细胞培养

脐带是高增殖潜能祖细胞，诸如间充质干细胞（MSCs）和集落形成样内皮前体细胞（ECFCs）一个丰富的资料来源，本视频即示范分离和扩增培养脐带祖细胞的方法。

视频演示如何从10.5～11.5dpc小鼠胚胎性腺分离原始生殖细胞。分离和衍生得到的生殖细胞将帮助我们了解其体外发育情况，也可监测氧化应激条件下生殖细胞在遗传和核外遗传水平上的累积损伤。

目前，开发出一种芯片为基础的细胞三维培养的方法，该芯片通常是非生物降解的聚合物，如聚碳酸酯或聚微注塑成型，微热压或微热成型丙烯酸甲酯。

LAK/TIL细胞的制备1、LAK细胞的制备【试剂及材料】①PHA②rhIL-2③20％NCS-RPMI-1640培养液【操作方法】（1）常规分离PBM或将正常人外伤摘除的脾脏按常规方法制备成单个脾细胞悬液，用含20％NCS的RPMI-1640完全培养液调整细胞浓度至1×106/ml；（2）将上述细胞加入24孔培养板孔中，同时加入60μg PHA，rhIL-2（终浓度为500U/ml），将细胞置 ...

美国威斯康辛大学麦迪逊分校的科学家们近日开发出一套新细胞培养系统，有望为细胞治疗提供更加一致和安全的细胞培养物。11月14日的《自然—方法学》刊登了这一成果。

一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中继续培养。第二天观察贴壁生长情况。二、悬浮细 ...

1、弃去培养基废液。2、消化：加入1ml 0.125％胰酶溶液，转动培养瓶使酶液浸没瓶底，温浴消化2-3分钟。 3、终止：用无血清培养基终止酶反应。4、离心：收集中和了的培养液，于15ml 的离心管中 1000rmp 离心10分钟。5、细胞重悬：弃去上清，加入1ml 无血清培养基用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液。6、细胞计数：血球计数板计数细胞，并换算出细胞数量。7、接种分瓶： 将细胞接种到含4ml无 ...

1、取出细胞，迅速放入37℃温水中快速解冻。2、吸出细胞悬液，并加10倍以上培养液。3、1000r/分钟离心5分钟，去除上清。4、用培养液适当稀释后接种培养瓶，放入37℃ CO2培养箱静置培养。 镜检细胞贴壁能力。次日更换一次培养液，继续培养。 ...

一、组织块直接培养法1、取材，用Hank's液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块，再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶，并贴附于瓶底面。4、轻轻将培养瓶翻转，瓶底朝上，向瓶内注入适量的培养液，将培养瓶放置在37℃恒温箱内培养。5、放置待组织小块贴附后，将培养瓶慢慢翻转平放，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。二、消化 ...

一．台盼蓝染色二．伊红Y染色 三．苯胺黑染色实验

1、选用生长情况好，数量较多的原代细胞，冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25％胰酶常规消化将细胞消化下来，将细胞悬液收集至离心管中。3、1000rpm离心5分钟，弃上清液。4、沉淀加含DMSO的培养液，计数，调整至（1-10）×106/ml。5、将悬液分至冻存管中，每管1 ml。6、密封冻存管，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。7、用记号笔标明细胞种类，冻存日期。8、按下列顺序降温：室温 ...

1、准备计数板 2、制备细胞悬液 3、加样 4、计数

原代细胞或细胞株或细胞系需在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的原代细胞或细胞株或细胞系或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续，这个过程体外培养称为传代细胞培养。一般认为，细胞培养形成单层汇合，细胞密度与生存空间有密切的关系，将培养细胞分散，以1:2或l:3或1:4以上的比率转移分散进行培养，即为传代细胞培养。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细 ...

无血清培养基(serum free medium SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。简单地认为是体外细胞培养过程中的细胞培养基中不含有动物或人的血清，称为无血清细胞培养基。无血清培养基的基本配方是基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。大多数的无血清培养基含有必须的向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质如纤连蛋白、球蛋白、细胞 ...

细胞培养的倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。细胞培养的代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。 ...

概述肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。，根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子。肿瘤组织分离为肿瘤细胞原代培养的方法主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。

PriCells - 正常人脐静脉原代内皮细胞培养

一、实验室设计1、细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，为10万级洁净环境的洁净室。而洗刷消毒工作设在洁净室外，避免物品污染洁净室内环境。细胞洁净室需 ...

PriCells –正常大鼠原代心肌细胞培养一、实验试剂1、培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液： 1×PBS（pH 7.4）+ 1% P/S4、染色液： 0.4% Trypan Blue 5、消化液： PriCel ...

PriCells –正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养