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        黑豆蚜胞内共生菌对日本柄瘤蚜茧蜂发育和繁殖的影响

        互联网

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        实验材料

         

        黑豆蚜用蚕豆苗饲养,日本柄瘤蚜茧蜂的日常饲养是在蚜虫2-3龄时接蜂,接蜂时间24小时。温度23-25℃,光周期16:8。

        实验步骤

         

        1. 蚜虫共生菌的脱除

        日常饲养的黑豆蚜是有共生细菌的蚜虫,称之为“共生蚜虫”,其胞内共生细菌的脱除采用饲喂抗生素利福平的方法。经利福平处理后,脱去共生细菌的蚜虫称为“脱共生蚜虫”。

        2. 蚜茧蜂在共生和脱共生蚜虫体内生长发育和繁殖的观察

        共生和脱共生黑豆蚜,在发育到2龄时分别接入日本柄瘤蚜茧蜂,接蜂时间为6h。将寄生蜂移去48h后,每隔24h随机取出30头被寄生的蚜虫进行解剖,并测量蚜茧蜂幼虫的体长,以检测寄生蜂在共生和脱共生寄主蚜虫体内的生长和发育情况。待僵蚜形成后,把僵蚜从叶子上剥下后分别存放于玻璃瓶中,每隔12h进行抽样解剖,观察蚜茧蜂的发育。当寄生蜂羽化时,称量羽化时成蜂的体重,并统计成蜂羽化率。

        将刚羽化的蚜茧蜂放入备有足量2龄若蚜的产卵笼内,同时供以30%的蜂蜜水,每隔24小时换一次蚜虫,直到蚜茧蜂死亡,记录死亡时间,计算蚜茧蜂的寿命。每次换笼48小时后解剖处理蚜虫,以寄生蜂的初孵幼虫数计算成蜂的产卵量。

        3. 共生和脱共生蚜虫被寄生后总蛋白和游离氨基酸的测定

        蚜茧蜂产卵96h后,被寄生的蚜虫已有显著的外部特征,这时,挑取被寄生的蚜虫,称重后提取总蛋白,提取使用Wilkinson (2001)的方法。蚜虫组织中总蛋白含量的测定按Bradford (1976)的方法进行。

        蚜虫组织中游离氨基酸的提取见Douglas (1996)的方法;游离氨基酸测定用日立835-50型氨基酸自动分析仪。

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