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实验技能SOP

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Primary Neuron Viability Assay

ProtocolsDescriptionFluorescence based asssay for establishing neuronal viability in cell culture monolayers. ProcedureMonolayer cultures of rat embryonic cortical neurons were prepared and plated at ...

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葡萄糖来源AGEs ELISA检测试剂盒

葡萄糖来源AGEs ELISA检测试剂盒(Glucose-derived AGEs ELISA Kit)研 究 背 景越来越多的证据指出晚期糖基化终端产物(AGEs)修饰蛋白严重影响到老龄化人群的健康问题。AGEs是葡萄糖与自由的蛋白质氨基基团发生非酶促糖基化反应的终端不可逆代谢产物的总称。其在人体内的积累会引发组织或器官一系列的病理性变化,从而导致白内障、阿尔茨海默氏病、骨关节炎、心功能不全等疾 ...

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胚胎冷冻保存

胚胎冷冻对活组织和细胞进行冷冻保存时冷冻过程将可能对细胞造成损伤.主要的损伤机制包括:①溶液效应造成化学损伤.在冷却速度较慢的情况下胞外溶液中水分大量结冰.与海水中的冰山主要是淡水形成而盐分很低的情况相类似细胞外溶液结成的冰中溶质很少这样就造成胞外溶液浓度提高从而使胞内水分大量渗出细胞强烈收缩并使细胞长时间处于高浓度溶液中;②细胞内结冰造成物理损伤.冷却速度过快时胞内水分来不及通过 ...

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小动物活体成像技术

分子成像技术使活体动物体内成像成为可能,它的出现,归功于分子生物学和细胞生物学的发展、转基因动物模型的使用、新的成像药物的运用、高特异性的探针、小动物成像设备的发展等诸多因素。目前,分子成像技术可用于研究观测特异性细胞、基因和分子的表达或互作过程,同时检测多种分子事件,追踪靶细胞,药物和基因治疗最优化,从分子和细胞水平对药物疗效进行成像,从分子病理水平评估疾病发展过程,对同一个动物或病人进行时间、环境、发展和治疗影响跟踪。

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豚鼠饲育管理标准操作规程(SOP)

名称:豚鼠饲育管理标准操作规程(SOP) 关键词:豚鼠饲育管理 目的:本操作规程是关于怎样饲育豚鼠才能使其被最有效的用于实验的具体操作规程。 主体内容: 1.饲育管理指标 (1)环境卫生管理的指标 (2)外观健康检查指标 (3) 生产数量指标 按平面饲养设备,每人负责饲养管理种母为150只,种公30只,育种60只(其中母种50只,公种10只):,月上交任务120只(月单位生产指标o.8只)。 ...

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高血压大鼠血压测定 标准操作规程(SOP)

名称:高血压大鼠血压测定 标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠 血压测定 目的:准确测定大鼠血压 操作步骤: 将大鼠放入特定恒温烤箱或者加热器内让其体温升高,直至手触其尾巴感觉很暖,看得到尾静脉扩张,尾部皮肤呈粉红色(也可以烤到大鼠出汗,就是有些臭,哈哈)。 然后让大鼠钻入一个小布袋(露尾巴出来)或者是特定的大鼠固定器里面,将大鼠尾动脉血压计的气囊迅速套在其尾巴上,将尾巴固定在血压计上面,打开电源 ...

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大鼠幽门结扎性溃疡(pylorus ligated gastric ulcer) 标准操作规程(SOP)

名称:大鼠幽门结扎性溃疡(pylorus ligated gastric ulcer) 标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠 幽门结扎性溃疡 目的:制备溃疡病模型评价抗溃疡药的作用 原理:大鼠幽门结扎后胃液滞留胃酸和胃蛋白酶对胃粘膜长时间消化引起溃疡 主体内容: 1.器材:手术剪,缝合线(粗),持针器,皮镊子,止血钳。铁丝鼠笼。手术灯,缝合用25 W照明灯3个。乙醚,麻醉钟罩及麻醉口罩。标本固定瓶 ...

