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        染色体制备体会

        互联网

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        1、 培养基PH浓度、小牛血清量及培养箱温度的恒定是培养成功关键;
          2、秋水仙素适量、适宜的处理时机和时间,是获得良好、足够分裂相的条件。分裂相的多少和染色体形态及带型处理良好与否均受其影响。
          3、低渗处理是获得分散良好的分裂相关键步骤,低渗过度或不足都会造成染色体形态不良的结果。在低渗处理时期细胞十分娇嫩,并且表面发粘,低渗细胞混匀时,吹打要适宜,避免细胞破碎及粘团,另外不要将细胞吸到吸管上部及 离心管 上部,避免细胞丢失。
          4、固定技术是制备良好分散的染色体的重要步骤。若染色体分数不良,可适当加大冰乙酸含量,其同时有改善由于低渗处理不够或固定不充分所造成的缺陷,但过量会造成染色体形态变化和影响分带结局。染色体形态不良与固定液速度有关,加第1次固定液过快或打过快,可造成飘带样染色体; 5、固定液每次使用必须新鲜配制,否则将会形成酯类,从而影响固定效果。6、滴片是染色体制备中影响染色体形态的关键一步。首先要载玻片要非常干净,否则会影响染色体的分散和分带效果。其次是滴片的距离、滴加量多少、制片的方式都会影响染色体分期效果。 7、烤片:是染色体制备中最后一步技术。烤片的温度、时间与染色体形态和分带有关。不宜温度过高和烤片时间过长。
        十四、染色体实验技术分析
          染色体分裂指数低:患者处于非常时期(感染期、放、化疗期):
                   培养基营养成份不良;
                   培养基PH偏低或偏高;
                   PHA过量或不足;
                   小牛血清质量不高;
                   小牛血清数量偏低或过高;
                   培养温度不稳定;
                   培养箱温度偏低;
                   秋水仙素处理时间过短;
                   离心时间或速度不足;
                   制备过程损失过大。
          染色体形态不理想:受检者处于非常时期;
                   PHA过量;
                   小牛血清质量不高;
                   培养箱温度不恒温;
                   秋水仙素量不当;
                   低渗时间不理想;
                   低渗温度过高;
                   离心速度过高;
                    固定液加速过快;
                   固定混匀手法过重;
                   吹片技术不良。

         

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