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酵母双杂交系统研究及其应用

白玉杰综述 药立波审校 (第四军医大学生物化学及分子生物学教研室, 西安710032)   蛋白质是生命功能的物质基础, 体内包括复制、转录、分泌、信号转导、代谢等多种生命活动都依赖于蛋白-蛋白、蛋白-核酸间的相互作用, 对生命活动过程中蛋白质作用的研究有助于揭示生命过程的许多本质问题。但由于蛋白质与其他生物大分子间作用依赖于细胞内环境, 作用时间及作用力差异极大, 因而传统生化方法受到较大限制, ...

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Flow cytometry of yeast cells stained with PI

Short Coursefill flow buffer tank empty waste turn on FACSCalibu turn on computer double click on "Bob"s FL3h" file on desktop (an error message will come up - hit "OK") under the Aquire menu: designa ...

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酵母RNA的水解及其组成成分的鉴定

【目的和要求】1. 了解从酵母中提取 RNA 的原理和方法。2. 了解定性鉴定核酸的原理和方法。【实验原理】酵母含RNA 达2.67—10.0%,DNA 则少于0.03—0.516%。为此,提取RNA多以酵母为原料。 稀碱法使用稀碱(本实验用0.2% NaOH溶液)使酵母裂解,然后用酸中和 除去蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀 RNA 。由此得到的 RNA为变性的RNA,可用作制备核苷酸的原料。用 ...

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Arresting Yeast Cells

Alpha factor Arrest:Make a 10-3 M stock of alpha factor in 0.1 N HCl For BAR strains this is a 333X stock (final 3 X 10-6 M) For bar- strains this is a 66600X stock (final 1.5 X 10-8 M) To release cel ...

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Arabidopsis transformation by floral dipping(拟南芥转化)

Step 1. 4-5 days before floral dipping Steak the Agrobacterium clone you want to use for plant transformation onto an LB plate containing selective antibiotics (in our case: Kanamycin 20 mg/l Genta ...

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酵母快速转化(Quick Yeast Transformation)

When just a few transformants are sufficient such as the transformation of a test plasmid or a GAL4BD fusion plasmid the following protocol can be used. This procedure is very flexible and can be appl ...

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Pichia酵母表达直接PCR鉴定重组子的方法

模板的处理: 1.平板上的菌落长到肉眼可见时(约12小时); 2.将除了模板之外的其它PCR反应液的组分准备好,并分装。引物最好使用Kit中已有的检测专用的引物,或者一条使用载体上的引物,一条使用基因的特异性引物(这样做可以鉴定非定向克隆的方向); 3.用半根灭菌的牙签(节约,而且好用)挑取菌落,在PCR管中涮以下,放入一个灭菌的1.5毫升离心管,对PCR管和1.5毫升离心管编号; 4.PCR扩增 ...

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How to transform Arabidopsis(拟南芥)

Arabidopsis can be stably transformed using Agrobacterium tumefaciens-mediated transfer of T-DNA. A breakthrough in Arabidopsis research was the invention of the vacuum-infiltration procedure a simple ...

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用ReadyMixTM PCR Reaction Mix进行拟南芥SSLP

用ReadyMixTM PCR Reaction Mix进行拟南芥SSLP(32个样品+3个对照)一、PCR采用SIGMA REDTaq® ReadyMixTM PCR Reaction Mix提供的试剂(包括20 mM Tris-HCl pH 8.3 100 mM KCl 3 mM MgCl2 0.002% gelatin 0.4 M dNTP mix (dATP dCTP dGTP dTTP) ...

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与拟南芥图位克隆相关的3篇重要文献

1、Bell CJ Ecker JR. Assignment of 30 microsatellite loci to the linkage map of Arabidopsis. Genomics 1994 Jan 1;19(1):137-44Assignment of 30 microsatellite loci to the linkage map of ArabidopsisThirty ...

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Yeast Gene knockouts using Oligo/PCR

Yeast Gene KO using Oligo/PCRUniversal primers for gene knock-out using dominant drug markers: Kan Clonat and Hygromisin-B. Forward primer: 5’ TCAGGGGCATGATGTGACT 3’Reverse primer: 5’ AGCTCGTTTTCGACAC ...

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非洲爪蟾 African clawed toad

科名:负子蟾科   中文名:非洲爪蟾   学名:Xenopus laevis 属名:Xenopus   食 性:由于没有舌头只能利用其前肢搅食水中的无脊椎动物。   分 布:由南非的热带草原起,北至肯尼亚,乌干达西至喀麦隆。   形态特征:体长100mm。雄性会比雌性小一截,后肢具有3对角质脚爪。   生活习性:为完全水生种,广栖于淡水水域中,尤其喜好静止水域的环境。白天多潜藏于水底深处,夜晚则会 ...

