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混合淋巴细胞培养(3H-TdR掺入法)

实验原理 混合淋巴细胞培养或称混合淋巴细胞反应(MLR)是将二个无关个体的淋巴细胞混合在一起培养,由于二者的淋巴细胞膜上的组织相容性抗原不同,可互相刺激,导致对方的淋巴细胞分裂增殖和转化。转化的淋巴母细胞表现为细胞体积增大,核内DNA和胞浆内RNA合成增加等。可通过形态学方法计数转化的淋巴细胞百分数,也可通过测定激活的淋巴细胞摄取DNA合成的前体-3H标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入量的多 ...

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3'-RACE PCR

实验试剂 Sterile water (high purity RNase-free) 5 x SuperScript RTase buffer (Life Technologies) 100mM DTT 2.5mM dNTPs RNase inhibitor (Pharmacia) SuperScript RTase (Life Technolo ...

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Mag-Bind Blood DNA Maximum Yield Protocol (2ml-6ml)

实验试剂 1. Absolute ethanol (96%-100%) 实验设备 1. Nuclease-free 50 ml centrifuge tube2. Water bath incubator or heating block preset at 65°C 3. Magnetic separation device for 50 ml tube 实验步骤 1. ...

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Isolation of Untouched Human CD8+ T Cells from Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMC)

实验原理 A mixture of biotinylated monoclonal antibodies against the non-CD8 T cells is added to the starting sample and allowed to bind to the cells. Depletion MyOne™ SA Dynabeads® are added and will b ...

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SequalPrep Long PCR Kit with dNTPs

实验步骤 1. Program the thermal cycler as follows (note that the annealing temperature will vary depending on the Tm of your primers):94°C 2 minutes 10 cycles of: ...

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间接炭凝集试验

实验原理 该血清反应是以炭粉颗粒为载体,将已知的马副伤寒性流产血清吸附在该载体表面上,形成抗体炭粉结合物,即为诊断马副伤寒性流产用的炭粉致敏血清。炭粉致敏血清与相应抗原相遇时,在电解质的参与下,二者发生特异结合,便形成肉眼可见的炭微粒凝集块,液体变得清朗,即为阳性反应。如果二者不结合,炭粉则堆积于液滴中央,成为一个摇而不散的黑炭团,即为阴性反应。 实验试剂 1. 炭粉:炭粉的粒度最好在 ...

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银染核仁形成区的光镜和电镜标本制备及观察

实验原理 在细胞分裂中期核型中,人的端着丝粒染色体短臂区和在间期细胞核的核仁中有与银离子特异亲合物质,通过银染可以显示它们的致量,因此一直被人们所关注。近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位,称核仁形成区(Nucleolar organizer region,NOR),但银染的物质不是 rDNA 和 rRNA,而是与活性的 rDNA转录有关 ...

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Stripping for reprobing western blots

实验试剂 1. Buffer 1 liter15 g glycine1 g SDS10 ml Tween 20Adjust pH to 2.2 Bring volume up to 1 L with ultrapure water. 2. Buffer 0.1 litre20 ml SDS 10%12.5 ml Tris HCl pH 6.8 0.5 M67.5 ml ultra pure ...

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大鼠血清、血浆及相关液体样本中尿微量白蛋白(ALB)含量的检测

实验试剂 1. 大鼠尿微量白蛋白(ALB)定量检测试剂盒(ELISA)2. 蒸馏水 实验设备 1. 37℃恒温箱2. 标准规格酶标仪3. 精密移液器及一次性吸头4. 一次性试管5. 吸水纸 实验步骤 1. 准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2. 配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3. 加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上, ...

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Anti-DYKDDDDK tag (L5) Affinity Gel

实验试剂 Column equilibration buffer:1xPBS/0.5M NaClHigh salt wash buffer:50mM Tris 8.0/2M NaClElution buffer:200mM Glycine/150mM NaCl PH2.2Neutralization buffer:2M Tris PH8.0Bacteria breakage buffer ...

