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线粒体肿胀的检测方法

Estimating Mitochondrial Mass,可以用于线粒体肿胀的检测 Accurate measurements of mitochondrial mass require a probe that will accumulate in mitochondria regardless of the mitochondrial membrane potential a propert ...

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通过细胞融合得到B细胞杂交瘤实验

基本原理分泌抗体的激活B细胞与骨髓瘤细胞融合,才能生成具有亲体细胞两方面特性即既可产生抗体又可在体外无限繁殖的杂交瘤细胞,因此,细胞融合是单克隆抗体制备的中心环节。细胞融合的方法多采用化学助融法,最常用的化学助融剂为聚乙二醇(Polyethylene glycol PEG),分子量100-4000的PEG助融效果最好,对细胞的毒性相对小。此外,还可利用电融合等物理方法,在亲本细胞的情况西很有适宜采 ...

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细胞融合(Cell fusion)实验

实 验 原 理两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合,也称细胞杂交,在自然情况下的受精过程即属这种现象。诱导细胞融合的主要方法有:病毒诱导融合,化学融合剂诱导融合和电融合。1. 病毒诱导融合:有许多种类的病毒能介导细胞融合,最常用的是灭活的仙台病毒(HVJ),为RNA病毒。病毒诱导细胞融合的过程有:首先是细胞表面吸附许多病毒粒子,接着细胞发生凝集,几分钟至几十分钟后,病毒粒 ...

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胸腹水细胞染色体制备

在恶性肿瘤的胸腹水中有大量的分裂期细胞,其中多以非整倍体细胞存在,并含有各种标记染色体。   1、 实验材料   2.5%碘精、75%酒精、无菌棉球、镊子20-22号无菌腰穿包、50ml离心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片等。   2、 操作过程 (1)采样:选择有胸或腹水患者,在无菌条件下,轻腹穿刺或于手术取胸或腹水20-50ml; (2)培养:立即加入秋水仙素培养,最终浓度为0.02 ...

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染色体制备体会

1、 培养基PH浓度、小牛血清量及培养箱温度的恒定是培养成功关键;   2、秋水仙素适量、适宜的处理时机和时间,是获得良好、足够分裂相的条件。分裂相的多少和染色体形态及带型处理良好与否均受其影响。   3、低渗处理是获得分散良好的分裂相关键步骤,低渗过度或不足都会造成染色体形态不良的结果。在低渗处理时期细胞十分娇嫩,并且表面发粘,低渗细胞混匀时,吹打要适宜,避免细胞破碎及粘团,另外不要将细胞吸到吸 ...

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DNA的细胞化学:孚尔根反应(Feulgen Reaction)

Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。 1.实 验 目 的 1.1. 熟悉并掌握Feulgen反应的原理及其实验操作方法 1.2. 对细胞的免疫组化研究方法有一初步的认识 2.实 验 原 ...

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IFN-α逆转白血病细胞耐药性的实验

IFN-α逆转白血病细胞耐药性的实验研究  第三军医大学学报1999年第21卷第3期张勇 张翼军 夏顺中 周成康  提 要 目的:了解干扰素-α(IFN-α)逆转白血病细胞多药耐药性(MDR)的作用和可能机制。方法:采用链亲和素-胶体金原位杂交(SAG-ISH)检测了IFN-α孵育前后的52例白血病患者骨髓细胞的多药耐药基因(MDR1)表达,用荧光分光光度法测定了IFN-α孵育前后的52例骨髓细胞 ...

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染色体分带技术

染色体显带技术是在显示染色体基础上发展起来的技术,其优点是能显现染色体本身更细微的结构,有助于更准确地识别每条染色体及染色体异常疾病。染色体分带技术能适用于各种细胞染色体标本。   染色体显带是沿着整条染色体的长轴,能显现出着色深浅不同、横向走的带型。目前认为染色体显带现象是染色体结构所致。但用特殊方法处理后,再用染料染色,则带型更加清晰,随显带方法不同,显现出的带型的特点也不一样,这说明带的出现 ...

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肾小球分离、移植培养

SD大鼠颈椎脱臼法处死,75%乙醇浸泡1~2分钟,2次,置超净台内,打开腹腔取出肾脏剪碎,置含Hank"s液的无菌培养皿洗涤,置80目不锈钢筛网上。用扁平自制小铲轻轻碾磨产物微小组织透过筛网,滤过组织Hank"s液混合物用吸管吸至120目不锈钢筛网,滤过,去小组织块,滤过物吸至200目不锈钢筛网,轻轻滤过,Hank"s液洗涤1次,收集网上肾小球,镜下观察为分离良好的肾小球。 肾小球用0.2%胰酶、 ...

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DNA显示和细胞有丝分裂相的观察实验

核酸是生物最重要的组成成分核酸分为两大类即脱氧河塘核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。它们在细胞内的分布及化学性质均有所不同。DNA主要分布在核的染色质或有丝分裂过程中出现的染色体内。RNA分布在细胞质和核仁内。但在染色质及染色体中也含有少量的RNA,核仁中也有少量的DNA。在线粒体,叶绿体等细胞器内除含有RNA外,也含有少量的DNA。 一、目的与要求 了解Feulgen反应的基本原理,学习其 ...

