原代细胞无血清培养技术
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原代细胞无血清培养技术:
1、弃去培养基废液。
2、消化:加入1ml 0.125%胰酶溶液,转动培养瓶使酶液浸没瓶底,温浴消化2-3分钟。
3、终止:用无血清培养基终止酶反应。
4、离心:收集中和了的培养液,于15ml 的离心管中 1000rmp 离心10分钟。
5、细胞重悬:弃去上清,加入1ml 无血清培养基用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液。
6、细胞计数:血球计数板计数细胞,并换算出细胞数量。
7、接种分瓶: 将细胞接种到含4ml无血清培养基的培养瓶中,37℃,5% CO2 培养箱中培养。
8、镜检观察:次日观察贴壁率,细胞形态等。





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