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质粒DNA的大量制备

实验试剂 1. STE 0.1mol/L NaCl 10mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 1mmol/L EDTA(pH8.0) 2. 溶液I 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/L EDTA(pH8.0) 溶液I可成批配制,在6.895x104Pa高压下蒸气灭菌15分钟,贮存于4℃。 3. 溶菌酶溶液10mg/ml,溶于10mmol ...

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SQ Blood Mini Protocol for 50ul Clotted Blood

实验试剂 Regents to be supplied by user1. Proteinase K (20mg/ml)2. Isopropanol 3. 70% ethanol 实验设备 Equipments to be supplied by user1. Microcentrifuge capable of 14000 x g2. Nuclease-free 1.5 ml mic ...

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RNA Purification Protocol for 1-2 x 107 cultured cells

实验原理 E.Z.N.A.® SQ Tissue RNA uses a highly efficient solution based system to provide a convenient fast reliable and non-toxic method to isolate high quality RNA from various samples. Samples are fir ...

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Preparing and Running a Protein Gel (7% Polyacrylamide)

实验步骤 1.Preparation of Running Gel Solution1) Add to a 50 ml cylinder:DD-H2O 26 ml30% acrylamide stock (37.5:1 Acryl/Bis) 10.5 ml2M Tris 8.8 8.4 ml20% SDS 0.23 ml2) Cover with a piece of Parafilm and ...

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Inducible shRNA Lentiviral Vectors

实验原理 A large selection of BLOCK-iT™ RNAi products is available from Invitrogen to facilitate RNAi analysis in mammalian and invertebrate systems. The BLOCK-iT™ Inducible H1 RNAi Entry Vector Kit supp ...

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唾液淀粉酶活性观察实验的原理及方法

实验原理 酶是指化学本质为蛋白质的生物催化剂。在一定条件下,酶促化学反应进行的能力即称为酶活性(酶活力)。影响酶活性的因素是多方面的,如温度、PH及某些化学物质等都会影响酶的催化活性。在一定条件下,能使酶活性达到最高时的温度即酶的最适温度,而能使酶活性达到最高时的PH即酶的最适PH。例如,唾液淀粉酶的最适温度是37℃,而其最适PH是6.8。能增高酶活性的物质称为酶的激活剂,能降低酶活性却又不使酶 ...

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Porcine brain tubulin preparation

实验试剂 100g P-11 cellulose phosphate fibrous cation exchanger (Whatman Inc Clifton NJ) 6L 0.1M HCl6L 0.1 M NaOH2L 0.1 M MgSO42L 10x Column Buffer~10 L 1x column buffer 10 M NaOH300 ml Homogenization bu ...

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力强对大鼠牙周组织中PGE2蛋白表达变化的影响

实验步骤 1. 动物模型 选用80只250g±20成年雄性Wistar大鼠,随机等量地分为实验组和对照组(正常力)。实验组拔除左侧上颌(B区)所有磨牙。这样,实验组动物的D区磨牙因丧失对颌牙导致力丧失,而C区磨牙功能代偿性增强则构成力增强的动物模型。两组动物分别在实验后6小时、1天、2天、3天、1周、2周、3周和4周各处死5只,共16组。 2. 组织标本制备 实验动物采用4%多聚甲醛心内灌注的方 ...

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同位素法测定底物磷酸化活性方法

实验试剂 1. Recombinant kinase (II) 2. PATP analog (I II) 3. Sepharose CL-6B beads (I) 4. Lipofectamine (I) 5. Agonist (I) e.g. epidermal growth factor serum platelet-derived growth factor 6. FLAG ...

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Extraction of DNA using DNAzol® Reagent

实验试剂 1. 100% ethanol2.75% ethanol 3. 8 N NaOH 实验步骤 Instructions for Use1. Lysis/Homogenization 1 ml DNAzol® Reagent 25-50 mg tissue 1 - 3x107 cells 0.1 ml liquid sample2. Centrifugatio ...

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