几十年来生物学上最重要的进展,也许是关于RNA分子能调节基因表达的发现。RNA 干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象,是在线虫中发现的,在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。此后,科学家们明白,RNAi还有其他形式,它既是一种了解基因功能的强大工具,又是很多生物的基因组所采用的一种在演化上来讲很古老的防卫方法。RNAi肯定有很多新用途,RNAi还可能具有一些仍然有待去发现的天然功能。在本期 ...
诺贝尔奖得主最新发表新方法来自斯坦福大学医学院病理学和遗传学系,约翰霍普金斯医学院生物学系,以及华盛顿Carnegie学院(Carnegie Institution of Washington)等处的研究人员发展了一种能帮助观测体内细胞质中蛋白和蛋白相互作用的分析方法:differential cytolocalization assay(DCLA),这一方法已证实可以检测线虫RNA干扰和无意义介导衰变(nonsense-me ...
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)时,该mRNA发生降解而导致基因表达沉默的现象,这种现象发生在转录后水平,又称为转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)。外源dsRNA 进入细胞后产生的小分子干扰RNA(s ...
RNAi从发现到现在,短短几年时间,已经由一种生理现象发展为生物医学研究的重要手段和具有很大潜力的治疗手段。目前,哺乳动物细胞的RNAi主要依赖于长19~21bp,3‘端悬挂2nt的对称的RNA双链,即短干扰RNA(siRNA)。这里,作者报道了一种长15bp、3’和5‘端分别悬挂3nt的反义核苷酸的非对称的RNA双链,即非对称干扰RNA(aiRNA),可以有效诱导哺乳动物细胞RNAi的发生。研究表明aiRNA诱导的 ...
1. RNA interference-mediated knockdown of DNA methyltransferase 1 leads to promoter demethylation and gene re-expression in human lung and breast cancer cells.Cancer Res. 2004 May 1;64(9):3137-43.PMID: 15126351 2. A plasmid-based system for expressing small interfering RNA libra ...
很好的常用关于RNAi的网站大全,也许对你有用。Comprehensive List of RNAi Publications (updated daily)RNA info on the WebRNA World Websitehttp://www.imb-jena.de/RNA.htmlRNA interference (RNAi) PDF files on the WebThe Knowledge Foundation: RNA in drug developmenthttp://www.knowledg ...
试验整体方案1.Scrambled (Negative) siRNA Control2.Positive siRNA Control3.Multiple siRNAs to a Single Target4.Monitor Both Target mRNA and Protein Levels5.Use the Lowest Possible siRNA Concentration6.Validation Via Array Analysis and Rescue ExperimentsTo better under ...
这个是RNAi对照最权威的文献了,看了以后对对照产品没有疑惑!Whither RNAi? Nature Cell Biology, 5, 489-490 (2003).Whither RNAi?The generally rapid progress of molecular biology methodologies is punctuated on occasion by discoveries that do nothing less than revolutionise the field. Historical exa ...
RNAi原理及演示1 RNAi的机制RNAi的机制可能是细胞内双链RNA在Dicer酶的作用下,可形成-22 bp大小的小干扰RNA(small interfering RNAs,siRNAs),siRNAs可进一步掺入多部分核酸酶(multicomponent nuclease,RISC)并使其激活,从而精确降解与siRNAs序列相同的mRNA,完全抑制了该基因在细胞内的翻译和表达.RNA酶Ⅲ是一种能切割双链RNA的酶,参与RN ...
尽管研究基因组的技术已经相当先进,科学家们还在致力不断的创新和改造技术使之更为强大。现代分子生物学两个划时代的技术——DNA芯片和RNAi (RNA-mediated interference) ,正在掀开生物医药的新篇章。RNAi,通过双链RNA引发目标靶基因沉默的一项强大的新技术,专一性强,可大规模操作,重复性高,应用前景极为广阔。另一方面,DNA芯片技术可以提供特定条件下一个细胞中所有基因表达情况的全景图,同样具有无 ...