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抑瘤粉抗肝部细胞实验研究

 摘要: 目的: 观察抗癌中药“抑瘤粉”的抑癌作用。方法: 通过建立小鼠移植实体型肝癌。结果: 抑瘤粉抗肝癌抑制率为47%~ 69%。在超微病理上 抑瘤胶囊能破坏由脂类、蛋白质和糖类组成的细胞膜与核膜 使其崩溃裂解; 枯否氏细胞功能增强 其分泌免疫调节因子破坏癌细胞。提示: 抑瘤粉有明显的抗肝癌细胞作用。 主题词: 抗肿瘤药 肝肿瘤 动物 实验  本文建立小鼠实体型肝癌模型 观察抑瘤粉对肿瘤 ...

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植物油凝素的制备

植物血凝素也称为植物凝集素(PHA),可自制也可购自商品。自制的方法常用生理盐水提取法。   (A)干品制备法(1)选广东鸡子豆10g,用蒸馏水冲洗,置培养皿内用75%酒精一次性浸洗,倒掉酒精留间隙置37℃。恒温箱内24-48小时;(2)在无菌条件下研碎鸡子豆,加生理盐水30ml,摇匀后放入4℃冰箱24小时,第二天再加生理盐水70ml,再置4℃冰箱内24小时。每8-12小时摇荡一次。(也可一次性加 ...

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动物细胞融合实验

一、实验目的细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下,体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50年,现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫,肿瘤及细胞工程的重要手段。通过实验,了解细胞融合的原理,掌握细胞融合的基本方法。二、实验原理在诱导物(如仙台病毒,聚乙二醇)作用下,相互融合的细胞发生凝集,随后在质膜接触处发生质膜成份的一系列变化,主 ...

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组织培养细胞染色体制备

组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株,多为恶性肿瘤细胞株,且呈贴壁生长,仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态,只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相,所以积水仙素处理的时机及量是染色体标本形态及分裂指数的关键。   1、 实验材料   培养液(PRMI 1640、M199、DM ...

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推荐:染色体的标本制作及其组型实验

在真核生物中 染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。染色体作为遗传物质-DNA的载体 对生物的遗传、变异、进化和个体发生 以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。将体细胞核中全部染色体按照其大小、着丝粒位置,以至带型有序地排列起来,此模式图象排列即为核型(karyotype)或染色体组型。核型 ...

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用MTS检测细胞生长

1.培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞(检测IL-2),或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞(检测IL-3)到对数生长期。 2.取96孔细胞培养板,每孔加0.1ml含1×104~2×104上述细胞之一的DMEM培养液(加10%小牛血清)。 3.每孔加0.1ml系列稀释的待测细胞因子(IL-2或IL-3)样品或细胞因子标准品,在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧 ...

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细胞质流动及其影响因素

实验目的观察植物细胞质流动现象了解影响细胞质流动的因素。实验原理在多种植物的细胞中都能观察到植物细胞质流动现象,它是细胞活动强弱的重要指标。细胞质流动现象的产生,是细胞骨架中微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结果,此过程要消耗能量,受各种因素诸如温度、渗透压及各种离子的影响。材料用品**材料:紫鸭趾草花丝,黑藻(水王荪、轮叶黑藻)叶。 紫鸭趾草紫鸭趾草花黑藻**药品:1mol/L氟化钠,1mol ...

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冷冻细胞活化

1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒温水槽 3.2 新鲜培养基 3.3 无菌吸管/ 离心管/ 培养瓶 3.4 液氮或干冰容器 4. 步骤: 4.1 操作人员应戴防护面罩及手套,防止冷冻管可能爆裂之伤 ...

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原体污染后的治疗与处理

第一种方法:使用泰乐菌素(tylosin),Sigma,120多块钱泰乐菌素是一种兽用抗生素常用在鸡、猪的食料辅料,可以防止支原体感染引起的支气管哮喘,至今尚未见有耐药菌株,是治疗支原体感染的特效药。第二种方法:M-Plasmocin:InvivoGen公司研究开发的新一代支原体抗生素M-Plasmocin能有效地杀灭支原体,不影响细胞本身的代谢,并且用M-Plasmocin处理过的培养细胞,不会 ...

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通过优化由软件控制的加、减速率离心分离单核细胞

概述如今越来越多的临床与细胞实验室检验项目对快速处理样品提出了更高的要求。对于样品分离的常规离心技术,更是需要具有尽可能快的加速和与之相应的减速,以缩短许多诸如培养细胞等温度敏感的样品在离心机中存留过长的时间。Eppendorf根据这方面应用的要求,开发并推出5702、5702R、5702RH系列离心机,已经成功地将离心机加速和减速时间缩短至25秒以内。除了速度,另一个影响或评价临床与细胞实验室离 ...

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