实验试剂 金霉素(Chlortetracycline HCl),BIB分装;氯霉素(Chloraomycetin),Amresco分装;盐酸土霉素(Oxytetracycline HCl),BIB分装;青霉素G钾盐(Penicillin-GK Salt),BIB分装;硫酸链霉素(Streptomycin sulfate ),BIB分装。以上抗生素均为化学纯研究专用抗生素。 实验材料 ...
实验试剂 1. 蛋白酶K2. 三羟甲基氨基甲烷(Tris)3. Taq DNA聚合酶及dNTP4. 琼脂糖及溴化乙锭(EB)5. 乙二胺四乙酸钠(Na2EDTA)6. 电泳缓冲液TBE:浓贮存液5×TBE:54.0 g Tris碱,57.1 g硼酸,20 ml 0.5 M EDTA,pH=8.0,加蒸馏水定容至1 L,工作液为稀释的0.5×TBE7. 裂解液成分:50 mM KCl,10 mM ...
实验步骤 1.心房扑动和颤动性心律失常选用狗、猫等动物,麻醉后开胸,暴露心脏,在人工呼吸下进行实验。可用高频率电直接刺激心房壁,使每次刺激落心房肌复极时R或S波间隔;乌头硷溶液涂抹心房外面局部;挤压动物上下腔静脉间的部位,同时给予电刺激;窦房结动脉内注入乙酰胆硷或甲状腺素制剂。或采用动物整体闭胸条件下,阻塞呼吸道或吸入低氧气体。也可采用离体心房组织块作实验,将含有窦房结的哺乳动物的离体心房组织块 ...
实验步骤 标记目标红细胞:根据选择的DNA染料选择对目标红细胞的荧光标记,这本身就取决于流式细胞仪在入侵检测分析结束时获得的数据,CFDA SE的荧光发射峰约为517nm,接近520nm处SYBR Green I的荧光。CFDASE可以与Hoechst 33342组合使用,DDAO SE 的荧光发射峰接近657nm。因此,它可以与Hoechst 33342或SYBR Green I组合使用。1. ...
实验原理 1.TaqDNA聚合酶在早期进行的PCR反应中,使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段,即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性,DNA合成反应只能在37°C进行。PCR时每一循环的解链温度都在90°C以上进行,故在每两个循环之间要加入新的DNA聚合酶,使得整过程整个实验过程很繁琐和昂贵。同时在37°C,引物与DNA模板之间会发生分子非 ...
实验原理 凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不需要经体外培养和无菌操作,易于推广。所以,骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。 ...
实验原理 If using the E.Z.N.A.™ Mag-Bind® Viral DNA/RNA Kit for the first time please read this booklet to become familiar with the procedure and its various modification. Samples are lysed in a speciall ...
实验试剂 LB培养基,5%蔗糖溶液,0.02% Silwet L-77,含0.8%琼脂的1/2 MS (Hygromycin)固体培养基,30uMDex,50uM雌激素 实验设备 人工气候室,4℃冰箱,22℃光照培养箱 实验材料 农杆菌,植物 实验步骤 1. 植物培养植物生长环境为20-23℃,14小时光照、10小时黑暗的人工气候室。取5-6周大的植物进行各种实验。 ...
实验原理 H2O2在240nm波长下有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。 实验试剂 0.2mol/L pH7.8磷酸缓冲液(内含1%聚乙烯吡咯烷酮);0.1mol/L H2O2(用0.1mol/L高锰酸钾标定)。 实验设备 紫外分光光度计;离心机;研钵;250ml容量瓶1个;0. ...
实验原理 If using the E.Z.N.A.™ Mag-Bind® Viral DNA/RNA Kit for the first time please read this booklet to become familiar with the procedure and its various modification. Samples are lysed in a speciall ...
实验步骤 1. 大肠杆菌质粒DNA的提取碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下: 1) 接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。 2) 37℃振荡培养过夜。 3) 取1.5ml菌体于Ep管,以4000rpm离心3min,弃上清液。 4) 加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/L EDTA pH8. ...
实验原理 ELISPOT has due to its high sensitivity and simplicity proven valuable for assessing antigen-specific T-cell responses both with regard to specificity and magnitude. One limitation of the regul ...
实验试剂 NaCl溶液(100mg/ml)。 实验设备 电导仪、天平、温箱、真空干燥器、抽气机、恒温水浴锅、注射器。 实验材料 小麦、韭菜叶片 实验步骤 1. 制作标准曲线:如需定量测定透性变化,可用纯NaCl配成0、10、20、40、60、80、100μg/ml的标准液,在20~25℃恒温下用电导仪测定,可读出电导度。2. 选取小麦或其他植物在一定部位上生长 ...
实验原理 叶绿体是植物进行光合作用的细胞器,分布在叶肉细胞内(组成气孔的保卫细胞也含有叶绿体)。叶绿体是由被膜、间质和类囊体三部分组成。依据分离所得叶绿体的结构完整程度,大致将叶绿体分成两类:一类为被膜已破碎的叶绿体,称之为破碎叶绿体,它具有光合电子传递、光合放氧和光合磷酸化的功能;另一类为被膜完整的叶绿体,它具有同化二氧化碳的完全的光合作用功能。分离和制备有活性的离题叶绿体是研究叶绿体的结构功 ...
实验原理 The E.Z.N.A. Total RNA Midiprep Kits use the reversible binding properties of HiBind® matrix a new silica-based material. This is combined with the speed of mini-column spin technology. A specif ...
实验原理 外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA连接。DNA连接酶有两种:T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法,为了防止载体本身的自连,可以通过(牛小肠碱性磷酸酶)CIP处理克服。连接 ...
实验原理 Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白,可以与早期凋亡细胞的胞膜结合,而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发生凋亡时,磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变,因此,与DNA碎片检测比较,使用Ann ...
实验步骤 1. 交联和细胞收集1) 取 2 个 150 cm2培养皿的融合细胞(每皿细胞数约 1 X 107 - 5 X 107 个)。向培养基中滴加甲醛以使蛋白和 DNA 相交联,甲醛的终浓度为 0.75%(体积百分比),室温下轻轻摇动 10 分钟。2) 加入甘氨酸至终浓度为 125 mM,轻轻振荡孵育 5 分钟。3) 用 10 ml 冷 PBS 洗涤细胞 2 次。4) 用 ...
实验试剂 1. 福尔马林液:用于固定和保存标本。2. 0.5~0.8%氢氧化钠溶液:用于腐蚀标本上的残存肌肉。3. 汽油:用于脱掉标本上的脂肪。4. 3%过氧化氢:用于漂白标本。 实验设备 1. 解剖盘、标本瓶、注射器:用于盛放标本和向标本注射固定液。2. 解剖刀、解剖剪、镊子:用于剔除软组织。3. 玻璃水槽、解剖盘:用于制作过程中盛放标本。4. 卡片纸、大头针、胶水:用于对标本进行定 ...
实验步骤 1. 抗Fab片段抗体亲和层析纯化法 1) 偶联抗人或抗鼠Fab片段抗体到Protein G Sepharose,将纯化的抗人或鼠Fab片段抗体以2mg/ml的比例与Protein G Sepharose凝胶珠溶液混合,室温旋转孵育1h。用10倍量的0.2mol/L硼酸钠(pH值9.0)洗两次,4 000r/min离心5min,用10倍量的0.2mol/L pH值9.0硼酸钠溶液 ...