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        【求助】关于BSA-AGE(晚期糖基化终产物)透析问题!

        丁香园论坛

        3540
        有哪位前辈制备过AGE-BSA?
        我制备的AGE-BSA三个月已经出现明显褐色,但是由于不知道如何透析,及怎样测定制备的AGE浓度,实验一直不能进行……
        哪位战友能够告知下,不胜感激
        你是如何做的?
        透析可选用密理博的透析袋,孔径接近但必须小于白蛋白分子量67kd就可以了。用透析袋装AGEs-BSA,封闭严实,放在PBS液中,磁力搅拌器搅拌过夜即可。如果费用可以,可以直接买管子低温超速离心。
        请问楼主AGE-BSA的浓度测了吗?
        johnchen416 wrote:
        你是如何做的?
        透析可选用密理博的透析袋,孔径接近但必须小于白蛋白分子量67kd就可以了。用透析袋装AGEs-BSA,封闭严实,放在PBS液中,磁力搅拌器搅拌过夜即可。如果费用可以,可以直接买管子低温超速离心。
        请问知道透析完毕后用什么方法测定其浓度吗?用一般的测蛋白的方法行吗?谢谢了!
        suyefan wrote:
        请问楼主AGE-BSA的浓度测了吗?

        AGE-BSA的浓度我还没有测。如果用一般检测蛋白的方法测定,测定的结果还是BSA及AGE-BSA的浓度,而不是单独AGE-BSA的浓度。
        恩。好像是,因为我是制备来干预细胞,所以都没做纯化。测不了浓度后面就不知道怎么干预了。那我再好好查查文献看有什么方法。谢谢了!
        suyefan wrote:
        恩。好像是,因为我是制备来干预细胞,所以都没做纯化。测不了浓度后面就不知道怎么干预了。那我再好好查查文献看有什么方法。谢谢了!

        请问两位你们后面使用什么方法测的?荧光光度法么?那标准曲线呢~~
        我也在纠结这个问题,请做过的同学帮帮忙吧!
        我只测过蛋白浓度,荧光强度没有测过,同样求助!

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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