细胞分析

鸟枪法测序的操作方法 1、用限制酶切下目的片段的大片段Insert DNA 并用Agarose凝胶电泳进行回收。 2、对回收的大片段DNA用物理方法 (如超声波等) 进行切断处理，然后用T4 DNA Polymerase对小片段 DNA进行末端平滑化。 3、 进行Agarose电泳，切胶回收1 kbp ~ 2 kbp的小片段DNA。然后用BcaBest DNA Polymerase在DNA的 3' ...

1、流式细胞仪的分析速度： 一般流式细胞仪每秒检测1000～5000个细胞，大型机可达每秒上万个细胞。 2、流式细胞仪的荧光检测灵敏度： 一般能测出单个细胞上＜600个荧光分子，两个细胞间的荧光差＞5%即可区分。 3、前向角散射（FSC）光检测灵敏度： 前向角散射（FSC）反映被测细胞的大小，一般流式细胞仪能够测量到0.2μm～0.5μm。 4、流式细胞仪的分辨率： 通常用变异系数CV ...

流式细胞仪（flow cytometry，FCM）是集激光技术、电子技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器，具有灵敏度高、重复性好、特异性强、方法灵活、分析速度快等优点。我院自2000～2002年用美国BD公司生产的FACSC-ALIBUR流式细胞仪，结合科研医疗开展了淋巴细胞亚群（CD3、CD4、CD8、CD19、CD56）分析、白血病免疫分型、DN ...

流式细胞术（flow cytometry，FCM）自70年代中期就成为研究细胞生物学的重要技术，至今己被广泛应用于肿瘤学、免疫学、血液学、药物学等领域。FCM能对大数量的单个细胞同时进行多个物理和化学参数检测，其中包括细胞的大小、细胞内颗粒、细胞复杂性和细胞的相对荧光强度等。 我科使用美国BD公司生产的FACSC-ALIBUR流式细胞仪已有1年多，我们认为该仪器的性能稳定，操作简便，电脑软件设计较 ...

流式细胞仪（flow cytometer，PCM）是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。概括来说，流式细胞术就是对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。从流式细胞术的发明、改进，流式细胞仪的研制、革新，到今天在众多应用领域的拓展，每一步都是诸如生物学、生物技术、计算机科学、电子工程 ...

摘要： 流式细胞技术在细胞定量检测方面是最先进检测技术，流式细胞仪在临床和科研领域得到广泛运用。 概述： 分析细胞学是细胞定量分析的学科，流式细胞技术（Flow Cytometer ，FCM）是分析细胞中的一个重要领域，该技术为细胞学研究手段之一，能够对细胞和细胞器及生物大分子进行高达每秒上万个染色体的分析，而且一个细胞多参数分析并可分选细胞。这种以流动的方式（相对静态方式）测量细胞与传统的用荧光 ...

摘要： 简要论述了流式细胞仪（flow cytometry ，FCM）的工作原理，并对其在生物学基础科学研究中的应用进行阐述，包括对细胞凋亡、细胞周期、免疫细胞、细胞受体的研究应用。 流式细胞仪（flow cytometry ，FCM）研制、发展、革新和应用领域的扩展，都是由生物学、生物技术、计算机科学、电子工程学、流体力学、激光技术、分子生物学、有机化学和物理学等多个学科综合发展和应用而实现的。 ...

摘要： 流式细胞仪是分选细胞结构与功能，准确迅速选标记细胞的仪器。本文讲述流式细胞仪的主要组件，工作原理及其实际应用。 流式细胞仪（flow cytometer）是采用流式细胞术的典型仪器，它能迅速的对单个细胞及其群体的化学物质的含量与种类作出分析，对含指定化学物质的细胞进行分选。 《流式细胞仪构成与工作原理》下载 点击这里下载 ...

Accuri 的C6流式细胞仪系统是一种全功能、二激光、六探测器分析流式细胞仪系统，包括：C6流式细胞仪、CFlow 软件、电脑。C6的流式细胞仪系统提供最畅销的流式细胞仪，而且价格少几倍。C6流式细胞仪系统以敏感的探测器捕获和激发前散射光和旁散射光，以及4个荧光探测器的可调光学过滤器。CFlow软件使搜集数据和分析变得简单快速。CFlow软件如此直观，让您启动并运行一个小时内得到您的Accuri ...

目录 前言 第1章 综述 第2章 液流系统 第3章 散射光信号及荧光信号 　　3.1 散射光信号 　　3.2 荧光信号 第4章 光电系统 　　4.1 光平台 　　4.2 光学滤片 　　4.3 信号探测器 　　4.4 阀值 第5 章 数据分析 　　5.1 数据采集及显示 　　5.2 设门 　　5.3&nb ...

流式细胞仪主要由以下五部分构成：①流动室及液流驱动系统②激光光源及光束形成系统③光学系统④信号检测与存储、显示、分析系统⑤细胞分选系统。 一、主要技术指标 1．流式细胞仪的分析速度：一般流式细胞仪每秒检测1000～5000个细胞，大型机可达每秒上万个细胞。 2．流式细胞仪的荧光检测灵敏度：一般能测出单个细胞上<600个荧光分子，两个细胞间的荧光差＞5%即可区分。 3．前向角散射（FSC）光检 ...

Specimen collection： Whole blood is collected in Vacutainer CPT （Becton-Dickinson） or 9 ml EDTA vials. Isolation of peripheral mononuclear cells： If CPT Vacutainer are used， we follow in principle the ...

1、在做多个同类酶切反应预混液时，水要多加1-5微升(当然不能超过预混液总体积的5%)，以防止最后一管酶液不够的尴尬局面。 2、记住所用酶的特性，不光体现BUFFER的选择上。也体现记住不同限制酶稳定性上。比如BamHI5小时内稳定（37度），而BglII16小时内都保留100%的活性；那么在用酶时，如果能反应16小时，就可以采用BamHI : BglII = 2:1的用量了(为了省钱)。 3、如 ...

DGGE，CGGE及TGGE三种方法是基于相同的原理而设计的突变检测方法，它仍均是根据DNA的解链特性而设计.对于同一定序列组成或的DNA片段来说，它具有恒定的解链温度(Tm)，但若其序列发生改变时，Tm值亦发生改变，在含有变性因素(变性剂， 高温)的凝胶半进行电泳，当其比链解开形成分叉时，电泳迁移的速度就会改变.Tm值 全要取决于DNA的碱基组成，序列中出现单碱基替换时，Tm亦发生改变，电泳迁移 ...

测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序，DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一种单链的DNA模板或经变性的双链DNA模板和一种恰当的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用单链的DNA模板，合 ...

摘 要：当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡。开展对细胞凋亡的研究，首先要解决是方法学问题。作者从凋亡细胞的特征性核DNA片段检测着手，阐述了多种凋亡细胞核DNA片段检测方法以及近年来的一些新进展。 细胞凋亡（apoptosis）又称细胞凋谢或称程序性细胞死亡（Programmed cell death，PCD），是有别于细胞坏死而受基因控制的一种主动性细胞自杀过程。对细胞凋亡的研究已成为当 ...

（一）第一向等电聚焦 1、从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室温溶解。 2、在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。 3、 从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100ml样品，充分混匀。 4、从冰箱中取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条（17cm pH 4-7 ...

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