蛋白的真核表达载体呢？多谢各位 ...

简繁 请教做糖尿病细胞实验3T3-L1、L6、HepG-2细胞的战友，你们用的是哪种胰岛素？我原来用sigma牛胰岛素I5500这个货号的，后来断货了，请教战友换用哪种胰岛素好，如果有相对成熟的条件请赐教，非常感谢！另外国内大细胞库一直找不到合适的胰岛细胞株，请教各位战友用的是哪种，谢谢！lzyn 同学我就是买的sigma的这个胰岛素，我想知道以前你是怎么配的？能告诉我吗？》我的QQ530549736 希望您多给指点。我是研一 ...

cwfred 如何找到一篇文献的Supplementary Figvshouxiao000 我也遇到和楼主同样的问题？qzyjsu 这个一般在下载文献的主页上有，一般在右侧，仔细找下即可qzyjsu vshouxiao000 wrote:我也遇到和楼主同样的问题？这个一般在下载文献的主页上有，一般在右侧，仔细找下即可本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：s ...

huabinbjh 本人是新手，刚作完测序，不知道如何将测序结果的文本格式转化成seqman识别的abi格式，请求帮助。谢谢sherwing 可以用olig2或DNAman打开文件后，另存，再修改格式allen11121147 文本格式的是无法转化成峰图文件的啊，测序时同时生成两个文件：一个是文本格式的碱基序列，另一个是峰图文件。一般测序公司两个文件都会发给客户的。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯 ...

yangguili 我今天赶上特殊情况，二抗没有了，请问磷酸化的一抗能孵育两个晚上吗？会不会有什么不好的影响？请各位大侠指导一下！万分感谢！selleckchem01 二抗是很便宜的东西，去别的实验室借一下就好了~毕竟一次做完结果会比较好~yangguili 谢谢楼上的同志本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

202zhaozhao 我买的DNASE1上面写着15000u是什么意思啊？麻烦知道的能告诉我，谢谢大家roy2929 u=unit酶都是用活力单位表示含量 一般不用摩尔质量selleckchem01 1U代表在1min内催化1微摩的底物发生反应的酶量~superldd 您好，我想请问，15000U等于多少mg呀，因为稀释时要求1mg/ml.谢谢啦本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...

xiaoleishi 我现在做的是小胶质细胞，要做akt信号通路，但现在查到akt抑制剂有很多种，应该怎样选择？谢谢。pennhmp116 一般来说某个靶点抑制剂的研究也是不断进展的，随着化工技术和计算机模拟分析模拟技术进步，许多靶点上新的抑制剂都比早期的更为有效、更加具有特异性，水溶解性更好、性质更稳定等优点。除了靶点的活性外，其毒性也是决定它是否现在应用于动物体内实验，将来应用于临床成功与否的关键。如NF-kB抑制剂 ...

郑哲 我现在在做microRNA的生物信息学预测，有一个问题想请教，通过blast比对，得到了候选的EST序列之后，做二级结构预测时是用整个EST序列进行折叠，做二级结构预测，还是截取EST序列中，含有比对上的成熟micRNA序列的部分序列进行结构预测呢，因为我发现截取一部分和用整条序列进行折叠，得到的发卡结构不一致，谢谢！！！keathy0505 当然是用成熟microRNA序列部分做预测啊！郑哲 谢谢，请问你也是做小R ...

sunyuzhu10 包装质粒是pMD2.G pMDLg/pRRE pRSV-Rev 过表达载体是pLVX-IRES-ZsGreen1这样的四个质粒能包装出慢病毒么？请有经验的战友帮忙看下暴君 可以的644414915 pMD2.G是VSVG吗我现在正在包病毒，别人给了我这四个质粒，别的什么都没说，我不知道该怎么包装装染谁有具体步骤转染质粒时量如何把握本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...

子尤的翅膀 各位同学，请问一下提取组织的核蛋白 那组织必须是新鲜的吗？如果保存在-80度近1年的可以用来提取核蛋白吗？谢谢各位啦xhjggl 没有反复冻过应该可以，子尤的翅膀 谢谢这里面没有提到提取组织核蛋白的要求 如果反复冻融是不是都降解了呢？selleckchem01 如果-80度一年的话，应该可以提取出来~但是反复冻融后，蛋白当然会比较容易降解~子尤的翅膀 谢谢啦本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实 ...

郑哲 我要做microRNA成熟体的荧光定量，内参为U6，现在有一个问题很纠结：我在做反转录时候，因为要做特异性的反转录，请问内参和小NRA是放在一个管子里，在同一个体系里面一起反转录出来，还是要将内参和小RNA分别反转录，如果一起反转录出来，反转录体系要怎样加呢，反转录过程中会不会有竞争！谢谢，急待回答！！！！ytxy 是在同一个管子里逆转录的，这样才能保证总RNA是一致的。因为引物序列不一样，结合的模板也是不同的。另外按 ...

dali321 在Bid 诱导的caspase-8 活化中 高浓度的药物中caspase-8蛋白的表达是增多还是减少右翼天使 在Bid 诱导的caspase-8 活化中 高浓度的药物中caspase-8蛋白的表达是增多casgene 不受影响。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

meilixue 如题。poly(rC)中的r代表什么？谢谢。terryxiaolei r代表RNA上的胞嘧啶，即核糖核酸胞嘧啶，不带r的是脱氧核糖核酸胞嘧啶呗……poly(rC)即为多聚胞嘧啶xuezhishui 我觉得poly (rC)应该就是polyribocytidylic acid的缩写，同样的poly (rI)就是polyriboinosinic acid的缩写。其中r代表ribo。不知对否？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的 ...

吃鱼不吐刺 有哪位前辈制备过AGE-BSA？我制备的AGE-BSA三个月已经出现明显褐色，但是由于不知道如何透析，及怎样测定制备的AGE浓度，实验一直不能进行……哪位战友能够告知下，不胜感激johnchen416 你是如何做的？透析可选用密理博的透析袋，孔径接近但必须小于白蛋白分子量67kd就可以了。用透析袋装AGEs-BSA，封闭严实，放在PBS液中，磁力搅拌器搅拌过夜即可。如果费用可以，可以直接买管子低温超速离心。su ...