双向电泳技在筛选膀胱癌特异标志蛋白中的应用

摘要：

目的 建立高分辨率的膀胱移行上皮癌不同时期的双向凝胶电泳图谱，并初步分析其蛋白质表达情况，寻找其差异表达蛋白，为寻找癌变相关蛋白奠定实验基础。方法 用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌不同分期的组织，凝胶考马斯亮蓝染色，然后利用GS-800 Calibrated Densitometer凝胶成像系统获取图像，用PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析，寻找差异表达蛋白。在此基础上应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）得到相应的肽质指纹图谱，然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质。结果 获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱，三块胶的平均蛋白质匹配率达76%，蛋白质点在位置上有较好的重复性，不同胶间的蛋白质点在等电聚焦IEF方向偏差是（0.98±0.26）mm，SDS-PAGE方向偏差是（1.23±0.22）mm，并且得到了若干与细胞增生、分化、周期调控信号转导或肿瘤发生有关的蛋白质，例如SFN，热休克蛋白-27等。结论 为进一步探讨癌变机理及筛选其特异性分子标志物打下方法学基础。

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