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【求助】关于BSA-AGE(晚期糖基化终产物)透析问题!

丁香园论坛

3460
有哪位前辈制备过AGE-BSA?
我制备的AGE-BSA三个月已经出现明显褐色,但是由于不知道如何透析,及怎样测定制备的AGE浓度,实验一直不能进行……
哪位战友能够告知下,不胜感激
你是如何做的?
透析可选用密理博的透析袋,孔径接近但必须小于白蛋白分子量67kd就可以了。用透析袋装AGEs-BSA,封闭严实,放在PBS液中,磁力搅拌器搅拌过夜即可。如果费用可以,可以直接买管子低温超速离心。
请问楼主AGE-BSA的浓度测了吗?
johnchen416 wrote:
你是如何做的?
透析可选用密理博的透析袋,孔径接近但必须小于白蛋白分子量67kd就可以了。用透析袋装AGEs-BSA,封闭严实,放在PBS液中,磁力搅拌器搅拌过夜即可。如果费用可以,可以直接买管子低温超速离心。
请问知道透析完毕后用什么方法测定其浓度吗?用一般的测蛋白的方法行吗?谢谢了!
suyefan wrote:
请问楼主AGE-BSA的浓度测了吗?

AGE-BSA的浓度我还没有测。如果用一般检测蛋白的方法测定,测定的结果还是BSA及AGE-BSA的浓度,而不是单独AGE-BSA的浓度。
恩。好像是,因为我是制备来干预细胞,所以都没做纯化。测不了浓度后面就不知道怎么干预了。那我再好好查查文献看有什么方法。谢谢了!
suyefan wrote:
恩。好像是,因为我是制备来干预细胞,所以都没做纯化。测不了浓度后面就不知道怎么干预了。那我再好好查查文献看有什么方法。谢谢了!

请问两位你们后面使用什么方法测的?荧光光度法么?那标准曲线呢~~
我也在纠结这个问题,请做过的同学帮帮忙吧!
我只测过蛋白浓度,荧光强度没有测过,同样求助!

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师兄微信号:shixiongcoming

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