DNA基础知识

中文名: 基因X原名: Lewin's Genes X别名: 基因10,Genes X作者: Jocelyn E.KrebsElliott S.GoldsteinStephen T.Kilpatrick图书分类: 科技资源格式: PDF版本: 英文版,扫描版出版社: 高等教育出版社书号: 9787040269611发行时间: 2010年01月01日地区: 大陆语言: 英文打包下载： https://skydrive.live.com/redir?resid=2653E459C864C539!1286 ...

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DNA分子标记、基因组作图及其在植物遗传育种上的应用(2)发布日期：2003-2-16 22:17:00 作者： 出处：中国农网b　SPARs(Single Primer Amplication Reactions)标记　通过采用基于微卫星或简单重复序列(SSR)的单一引物来扩增SSR之间的DNA序列(Gupta等，1994)。在二碱基，三碱基，四碱基和五碱基的简单重复顺序中，以四碱基的简单重复顺序最为有效。这些标记大多数散布于DNA序列中，它们多为 ...

CGH（比较基因组杂交）: CGH用不同的荧光染料分别标记肿瘤基因组DNA（如spectrum-green-dUTP）和正常基因组DNA（如spectrum-red-dUTP），再以相同比例与正常人中期染色体杂交，然后测定沿染色体长轴的两种荧光信号的相对强度比值，通过肿瘤和对照DNA间荧光信号比值的差别找出肿瘤标本中异常DNA区域。正常染色体的绿红比率变化一般在0.85-1.15之间，超过此范围就是异常，若增加的倍数超过 ...

这是在网上看到的，觉得还行，大家看一下1、载体和插入片段DNA的量都要比黏末端连接时的用量多，可以增加到5倍以上。2、载体务必去磷酸化处理(许多公司都有这类酶，比如NEB的CIP(点击进入产品页面)。3、如果是PCR生成插入片段，要用产生平端片段的PCR酶(如PFU)，必须磷酸化5'末端，可以磷酸化引物，也可以磷酸化产物，我一般磷酸化产物，这一步最关键也最容易遗漏(请参考T4PNK(点击进入产品介绍)。普通Taq酶PCR ...

GENE THERAPY: Twenty-First Century MedicineInder M. Verma and Matthew D.WeitzmanLaboratory of Genetics, The Salk Institute, La Jolla, California 92037;email: verma@salk.edu, weitzman@salk.eduKey Words viral vectors, retrovirus/lentivirus, adenovirus, AAV, clinical ...

一、基因芯片：1、基因芯片综合分析软件。ArrayVision 7.0一种功能强大的商业版基因芯片分析软件，不仅可以进行图像分析，还可以进行数据处理，方便protocol的管理功能强大，商业版正式版：6900美元。Arraypro 4.0Media Cybernetics公司的产品，该公司的gelpro, magepro一直以精确成为同类产品中的佼佼者，相信arraypro也不会差。phoretix™ Array Nonlinear Dyn ...

电转化 请教电转化 求助！电转化！！！！！！ 求助！电转化！！！！ 电转化！求助！ ［求助］关于电转化 关于电转化 请教 电转化TG1菌转化效率 急！ 球面对称设计在大肠杆菌JM109电穿孔转化优化试验中的应用 提取的质粒进行电转化的过程中怎样防止污染？？ 电转化,谁来帮我一下,现焦头烂额 求助：电转化仪器使用和实验步骤 枯草芽孢杆菌的电转化没有转化子，请指教！ 请问大肠杆菌能否用电转仪转化载体 SOS！电击转化老是失败！ 请问有没有师兄师姐做过电转化化学转化 请教：关于连接转化 关于连接转化的问题 ...

骨髓细胞染色体标本的制备一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者，特别是慢性或急性粒细胞性白血病，因为骨髓反映粒系统细胞增生情况，这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病，也不主张用外周血，因为加PHA刺激外周血培养，只能获得正常淋巴细胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞，培养可分短期培养和直接制片法，无论哪种其培养液中均不需加PHA。二、用品和试剂同外周血染色体制 ...

这段时间在作实验,这篇文章我觉得特别好,现在拿出来和大家分享一下!从质粒抽提谈起碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。每个曾经用碱法抽提过质粒朋友，希望你看本文后能有所收获。 为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。 让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先 ...