找了个公司做RNAi,只做构建载体,转染细胞,找到干扰效果好的片段后,做成腺病毒载体,包装之后给我。公司给了个协议,我改了一下,大家帮忙看看要公司提供的东西够不够全面了,因为这个是论文的一部分,所以必须尽可能详尽,也怕写的不够详细公司偷懒赖账。另外有没有提的要求不合理的,也请大家指出。希望协议既要最大限度的满足我的需要,也要兼顾公平。谢谢呀。第一条 服务内容1.1甲方委托乙方完成COMF-shRNA构建、RNAi筛选、腺 ...
Gene (Ref)Accession #Position from ATGGene Target(Comments)Cell Line Testedß-actin (1) NM_001101972-994aatgaagatcaagatcattgcHuman HeLagamma-actin (1) NM_0016148-30aagagatcgccgcgctggtcaHuman HeLaAIB1 (estrogen receptor coactivator) (22) AAAGAC ...
美国FDA已批准用RNAi进行临床研究。我国要加快进行RNAi临床前研究,需合成单位、研究单位和药厂通力合作,请各位对合成siRNA的成本降低、修饰、靶向给药、体内给药方式和剂量、药代动力学方法等提出宝贵意见。以便联系合作和互相促进、共同提高。附上RNAi临床前研究和临床新进展。4364753@sina.com.cn近据国外医药信息刊物报道,一种全新生物工程药品“RNA干扰剂”(非干扰素)业已浮出水面并有望在3年内上 ...
【共享】英文)RNAi实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程,本实验方法来自于加州大学Jim教授实验的.====请给出来源或连接.Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR) primers that will amplify 600-800 bp of sequence corresponding to the message of interest. Both primers shou ...
RNAi GlossaryDicer - Dicer is a member of the RNase III family of nucleases that specifically cleave double-stranded RNAs. Dicer processes long dsRNA into siRNA of 21-23 nt.Interferon - A small and highly potent molecule that functions in an autocrine and paracrine manner, and that induces cel ...
siRNA的设计要点一、体外合成siRNA的设计:如何设计有效的siRNA一直是当前RNAi研究的热点话题.基因抑制的有效性很大程度取决于目的基因序列的选择。目的序列可以随机选择也可以通过在目的基因的不同区域上测试不同的序列以决定何种序列是最有效的。以下所述几条对于siRNA设计的成功极为重要。1. 从转录本(mRNA)的AUG起始密码开始,寻找“AA”二连序列,并记下其3''端的19个碱基序列,作为潜在的siRNA ...
RNAi,RNA interference,RNA干扰,是被认为最有前途的一种实验方法。下面是简介,然后是资源汇集。1995年,康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA(sense RNA)以期观察到基因表达的增强。但得到的结果是二者都同样地切断了par-1 ...
全球各实验室如何进行RNAi实验?(3)病毒入侵者(Viral Invaders)使用者:南阿拉巴马州立大学微生物学和免疫学教授Sailen Barik项目:敲除编码呼吸融合病毒 (Respiratory Syncytial Virus,RSV) 功能亚基的基因,抑制病毒在小鼠体内繁殖问题:在确保草案全面试实施的同时,用化学修饰法和27mer链拧动以油脂为基础的传递方法:鼻内递送绑定阳离子脂质转染试剂递的siRNAs。Barik说:“对 ...
这个是应用feeding的方法在线虫中应用RNAi,据研究称这是应用于线虫高通量RNAi最佳的方法。不过这个library的价格不知道怎样,不知道国内有没有买到这个library的实验室,如果有不知道分享价格如何?我拟使用该方法进行线虫基因组范围内的RNAi,哪位有这方面的经验能否赐教一二 谢谢。http://www.hgmp.mrc.ac.uk/geneservice/reagents/products/descri ...
1 RNAi实验原理、方法和应用http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1365323&sty=1&tpg=1&age=02 RNAi示意图http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=38&id=1181258&sty=3&keywords=RNAi3 挺不错的RNAi的作用机制 ( FLASH )http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=527666&s ...