通过细胞融合得到B细胞杂交瘤实验

基本原理

分泌抗体的激活B细胞与骨髓瘤细胞融合，才能生成具有亲体细胞两方面特性即既可产生抗体又可在体外无限繁殖的杂交瘤细胞，因此，细胞融合是单克隆抗体制备的中心环节。细胞融合的方法多采用化学助融法，最常用的化学助融剂为聚乙二醇（Polyethylene glycol, PEG），分子量100-4000的PEG助融效果最好，对细胞的毒性相对小。此外，还可利用电融合等物理方法，在亲本细胞的情况西很有适宜采用。本节介绍化学融合方法。抗体分泌细胞是由免疫动物（小鼠或大鼠）的脾脏或淋巴结制备，与骨髓瘤细胞混合，并用PEG使之融合。5-15天后，仅杂交瘤开始在选择培养基（见前）中生长。其后测定杂交瘤分泌的特异抗体，一旦选出合用的阳性细胞，则进行克隆，亚克隆及冻存。


图 2-3-1 通过药物筛选杂交瘤示意