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大鼠灌注取脑标准操作规程(SOP)

名称:大鼠灌注取脑 标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠 灌注取脑 目的: 完整取出大鼠脑部(取材) 操作步骤 流程:1)麻醉 2)开胸 3)心脏左心室穿针剪开右心耳 4)生理盐水冲水 5)4%多基甲醛固定 6)取脑 7)保存或切片. 1 多聚甲醛的配置: 一般方法为:4%多聚甲醛PBS缓冲液配法:称取40g PFA溶于装有500ml DEPC水的玻璃容器(烧杯或烧瓶)中,持续加热磁力搅拌至60~ ...

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转基因小鼠模型的建立(SOP)

名称:转基因小鼠模型的建立(SOP) 关键词:转基因小鼠 目的:在动物体研究转化基因 原理: 转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术,它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供转基因胚胎发育的体外培养系统和宿主动物等许多方面。 当制备转基因动物时,外源基因可能只整合到 ...

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测定大鼠心肌AGEs含量标准操作规程(SOP)

名称:测定大鼠心肌AGEs含量标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠心肌;AGEs含量 目的:观察糖基化终末产物的生成量,用于判定药物对糖尿病心肌病大鼠的疗效。 主体内容: 制备心肌匀浆组织后→离心(3000rpm,10min,4℃)→弃上清,沉淀物用去离子水洗3次,加入5ml氯仿-甲醇(2:1)→放入摇床内,4℃振荡过夜后,加入2ml甲醇,0.5ml去离子水&rarr ...

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内皮素-1诱导的局部脑缺血大鼠模型标准操作规程(SOP)

名称:内皮素-1诱导的局部脑缺血大鼠模型标准操作规程(SOP) 关键词:ET-1 局部脑缺血 SD大鼠 目的:本操作规程是关于利用内皮素-1诱导局部脑缺血大鼠模型对药物治疗脑缺血效果进行评价的具体操作规程。 原理:利用ET-1强烈的收缩血管效应,并在MCA附近位置注射,制作局部脑缺血模型。 主体内容:首先,大鼠通过腹腔内注射2%的戊巴比妥钠(40mg/kg)被麻醉,同时保持呼吸畅通。如果需要可补充 ...

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二袖套法大鼠肝移植标准操作规程(SOP)

名称:二袖套法大鼠肝移植标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠;肝移植 目的:建立大鼠肝移植模型 主体内容: 1.术前准备 材料 供体最好为200~250 g雄性大鼠,受体最好为250~300 g雄性大鼠。 肝下下腔静脉及门静脉袖套管采用输液管制成袖套管提前作划痕以利于固定。胆管套管采用硬膜外管 显微器械一套 灌注液,保存液,肝素生理盐水 2.手术 取肝 供体术前不禁食用10%水合氯醛3ml/ kg ...

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大鼠肺动脉压检测方法

名称:大鼠肺动脉压检测方法 关键词:大鼠肺动脉压检测 目的:建立直接检测大鼠肺动脉压的方法 背景知识: 肺动脉高压是临床常见疾病近年来肺动脉高压的研究已成为许多学者瞩目的领域.但与检测系统动脉压不同肺动脉压的检测难度较大(特别是在小动物).本法应用自制末端呈弧形的PV-1肺动脉插管建立了直接检测大鼠Ppa的方法. 主体内容: 1.制备大鼠肺动脉导管:取长度约15cmPV-1管在其末端1cm处用火焰 ...

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重症急性胰腺炎动物模型制备标准操作规程(SOP)

名称:重症急性胰腺炎动物模型制备 关键词:重症急性胰腺炎 目的:制作重症急性胰腺炎动物模型 背景知识:这是我师兄的课题中的部分,技术很成熟 原理:SAP的发病机理复杂,主要有胰酶异常激活、白细胞过度激活、胰腺微循环紊乱等学说,在造成胰腺损伤的同时,激活胰腺内的炎症细胞使其释放炎症介质,这些炎症介质逸入血液循环激活机体其他炎症细胞,释放大量的炎症介质,引起瀑布反应(cascade),促成全身炎症反应 ...

