细胞百科

染色质是细胞间期以散在形式存在的DNA、蛋白质和RNA相结合的复合物，其结构十分复杂，尤其是真核细胞的基因组，无论在数量上还是重复序列上都比原核细胞复杂。具有生命过程中的重要生理功能，如DNA的转录、均与染色质的结构和功能有关，在染色质上由于组蛋白的存在，其转录活性受到限制，只有转录活性的一部分，如去除组蛋白，其转录活性增高，染色质非组蛋白含有激活和抑制DNA转录的组分，对基因表达调控有重要作用。 ...

线立体DNA是染色体遗传物质，哺乳类动物的线立体DNA为共价闭合环的环状DNA。它变异快、结构相对简单，经母系遗传，对真核生物基因组的结构、复制、转录、调控机理等方面都起着重要作用。近年来被广泛用于近缘种间或种内种群间亲缘关系的研究。线立体DNA最早是用氯化铯梯度离心方法获得，该法提取的线立体DNA纯度高，但所需仪器设备昂贵，实验周期长，限制其在群体遗传研究中的应用。继而出现了酚抽提加酶解、碱裂 ...

一、细胞培养的历史沿革细胞培养（cell culture）的历史可以追溯到1885年Willhelm Roux尝试利用盐水培养鸡胚组织并让其存活数天的记录。1907年，一位美国的动物学家Ross Granvlle Harrison利用悬滴法（hanging drop technique）将分离自青蛙胚胎的神经细胞种植在青蛙的淋巴液（frog lymph）中，并在培养数小时之后观察到轴突的生长，首次 ...

一、体外培养细胞的分型体外培养细胞时，主要有两种培养体系：一种是贴附依赖型，一种是悬浮型。贴附依赖型大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖型细胞，依据培养细胞在体外的形态大致可将其分为以下四种类型：上皮细胞型细胞多呈扁平不规则多角形，中央有圆形细胞核，细胞彼此紧密相连成单层膜。生长时呈膜状移动，处于膜边缘的细胞总与膜相连，很少单独行动。此型细胞多起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮 ...

原代代培养物经第一次传代培养后的细胞，常被称为细胞系（cell line）。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系有一定差异的细胞系，常被称为该细胞系的亚系（subline）。从一个经过鉴定的细胞系采用选择法或单细胞克隆进一步所得到的细胞群，常被称细胞株（cell strain）。由原细胞株进一步分离培养出的与原株性状不同的细胞群，又被称为亚株（substrain）。一、细胞建系的一般程序细胞 ...

一、培养细胞的常规观察培养细胞在体外的生长过程是一个动态的连续过程，细胞的数目、形态以及培养基的颜色、澄明度等在一定程度上都是细胞生长状况的表现。借助于肉眼或显微镜的帮助，通过对上述常规指标的观察，可以有效地帮助我们及时把握细胞的生长信息，适时、适当采取相关措施培养好细胞。（一）培养基的观察培养基的颜色和澄明度是肉眼观察的两个重要指标。新鲜的培养基一般呈现桃红色，pH值约为7.2-7.4，培养过细 ...

衰老又称老化，通常指生物发育成熟后，在正常情况下，随着年龄的增加，其机能减退、内环境稳定性下降、结构中心组分发生退行性变化而趋向死亡的不可逆现象。一、细胞的寿命机体的细胞不断衰老与死亡，同时又不断地有细胞增殖与新生，呈动态平衡。对多细胞生物而言，细胞的寿命、衰老、死亡与机体的寿命、衰老和死亡是不同的概念。机体内个别细胞，甚至是某些器官组织中的许多细胞衰老与死亡，只要不发生在重要器官或组织，并不影响 ...

关于衰老机制的假说很多，而这些学说间又相互重叠、相互补充，甚至有些学说非常相似，例如有一种“DNA修复说”就与“体细胞DNA突变说”大同小异，只不过前者重点在于细胞防御体系而不在于损伤本身。再有“蛋白错误假说”与“体细胞DNA突变说”又相互重叠。由此，我们需用各种学说才能大致把握衰老机制的全貌。一、遗传决定说众所周知，在一定环境条件下，一个种内所有个体的寿命非常一致， 例如一个特殊品系大鼠的群体寿 ...

