细胞因子的生物活性检测法 不同的细胞因子有其特有的生物学活性。细胞因子的生物活性检测法是利用细胞因子对特定细胞株(靶细胞或反应细胞)的生物学效应来评估样本中相应细胞因子的含量和/或活性。生物活性检测法所用的靶细胞可直接从组织中分离,如骨髓细胞的集落形成试验和胸腺细胞(脾细胞)的增殖试验,或用体外培养的依赖细胞因子才能生长的细胞因子依赖株及对细胞因子杀伤敏感的细胞作为靶细胞其测定方法可分为促 ...
近日哈佛医学院和哈佛牙科学院的研究人员在培养皿中模拟一种罕见的遗传性疾病时,发现了一种新方法可以扭转成熟细胞的生物钟,使细胞返回成体干细胞状态。由此生成的新“干细胞“可在培养基及动物模型中分化为各种细胞类型。新发现发表在《自然-医学》(Nature Medicine)的网络版上。
在大多数人的印象中,原代细胞培养是一件很困难的事;完全自己动手可能确实如此,但市场上那么多的原代细胞培养体系,相当程度上可以为你解除后顾之忧。原代细胞的质量取决于多个因素:组织、培养基、特别是它还与实验人员分离组织的技术息息相关。如果你对分离组织不甚精通或者很难保证组织来源地稳定性,市售的原代细胞是一种不错的选择。细胞系培养相当成熟且普遍,但有时会得到一些难以解释的结果。想不想得到更多符合体内正常 ...
原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。细胞株(cell strain)是通过选择法或克隆形 ...
1677年荷兰Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723)显微镜学家、微生物学,用简单显微镜观察到动物的“精虫”(细胞)。1665年英国Hooke Robert(1635-1703)博物学家提出细胞和细胞结构的概念。1827年贝尔发现哺乳类的卵子,对细胞本身进行认真的观察。1838年描施莱登述了细胞是在一种粘液状的母质中,经过一种像是结晶样的过程产生的,并且把植物 ...
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1. Primary cells from PriCells2. Basal media of primary cellsBasal Medium of primary cells is a sterile phenol red-free liquid tissue culture medium intended for use as one component in a co ...
原代肝细胞培养、肝非实质细胞、肝脏干细胞肝实质细胞:指具有执行和完成肝功能单位的细胞。肝非实质细胞:指非具有执行和完成肝功能单位的细胞,这些细胞的功能主要是具有连接和支撑肝实质细胞的作用。如血窦内皮细胞、Kupffer细胞、陷窝细胞(pit cell)及肝脏星状细胞(hepatic stellate cell;HSC)。肝脏干细胞:是一种来源于肝脏Herring狭隙和肝内胆管的具有双向分化潜 ...
PriCells: 肾血管支的分离和血管平滑肌细胞培养Isolation of renal vascular trees and culture of the vascular smooth muscle cell1. Male Wistar rats of about 250 g body wt were anesthetized with ether and were decapi ...
PriCells: 动脉平滑肌细胞 (Arterial smooth muscle cells)平滑肌分类尽管体内各器官所含平滑肌在功能特性上判别很大,但一般可分为两大类:一类称为多单位平滑肌,其中所含各平滑肌细胞在活动时各自独立,类似骨骼肌细胞,如竖毛肌、虹膜肌、瞬膜肌(猫)、以及大血管平滑肌等,它们各细胞的活动受外来神经支配或受扩散到各细胞的激素的影响;另一类称为单位平滑肌,类似心肌组织,其 ...
小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞基本原理活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸钠;Pharmacia LKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)12ml或50ml聚丙烯离心管(比聚苯乙烯离心管好)注:Ficoll-Paque和Lympholy ...
PriCells: 磁珠分选柱手工操作分离小鼠CD4+ CD25+抑制性细胞实验材料:1. 小鼠2. HBSS洗涤缓冲液3. MACS缓冲液4. CD8a(Ly-2)磁珠5. 结合缓冲液6. biotin-抗CD25(7D4)7. Streptavidin-PE8. 抗PE磁珠9. 完全RPMI培养基10. 小鼠CD3+T细胞富集柱和1 ...
PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞基本方案用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的自动分离实验材料1、小鼠2、HBSS洗涤缓冲液3、MACS缓冲液4、磁珠5、RPMI-10完全培养基6、AUTOMACS系统和分选柱7、30μm尼龙网或40μm预分离滤膜实验方法1、用5只小鼠的淋巴结或2只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞。2、细胞在10mlHBSS ...
PriCells: 树突细胞的分离-用小鼠骨髓前体细胞培养树突细胞实验材料:1. 6-7周龄小鼠(最好为雄性鼠,因为它们的骨头比较粗大;运输后需要休息至少5天;不要使用应激或脱水的老鼠)2. 70%乙醇3. 冰冷的以及室温的RPMI-1640培养基(如Life Technologies)4. 氯化铵溶液0.02mol/L Tris·Cl,pH7.2 /0.14mol/L N ...
PriCells: 人或动物肺毛细血管原代内皮细胞的分离实验材料:1. 人或动物的肺部毛细血管2. PBS,含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml3. 3mg/ml中性蛋白酶、0.25%胰蛋白酶4. 眼科剪,眼科镊5. 20μm尼龙筛、100μm尼龙筛6. 离心管(15ml、50ml)实验方法:1. 将动物麻醉后开胸取肺组织,将肺 ...
PriCells: 牛或猪大血管原代内皮细胞的分离-消化刮脱法实验材料:1. 牛或猪2. PBS,含青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml3. 0.1%Ⅰ型胶原酶4. 眼科剪,眼科镊5. 慕丝线6. 离心管(15ml、50ml)实验方法:1. 分离牛或猪的主动脉等大血管,长15-20cm,用丝线结扎血管各分支后,取出主动脉。放入盛有含青霉素100U/ ...
PriCells:动物小血管内皮细胞的分离实验材料:1.兔、狗或大鼠等动物2.1×PBS,含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml,pH7.43.0.2%Ⅰ型胶原酶4.眼科剪,眼科镊5.慕丝线(7号线)、细铁丝6.离心管(15ml、50ml)实验方法:1.处死动物后,局部消毒取出主动脉,用加入抗菌素的PBS冲洗,放入盛有PBS的平皿中,摘除血管外的脂肪和结缔组织。2.用细丝 ...
PriCells:人真皮复合培养法实验材料:1.早产儿或死亡胎儿的皮肤,也可用手术取下的成体皮肤2.1000000U/L中性蛋白酶,0.25%胰蛋白酶3.MEM和HBSS混合液,添加20mmol/LHEPES、200000IU/L青霉素和200mg/L链霉素和1.59g/L庆大霉素,HBSS4.手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊5.不锈钢网6.离心管(15ml、50ml)实验方 ...
PriCells:人角质形成细胞的分离培养实验材料:1.早产儿或死亡胎儿的皮肤,也可用手术取下的成体皮肤2.1000000U/L中性蛋白酶,0.25%胰蛋白酶3.MEM和HBSS混合液,添加20mmol/LHEPES、200000IU/L青霉素和200mg/L链霉素和1.5g/L庆大霉素4.手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊5.离心管(15ml、50ml)实验方法:1.取厚1 ...
PriCells:正常人乳腺上皮细胞培养实验材料:1.人哺乳期早期或断奶后乳汁。2.培养液:RPMI1640,15%FBS,10%人血清,50μg/ml霍乱毒素,0.5mg/ml氢化可的松,1mg/ml胰岛素。3.HuS(humanserum):血库过期的血清,澳大利亚抗原阴性。5cmNunc塑料培养皿。4.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200m ...