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拟南芥定位克隆中的几个问题

在过去十多年里,拟南芥(Arabidopsis thaliana)遗传学在植物生物化学、生理学、病理学和发育生物学研究中发挥着越来越重要的作用。许多研究者想知道某种性状是由那个基因改变产生的。如果突变是由T-DNA或转座子插入引起,插入序列会提供一个直接指向基因的标签。但是绝大多数遗传变异不属于这种情形。由于多种原因,化学诱变剂和辐射广泛用于诱导突变,以EMS为例,它比其他诱变剂更简单易行、效率更 ...

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酵母细胞转化表面物理化学研究

★ PEG is a minimal requirement for the binding of DNA to yeast cell surfaces ★ Li+ only has an effect on yeast cell wall instead of the cell membrane Effect of PEG and Li+ on yeast transformationBindi ...

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酵母:一种模式生物

刘擎, 余龙( 复旦大学遗传学研究所,上海)关键词:酵母;模式生物;基因组1996年4月,在国际互联网的公共数据库中公布了酿酒酵母(以下简称酵母)的完整基因组顺序,它被称为遗传学上的里程碑。因为首先,这是人们第一次获得真核生物基因组的完整核苷酸序列;其次,这是人们第一次获得一种易于操作的实验生物系统的完整基因组。酵母是一种较好的模式生物,通过对其基因组的深入研究将有助于人们了解高等真核生物基因组的 ...

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模式生物与发育生物学——童话般的科学故事

螟蛉有子,蜾蠃负之——《诗经·小雅·小宛》  七月在野,八月在户,九月在宇,十月蟋蟀,入我床下——《诗经·豳风·七月》 今夜偏知春气暖,虫声新透绿窗纱——刘方平(唐)《春夜》    有这样一些生命,亿万年来,它们或栖身于朽木败叶之下,或飞舞于山花野果丛中,或在山溪浅水中徜徉,或在大海惊涛下蜷缩,或在荒野上荣枯,或在污秽中滋生。它们的家族,从未在生命进化激流中独领风骚,而是随着进化车轮的远去,在草际 ...

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拟南芥——一把打开植物生命奥秘大门的钥匙

张振桢12,许煜泉2,黄 海undefined(1 中国科学院上海生命科学研究院上海植物生理生态研究所,上海 200032;2 上海交通大学生命科学技术学院,上海200030)摘 要:在过去的20 年中,拟南芥作为模式植物广泛用于植物生命科学研究。历时10 年的模式植物拟南芥的全基因组测序工作于2000 年完成,通过测序获得的拟南芥基因组核苷酸序列全部公布在互联网上,有力地推动了植物生命科学研究向前发展。科学家 ...

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利用爪蟾卵母细胞建立人类低密度脂蛋白受体基因表达系统

沃兴德1 范春雷1 罗艳2 钱颖1 卢德赵1 唐利华1(1. 浙江中医学院生命科学系 浙江省杭州市310053 ; 2. 杭州师范学院生物化学教研室 浙江省杭州市310008)  细胞生物学;  低密度脂蛋白受体基因表达系统;  细胞核显微注射;  爪蟾卵母细胞;  低密度脂蛋白;  动脉粥样硬化;  质粒构建  目的 在爪蟾卵母细胞中建立人类低密度脂蛋白受体基因的表达系统此系统可被用于 ...

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A Guide to Yeast Two-Hybrid Experiments(酵母双杂交实验指南)

Russell L. Finley Jr.undefined1Center for Molecular Medicine and Genetics and Department of Biochemistry and Molecular Biology Wayne State UniversitySchool of Medicine Detroit MI 48201 USundefinedCorrespondence: rf ...

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定量分析拟南芥根系生长

生长的植物根系很容易测量,尤其在拟南芥中,因为增加的器官大小基本上限于一定范围。精确测量根尖生长,可用于在突变体生长过程中、转基因背景、或是实验处理响应方面,来确定生长活性(在某一特定时间的增长速度)。根系生长衡量方法有多种方式,最简单的就是将种子种在培养皿中,实时记录根尖生长,用直尺测量根系长度,然后将数据后输入Microsoft Excel分析,但这种方法在处理大量的幼苗时是繁琐,不正确的。另 ...

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