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2-AAF/PH(2-乙酰氨基芴灌喂+2/3肝切除)模型制作标准操作规程(SOP)

名称:2-AAF/PH(2-乙酰氨基芴灌喂+2/3肝切除)模型制作 关键词:2-乙酰氨基芴,肝切除 目的:制作制作肝卵圆细胞(肝脏干细胞)增殖的模型 背景知识:无 原理:肝脏是个再生能力非常强的器官,一般由肝细胞来完成肝再生,当肝损伤严重时,则启动为卵圆细胞增殖并分化为肝细胞和胆管细胞来完成肝脏再生。内源性肝脏干细胞是指存在于肝脏内具有增殖分化为肝细胞和胆管细胞的能力的一类细胞一般认为卵圆细胞是内 ...

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小鼠肺泡灌洗标准操作规程(SOP)

标题:小鼠肺泡灌洗标准操作规程 关键词: 肺泡灌洗;细胞分类计数;细胞因子 目的:检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下,肺部 出现的各种病理改变。 例:哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高,灌洗 液中各种细胞因子,如IL-4IL-5IL-10IFN-r等水平。 主体内容(操作步骤): 实验的准备 实验的器材、仪器、药品:4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS; 手术器械: ...

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大鼠足底光热刺激潜伏期测定标准操作规程(SOP)

名称:大鼠足底光热刺激潜伏期测定标准操作规程(SOP) 关键词:疼痛; 热刺激潜伏期;PWTL 目的及原理:本实验通过测定大鼠对强光照射足底因疼痛而缩足所需的时间来说明动物对痛刺激的敏感程度。 主体内容: 实验准备:热痛刺激仪(以BME-410A型为例),测试架(上铺玻璃平板),环境安静,室温保持在22-26℃,测量时间段一致(如早8点至晚6点之间) 操作步骤 1.实验前5 天每日将大鼠置于实验观 ...

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实验动物寄生虫监测标准操作规程(SOP)

名称:实验动物寄生虫监测标准操作规程(SOP) 关键词:实验动物寄生虫监测 目的:规范实验动物寄生虫监测的具体过程,确保监测结果可靠。 主体内容: 实验动物的寄生虫种类繁多。从寄生虫分类学角度,可分为原虫、蠕虫及节肢动物,蠕虫又可分为吸虫、绦虫和线虫。从宿主角度,可分为小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、猫、犬及灵长类的寄生虫。从寄生部位,又可将寄生虫分为体内寄生虫与体外寄生虫。 1. 体外寄生虫检查方法 ...

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实验动物病毒监测标准操作规程(SOP)

名称:实验动物病毒监测标准操作规程(SOP) 关键词:实验动物病毒监测 目的:规范实验动物病毒监测的具体过程,确保监测结果可靠。 主体内容: 实验动物病毒学监测的目的主要有三个:一为常规定期对所饲养的动物群抽样检查,以了解动物群中病毒感染情况,动物是否符合原来级别;二为对新引进动物的检疫;三为动物群中发生某种疾病或发生传染病流行,要确证病原,采取控制措施,并对患病动物进行病毒病原学检查。 病毒检测 ...

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实验动物真菌监测标准操作规程(SOP)

名称:实验动物真菌监测标准操作规程(SOP) 关键词:实验动物真菌监测 目的:规范实验动物真菌监测的具体过程,确保监测结果可靠。 主体内容: 引起实验动物皮肤真菌病的病原菌,主要是石膏样毛癣菌、石膏样小孢子菌和羊毛状小孢子菌三种,这三种菌的检查是实验动物真菌学监测的核心内容。不论是从动物皮肤病灶处,或是从非病灶处分离出这三种菌,均视为异常。因为非病灶处的真菌很可能随后引起实验动物真菌感染,同时对饲 ...

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