蛋白表达

蛋白纯化反相柱的选择

2013-07-08

15种蛋白质单晶培养的方法

2013-07-08

蛋白的裂解与提取方法步骤

2013-07-08

AKTA快速蛋白分离系统与HPLC 的优劣比较

2013-07-08

2013-07-08

2013-07-08

2013-07-08

2013-07-08

2013-07-08

先介绍一下His Tag，为5-15 His 串在一起的小肽，在表达纯化中用的较为普遍的一种Tag 从本质上说它是一种亲和性Tag，但也个案证明其也能做一些兼职工作：增加蛋白可溶性，提高蛋白稳定性。但它的本质工作是与IMAC亲和，使纯化过程变的更加程序化，更具可控性。相对与其他亲和Tag如 GST Flag Strep 它的特点可谓鲜明：一，小，浓缩的都是精华， ...

2013-04-01

单克隆抗体特异性识别的野生型谷胱甘肽-S-转移酶进展

Glutathione S-transferase omega 1 (GSTO-1) exists as both a wild-type (wt) and a mutant (mut) enzyme due to a polymorphism in a single amino acid Ala140Asp. (1) The role that this gene product plays ...

2013-04-01

原核表达研究者关心的10个问题

pET 是目前应用最为广泛的原核表达系统，已经成功地在大肠杆菌中表达了各种各样的异源蛋白。经pET系统过与使用过和正在使用这个系统的科学家的交流，我们发现了一些在使用pET系统的过程中以及原核表达中的一些常见问题。在此，我们选取了其中一些比较有代表性的问题，附上我们的建议改进方案，并期待和你一起分享成功的喜悦。 1.目的蛋白总是以不可溶的形式出现真是令人烦恼在大肠杆菌中表达 ...

2013-04-01

稳定表达具有生物活性的人重组对氧磷酶

INTRODUCTION Serum paraoxonase-1 (PON-1) is a high-density lipoprotein (HDL)-associated calcium-dependant esterase with antioxidant and anti-atherogenic properties. The activity of paraoxonase-1 has ...

2013-03-20

利用农杆菌侵染烟草进行体内瞬时表达的方法

原理通常，我们可以利用烟草的瞬时表达系统来观察感兴趣蛋白的亚细胞定位（通过与绿色荧光蛋白构成融合蛋白）。同时，还可以检测蛋白的表达量。这一个过程是通过农杆菌作为一个工具将目的基因整合到到烟草的细胞内的。材料与试剂 1. 携带表达载体的农杆菌菌株（通常表达载体由35S启动子驱动） 2. 2-4周的烟草植株 3. LB培养基 4. ...

2013-02-25

含多个磷酸化位点的多肽的合成

生命活动与蛋白质的动态变化密切相关很多情况下某些蛋白质是通过各种翻译后修饰来完成或改变其功能。在数量众多的蛋白质翻译后修饰中，蛋白质磷酸化修饰无疑是最重要的一类，它是指通过蛋白激酶（Protein kinase，PK）介导的酶促反应把磷酸基团从一个化合物转移到另一个化合物上的过程（Figure 1所示），是生物体内存在的一种普遍的调节方式。现今发现的所有人类蛋白质中超过30%可被磷酸化修饰，这 ...

2012-09-06

外源基因的诱导表达

1．目的了解外源基因在原核细胞中表达的特点和方法。 2．原理外源基因克隆在含有lac启动子的表达系统中。先让宿主菌生长，lac I产生的阻遏蛋白与lac操纵基因结合抑制下游的外源基因转录。向培养基中加入诱导物IPTG（异丙基硫代-b-D-半乳糖），解除抑制使外源基因大量表达。表达的蛋白可经SDS-PAGE或Western-blotting检测。 3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸 ...

2012-03-26

蛋白质的表达、分离和纯化

目的要求（1）了解克隆基因表达的方法和意义。（2）了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理，同时克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。大肠杆菌是目前应用最广泛的蛋白质表达系统，其表达外源基因产物的水平远高于其它基因表达系统，表达的目的蛋白量甚至能超过细菌总蛋白量 ...

2012-03-12

浙大鉴别出Toll受体家族新成员

本文由丁香园站友 fredrick16转载，点此查看详情近日来自浙江大学生命科学学院细胞与发育生物学研究所的研究人员从硬骨鱼中首次鉴别出Toll-IL-1受体家族的一个新成员DIGIRR，并证实其在IL-1信号通路中发挥重要的负调控作用。这一研究成果于7月29日在线发表在著名的免疫学期刊《免疫学期刊》（The Journal of Immunology）上。 Toll蛋白样受体（T ...

2011-08-23

一组线粒体蛋白能延长生物寿命

本文由丁香园站友 PRESS 转载，点此查看详情据美国物理学家组织网近日报道，瑞典哥特堡大学研究人员近日识别出一组线粒体蛋白质，并发现生物体如果缺乏了这组蛋白中的某些种，其他蛋白反而会将细胞的基因组加固，导致与老化相关的疾病延迟到来，从而可延长生物体的寿命。因此控制这些线粒体蛋白质的活性有助于研究与老化相关的疾病，如癌症、老年痴呆症、帕金森症等。该研究发表在最近出版的《分子细胞》杂志上。一些 ...

2011-05-18

膜蛋白表达和分析的新技术

膜蛋白是当今最重要的药物靶标蛋白。对膜蛋白功能和结构的全面理解是研制相关新药的基础。我们将奉上膜蛋白分析的完整工作流程策略，从合理的基因设计、蛋白质制备到功能研究和蛋白结晶。我们将为您介绍这些步骤的新技术、新方法，以及成功实验的数据。

2011-02-21