Humana press是全球最知名的生物期刊和书籍出版商之一，现已成为springer出版集团的成员。Methods in molecular biology和Methods in molecular medicine系列是Humana press出版的最经典的书籍。Methods in molecular biology主要内容为各种实验指南，内容新颖全面。下载连接：Vol 1 Proteinshttp://rapidshare.com/files/378 ...

一、 GFP背景概述绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）最早由Osamu Shimomura于1962年在水母（Aequorea victoria）（图2a）中发现。这种蛋白质在蓝色波长范围的光照激发下发出绿色荧光，其发光过程需要冷光蛋白质Aequorin的帮助，而且，这个冷光蛋白质可与钙离子（Ca2+）相互作用（图3）。在Aequorea victoria中发现的野生型绿色荧光蛋白的分子量较小，仅为27 ...

这段时间做斑点杂交,因为每次做都拿着英文的翻实在太麻烦,也容易出错.为了实验方便将DIG标记检测试剂盒的说明书翻译了一份,与大家共享,如有错误,敬请指正!DNA-DIG标记：1、每个标记反应中加入10ng-3ug DNA，另加ddH2O补充至15ul体积。（未标记的对照DNA加5ul，10ul ddH2O）2、将装有反应物的离心管放入沸水中变性10min，然后迅速冷却；3、然后依次加入以下溶液：Hexanucleotide Mix, ...

我以前做的实验都是通过感受态的转化方法来转化枯草芽孢杆菌的。但是枯草芽孢杆菌的感受态转化效率比较低。最近我采用电转化的方法，但是遇到了一个问题：就是每次电击完毕后，加入复苏缓冲液37度复苏2h后，发现原来还混混的转化液竟然变得澄清了！涂布后一个转化子都没有！不知道是怎么回事？还有：垂悬菌体必须要温柔吗？我挺用力的，但不至于一个转化子都没有吧？质粒样品里面的RNA很多有没有影响啊？我的质粒RNA蛮多的。质粒加多了 ...

题录集：静脉大容量快速注射siRNA或质粒有些老师曾经认为通过小鼠尾静脉注射200微升质粒液体都很困难。而现在，小鼠尾静脉注射1.3毫升的siRNA或质粒已经快成了在整体动物水平快速鉴定某个基因功能的标准手段。这种大容量快速注射还可以用于兔子、狗等大型动物。除了尾静脉是可以输入核酸的路径之外，还可以通过门静脉、肾静脉、下肢静脉等进行局部灌注。所以，以前用于反义核酸(ODN)的一些体内delivery手段，还可以 ...

【公告】丁香园网站捐款计划书转自：http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=21&id=193347&sty=1&tpg=1&age=0一、丁香园网站现况简介及远景规划丁香园网站始建于2000年7月，现在使用的域名为http://www.dxy.cn，目前主要致力于医学、药学、生命科学等专业信息服务，探讨相关专业知识，提供互联网优秀资源等。丁香园网站经过近三年的发展，目前已经储备了大量优秀专业人才资源 ...

核蛋白提取：（1）5 millions个离心收集（2）弃上清，细胞沉淀重悬于1.5ml冰预冷的PBS缓冲液，4℃下2000 rpm离心5min。（3）弃上清，沉淀重悬于500μl冰预冷的Buffer A离心收集，再悬于0.5 ml Buffer A。（4）冰上放置10分钟，加入NP40使终浓度为0.5%，混匀后，轻摇20秒。（5）4℃下1330×g离心15分钟得到细胞核。（6）重悬于50µl Buffer B，于冰上强烈振荡15分钟，4℃下16300×g离心10 ...

刚进实验室学技术 ，看到复旦大学某教授写的有关质粒的好文，贴在这里与大家共享（最后的问题也希望各位能解答一下：）：从质粒抽提谈起碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技 术。可以我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生 却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实 验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的 ...

（一）外源ＤＮＡ和质粒载体的连接反应　　外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有２个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的５'磷酸和３'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的ＤＮＡ连接酶催化，这两 ...

蛋白标签（protein tag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。一、 新型蛋白标签蛋白标签应用极为广泛，但仍有两个问题不容忽视：（1）蛋白标签以DNA形式编码，它需要转录并翻译成蛋白后才能发挥作用，而这种作用方式本身就是一种缺陷。例如，常用的荧光蛋白标签，在显微镜下观察时，其显 ...