实验简介囊泡天然存在于体液中,并稳定携带了一些重要的信号分子。囊泡相关功能的研究已经成为研究热点,并有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用。通常因流式细胞仪无法检测低于 250nm 的颗粒,因而并不是检测囊泡微颗粒的最佳选择。而贝克曼库尔特公司 CytoFLEX 流式细胞仪的问世,为流式检测囊泡微颗粒开辟了蹊径。 CytoFLEX 是第一台可检测 100 nm 微颗粒的流式细胞仪,并具有可同时检测 13 色荧光、单个样本存储量大等 优秀性能,为微颗粒的检测提 ...
1. 大脑与神经元人类大脑由大约 100 亿个神经元组成,神经元之间通过突触相互连接成复杂的功能网络,因而大脑是人体最复杂的器官。目前,人们对大脑的功能机制的认知还停留在较低的水平,研究大脑的功能也成为科学家的终极目标。2013 年 1 月,人脑工程成为欧盟「未来新兴旗舰技术项目」之一,未来 10 年内将获得 10 亿欧元的科研经费。随后,奥巴马宣布将从 2014 财年的政府预算中拿出 1 亿美元,启动"人脑活动图"项目研究(Brain Activity Map project)。 ...
陆小疯 各位大神。本人最近开始做实验。Src inhibitor (PP2),PLCγ1 inhibitor(U73122),ERK1/2 inhibitor (PD98059)这几个细胞通道的抑制剂。能抑制细胞migation.文献上说是用上述某浓度的处理30min。再继续实验。但是人家文献上的细胞只培养了8到12h。而我要培养4周。想请问各位。我是要在培养液中配置上述的浓度抑制剂使用。还是就是细胞预处理。然后按照以往一样培养。但是如果 ...
578475733 因最近要做蛋白激酶C在糖尿病方面的实验,求助各位高手有没有蛋白激酶C信号通路的图片,最好带注解,十分感谢。石依信念 我也想要~~~~黑胡桃 data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAskAAAGdCAYAAADgwu6RAAAgAElEQVR4Aey9B7xdxZXmu04+NypnIRQIAkkkAxIZJBDJ4ADO7qbHoZ3etO32G3 ...
holiday2008 各位高手,我用LPS刺激raw264.7细胞,24h后检测TNF-a和IL-6,发现TNF-a大量释放,但IL-6却没有检测出来(试剂盒没问题)。这是怎么回事啊?主要是我去年做的时候IL-6都很高。请各位帮帮忙,谢谢了!与你无关 LZ 我也想知道啊 是不是细胞状态不对啊我的细胞是冻存了一年之后再复苏的,做不出以前的结果了。。。caesar1112 holiday2008 wrote:各位高手,我用LPS刺激raw264. ...
巴巴布拉拉 本人系科研新手,丁香园新人.最近关注雷帕霉素诱导细胞自噬,很多材料上都写雷帕霉素诱导自噬是作用于mTOR引起.mTOR分为mTORC1和mTORC2.又有材料写mTORC1对雷帕霉素敏感,但与自噬关系不大,mTORC2对雷帕霉素不敏感.那雷帕霉素诱导自噬到底是作用于mTORC1呢还是mTORC2呢?想不明白这个问题,敬请诸位前辈能赐教。初次法帖,如有不妥,请版主指教。无言言无 Rapamycin-Induc ...
honbin 由于实验条件有限,现在用某厂商试剂盒提全血中的rna,在裂解细胞的时候需要在4度离心机中2100rpm离心10分钟。请问,4度离心的目的是什么?如果不在4度中离心,结果会出现怎样的偏差?请高手帮忙解答,谢谢。selleckchem01 低温离心主要是为了降低RNAse的活性,防止RNA被降解honbin selleckchem01 wrote:低温离心主要是为了降低RNAse的活性,防止RNA被降解好的。非常感谢 ...
batton 转入细胞的可见FAM标记的绿荧光,不过本人有一点搞不懂,可能有一些是没有转进细胞的,为什么细胞外就看不到荧光呢?吴佰霖 能不能这样理解,进入细胞后就具有了聚集的作用,分散在培养基中就不明显了ouyi2738 你好,我想问一下你每次转染后多长时间观察,还有用的miRNA mimic的量是多少啊,我稀释到20mM,每次转2ul,也就是200pM,可是在倒置荧光显微镜下观察到的荧光很弱@batton。谢谢!lvhen5 ...
菊开那夜 向各位高手求助,A蛋白,被RNAi后,可以延长秀丽线虫寿命,它的这个作用部分依赖于DAF-16转录因子的调控,但研究证明,其对线虫寿命的影响还有部分不依赖DAF-16的调控,我希望能够寻找可能参与的其他信号通路,该如何设计实验?qing0831 可以同时制备一个针对A蛋白的RNAi干扰模型和过表达模型,然后用表达芯片分析哪些基因发生了明显的下调和上调,再根据这些基因寻找相关的信号通路。我曾做过类似的实验,如有 ...
hhyy601 我是细胞生物的外行,我现在请教各问题,通过SMAD信号通路,是使samd2/3磷酸化还是使samd2/3表达上升?MIRNA下降是使samd2/3磷酸化还是表达上升,表达上升激活了这个通路吗?谢谢zfv2007 1. smad2/3是转录因子,受到上游通路激活后发生磷酸化,然后入核调控相应靶基因的转录,所以激活应该是smad2/3的磷酸化增加。2.在其他条件不变的情况下,smad2/3表达量增加的话,其激活也有可 ...