任何生命都有终结，细胞死亡（cell death）与细胞生长、分化、增殖一样，都是细胞生命活动的正常组成部分。引起细胞死亡的因素很多，但不外乎内因和外因两种。内因通常是指由于衰老所导致的自然死亡，而外因则指外界环境的各种因子超过了细胞所承受的强度及阈值，对细胞造成的损害。根据细胞死亡的模式不同，可分为坏死（necrosis）和凋亡（apoptosis）两种类型。一、细胞死亡概念的发展近二十年来，在 ...

一、死亡受体介导的细胞凋亡死亡受体属于肿瘤坏死因子基因家族，其共同特征是都有相似的、富含半胱氨酸的细胞外结构域。 死亡受体还有一个同源的、称为死亡结构域的胞内序列。死亡结构域一般使死亡受体与胞内凋亡机制相连，但它们有时也会介导与凋亡无关或抑制凋亡的过程。（一）FasL-Fas 系统介导的细胞凋亡自杀相关因子Fas（factor associated suicide）是广泛表达于正常细胞和肿瘤细胞膜 ...

生物体内的细胞增殖和凋亡在正常情况下处于动态平衡，如果细胞增殖过多或凋亡减少就会导致细胞过剩性疾病；如果增殖减少或凋亡增加，就会导致细胞减少性疾病。凋亡研究将为人类某些重大疾病的防治提供新策略。一、细胞凋亡减少和细胞存活增加的有关疾病这类疾病主要有癌症、自身免疫病、某些病毒病，以及结肠息肉等疾病。过去只重视细胞增殖所造成的疾病，自从细胞凋亡概念提出后，人们开始重视细胞凋亡与疾病的关系。（一）肿瘤过 ...

实验概要大肠杆菌感受态细胞的CaCl2法制备及质粒转化。实验原理处于对数生长期的细菌经CaCl2处理后接受外源DNA的能力显著增加。细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。在自然条件下，很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内，但在人工构建的质粒载体中，一般缺乏此种转移所必需的mob基因，因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短 ...

一、清洗新采用和重新使用的培养器皿，都要严格清洗，以防各种有害物质对培养细胞损害。培养用的塑料器皿目前主要依靠进口，均已无菌密封包装，可直接使用。对于塑料瓶盖或胶塞等，可水中浸泡后用2％NaOH煮沸10～20min，自来水中浸泡和蒸馏水漂洗2～3次，晾干备用。细胞培养中的绝大部分器皿系玻璃制品，清洗过程为以下步骤。1.浸泡　新使用或重复使用的玻璃器皿须经5％盐酸溶液或自来水浸泡过夜或煮沸30mi ...

原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后，经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群，使之在体外模拟人体生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分，生长缓慢，但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞培养做各种实验，如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。其操作步骤如下。1.剪切组织　先将所取得的组织，用D-Ha ...

原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的最大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。1.操作步骤（1）吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液。（2）向瓶 ...

1． 瘤细胞悬液接种（1）无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞。（2）在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经80～100目筛网过滤成细胞悬液。（3）培养细胞应用PBS洗两遍。（4）计数并调整细胞浓度至107～108／ml。（5）常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml／部位，＞106细胞)。初次接种成功 ...

细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 1． 冻存细胞 （1）选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液。 （2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×107／ml左右密度，离心，去上清。 （3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 ...

细胞接种或传代以后，实验者每天或至多间隔1～2d，要对细胞做常规性检查。观察细胞形态和生长情况以及培养的pH变化、有无污染等。根据细胞动态变化，做换液或传代处理，如发现异常情况应及时采取措施。1.细胞形态　生长状态良好的细胞，在一般显微镜下观察时可见，细胞透明度大、折光性强、轮廓不清。细胞生长不良时，轮廓增强，胞质中常出现空泡、脂滴和其他颗粒状物，细胞之间空隙加大，细胞形态可变得不规则甚至失去原 ...

1.实验原理　人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植物血凝素（PHA），淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞，进入有丝分裂。短期培养后，经秋水仙素处理，可抑制细胞分裂时纺锤丝的形成 ...

1.实验原理　染色单体或染色体的无着丝点断片，或因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期，仍然遗留在细胞质中。末期之后，单独形成一个或几个规则的次核，被包含在子细胞的胞质内，因比主核小，故称为微核。大小应为主核的1/20～1/5。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。微核率是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，所以可用简易的、快速、灵敏的微核计数来代替繁杂的畸变染色体计数。Matter ...