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叶绿体的制备及其对染料的还原

实验原理 细胞或组织和分离介质混匀,经破碎匀浆后用差速离心法,经几次不同转速可以获得不同的细胞器。离体的完整具有光合活性的叶绿体的制备就是采用这种方法。被分离的离替叶绿体是否具有光合活性,可以用不同的方法来鉴定,对染料(2-6—二氯酚酊粪)在光下还原作用是其中的一个方法。 光e- ...

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Indirect flow cytometry (FACS) protocol

实验步骤 1. Harvest and wash the cells then determine the total cell number.Cells are usually stained in polystyrene round bottom 12 x 75 mm 2 Falcon tubes. However they can be stained in any container f ...

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烟粉虱寄生蜂寄主竞争实验

实验设备 温室养虫笼(40 cm × 50 cm × 60 cm)体视解剖镜(Motic 140) 昆虫针塑料培养皿(直径815 cm)数码相机医用注射器 实验材料 1. 供试植物:盆栽西红柿 2. 供试昆虫:B型烟粉虱,丽蚜小蜂,浅黄恩蚜小蜂 实验步骤 1. 供试昆虫的培养 (1) 烟粉虱经室内分子检测确认为B 型,室内用西红柿饲养,将西红柿苗(25 cm 高) 接 ...

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Isolation of Total RNA from Animal Cells use RNeasy Mini Kit

实验试剂 SDS based extraction solution 实验步骤 1. Harvest cells.1) Trypsinize and collect cells aspirate medium and wash cells with PBS twice. 2) Determine the number of cells.3) Transfer c ...

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基因表达快速分析新技术

实验原理 MPSS技术是利用限制性内切酶和荧光检测知识发展出的一种辨认和测定细胞每一个cDNA 克隆片段末端16~20bp序列的方法从而查明细胞内所有基因的表达情况。MPSS 分析系统大体可划分为三大部分如图1 所示:微球体阵列槽、反应液供排系统和荧光信号处理系统。其中微球体阵列槽主要功能是微球体从槽的一端进入在槽内紧密排列形成微球体阵列;反应液供排系统主要功能是在连接、酶切、洗脱等过程中自动供 ...

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细胞共定位

实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra),限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI),金粉,无水乙醇,2.5MCaCl2,20ul 0.1M亚精胺 实验设备 PCR扩增仪,PDS-1000/He型基因枪,激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 ) 实验材料 洋葱 实验步骤 1. 载体的构建pA7- CFP- AtCOP1, ...

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AbC Anti-Rat/Hamster Bead Kit

实验试剂 The AbC™ RH capture beads and negative beads have a diameter of approximately 6 μm (actual size for each lot is listed on the component vial). The bead suspensions are supplied in dropper vi ...

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转基因小鼠制备实验方法

实验步骤 1. 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。 2. 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。 3. 第二天上午9:00前观察供体、受体,有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。 4. 10:30左右,断颈处死供 ...

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Transformation of HB-101 Competent Cells

实验步骤 1.Thaw tubes of competent cells on ice occasionally inverting gently to mix.2.Pre-cool Falcon 2059 tubes on ice.3.Aliquot 30 ul cells into each tube.4.Add up to 10 ul DNA in TE or ligation b ...

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SILANE Genomic DNA

实验原理 The Dynabeads SILANE genomic DNA kit provides an excellent tool for isolation of genomic DNA from human blood following a simple separation protocol. A buffer is first added to the sample for ly ...

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人体外周血淋巴细胞培养及染色体制片

实验原理 人体的1ml 外周血中一般含有约1-3×106个小淋巴细胞,通常它们都处于间期的GO和G1期。在培养条件下给予药物刺激时,经过53-72小时可在培养物中获得大量的有丝分裂细胞,供染色体标本制备和分析之用。这种外周血培养方法是在1960年由Moorhead等所建立的。人体外周血的形成包括红细胞、白细胞、血小板,其中红细胞和血小板不能离体培养。血细胞中的小淋巴细胞处于间期的GO和G1期。 ...

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Dynabeads® mRNA DIRECT Kit

实验原理 The isolation protocol relies on base pairing between the polyA residues at the 3’ end of most mRNA and the oligo (dT)25 residues covalently coupled to the surface of the Dynabeads® . Other RNA ...

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逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)

实验试剂 1.RNA提取试剂2.第一链cDNA合成试剂盒3.dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM4.Taq DNA聚合酶 实验步骤 1. 总RNA的提取:见相关内容。2. cDNA第一链的合成:目前试剂公司有多种cDNA第一链试剂盒出售,其原理基本相同,但操作步骤不一。现以GIBICOL公司提供的SuperScriptTM Preamplificat ...

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Growing Cells in Geltrex Reduced Growth Factor Basement Membrane Matrix

实验步骤 There are many applications for Basement Membrane Matrix which require different thicknesses and concentrations. In general a protein concentration 9 mg/ml is used for differentiation studies o ...

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DNA Probe Purification Protocol

实验试剂 Materials Supplied By User1. Microcentrifuge capable of at least 10000 x g.2. Sterile 1.5 mL centrifuge tubes.3. Sterile deionized water (or TE buffer)4. Absolute (or 95%) ethanol 5. Protective ...

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Organotypic Collagen I Assay: A Malleable Platform to Assess Cell Behaviour in a 3-Dimensional Context

实验材料 NameCompanyCatalog NumberComments10x MEMGibco21430-NaOHSigma367176-500GPrepare 0.22 M stock in waterFCSPAA LaboratoriesA15-101-35 mm dishesFalcon353001For step 3.460 mm dishesFalcon353004For st ...

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Isolation of CD34+ Cells from Mononuclear Cells (MNCs) from Human Bone Marrow, Peripheral Blood or Cord Blood

实验试剂 MagnetMixer allowing both tilting and rotationBuffer: PBS (without Ca2 and Mg2 ) w/0.1% BSA and anticoagulant pH 7.4DNase I (when required)Culture Medium: e.g. RPMI 1640 with 2% Fetal Calf Seru ...

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黑豆蚜胞内共生菌对日本柄瘤蚜茧蜂发育和繁殖的影响

实验材料 黑豆蚜用蚕豆苗饲养,日本柄瘤蚜茧蜂的日常饲养是在蚜虫2-3龄时接蜂,接蜂时间24小时。温度23-25℃,光周期16:8。 实验步骤 1. 蚜虫共生菌的脱除日常饲养的黑豆蚜是有共生细菌的蚜虫,称之为“共生蚜虫”,其胞内共生细菌的脱除采用饲喂抗生素利福平的方法。经利福平处理后,脱去共生细菌的蚜虫称为“脱共生蚜虫”。2. 蚜茧蜂在共生和脱共生蚜虫体内生长发育和繁殖的观察共生和脱共生 ...

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Fungal Midi DNA Kit Protocol for Fresh/Frozen Specimens

实验试剂 1. Equilibrate sterile dH2O water or DNA Elution Buffer at 65°C.2. Isopropyl alcohol (isopropanol)3. Absolute (96%-100%) ethanol 4. RNase A stock solution at 20 mg/mL 实验设备 1. Centrifuge cap ...

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Dynabeads® CD3CD28 CTS

实验原理 Dynabeads® CD3⁄CD28 CTS™ offer a simple method for isolation activation and expansion of human T cells. Firstly CD3 T cells are separated and concentrated from the apheresis product by ma ...

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