小红赛 尤其是那个抑制符号扁箭头,怎么搞出来的,PPT上也没有追寻希冀 illustrator完全可以实现小红赛 追寻希冀 wrote:illustrator完全可以实现那个抑制符号 一横一竖 除了 illustrator,还有什么简单的办法可以画出追寻希冀 photoshop小红赛 追寻希冀 wrote:photoshop上面那个图的符号 不是photoshop画的吧?追寻希冀 photoshop可以画出你所说的“抑制符号”,但上图显然不是用phot ...
dscgu 迄今已发现了VEGF的三种酪氨酸蛋白激酶受体,分别是VEGFR-1(flt-1)、VEGFR-2(flk-1,也称KDR)、VEGFR-3(flt-4)。是否能选择性抑制VEGFR-1(flt-1)、VEGFR-2(flk-1,也称KDR)、freecell ZM323881, a VEGF receptor (Flk-1)-specific inhibitorhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17211450SU5 ...
timeanddoctor 凌晨6时抽取病人静脉血,EDTA抗凝,4摄氏度保存,3小时后常温离心,转速4000转5分钟,打算做流式细胞术。看看还能用么,谢谢!希望能碰到有解释一下的战友(最好从最基础的开始),谢谢了!timeanddoctor 血浆是放在多少度保存?juan850920 颠倒混匀后还是可以的,标本放在4度大概两三天还能测流式,但最好不要离心yugicheung 看上去溶血挺嚴重的~本文由丁香园论坛提供,想了解更多 ...
konglingrufeng 之前实验设计A组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+培养基B组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+实验诱导剂+培养基C组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+阳性诱导剂+实验诱导剂+培养基D组 小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)+培养基诱导相同天数后在免疫荧光结合共聚焦显微镜技术下,半定量测定OPG/RANKL表达,差异有统计学意义问题1.接下来,能选择一条通路,加阻断剂,然后还是用免疫荧 ...
新手上路多包涵 在网上查了一些资料看,但还是不大明白,请教高手们提供点资料学习学习。另外这个东西,现在研究的热么?呵呵。谢谢rongjiansu 對話的英文為cross talk,指的是不同信號通路間的相互作用,通常是關鍵的調控分子特別是Kinase之間的相互作用,一直是細胞生物學研究的熱點問題。另外還有convergence和disperse,是信號通路三大特性。liubingood rongjiansu wrote:對話的英 ...
thisiscc 目前仅知道能用GFP做成融合蛋白,并在显微镜下观察,但也不了解更多细节。有熟悉这方面的,能提供一些研究方法,和技术细节不。能告诉哪些相关Publication也行。不甚感激。thisiscc 忘了说了,主要是想看目标蛋白在细胞质与细胞核的分布情况,及其在一定条件下的变化。Thanks again.rongjiansu 免疫荧光法观察处理前后目标蛋白在细胞中的分布,不过抗体的细胞内定位一般不准,不太可靠构建GFP ...
薇安夕夕宝 请问有人了解SHH通路吗?这个通路有激动剂吗?acola SAG C28H28ClN3OS黑糊糊2000 Oxysterols, could be one but not sure can be used for all the cell lines本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming
firemoth 想请教下各位老师,在做脏器在体实验时,检测GABABR时,做总ERK检测,就可以证明ERK是被GABABR介导的,不是被其他受体介导;而检测5-HT受体时,做总ERK检测,不能证明ERK是被5-HTR介导的?在体实验怎么证明证明ERK是被5-HTR介导的?(动物已经处死,实验组织已经摘除保存了)必须要通过培养细胞来证明吗?zhanghai123 你好,看了你的帖子,有点不是很清楚。有几个问题想问一下:1 GAB ...
sosjgl 求助 那位朋友做过配体和受体关系的研究啊我现在要证明一个产物是一个已知受体的的配体,需要怎么证明?我想首先证明他们之间的亲和力,就是用这个受体已知的配体来测他们的竞争关系。求高手给点建议,或指点下方向。 有做过这方面的请赐教,如果有需要的话,本人可提供著名高校代理作为感谢。hxzcf 如果做的是体内实验,先分组,第一组用配体,第二组组用受体的激动剂,第三组用配体+受体的抑制剂。观察行为学改变,如果第一组和二组得到相 ...
firemoth 求助5-ht1a的下游信号通路图,如附件图片形式的,我查了好久都找不到,寻求大家帮忙,不胜感激。gongtj 不知是不是这个:http://www.genome.jp/kegg-bin/show_pathway?hsa04726lz到KEGG里好好找一下呢。firemoth gongtj wrote:不知是不是这个:http://www.genome.jp/kegg-bin/show_pathway?hsa04726lz到K ...