免疫学技术

生物体对异种移植物或同种异体移植物常发生排斥作用，这是因为供体的基因编码受体所没有的抗原，被受体的免疫细胞识别后引起排斥反应；或者是移植物中的淋巴细胞识别了受体细胞的抗原，发生免疫应答，攻击受体细胞，产生移植物抗宿主反应(graft versus host reaction，GVHR)。上述两类都是因为组织抗原不同而引起了免疫应答，即组织不相容性(incompatibility)。如果移植 ...

抗体是一种糖蛋白，存在于血清蛋白的丁球蛋白组分中，又称免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)，是体液免疫应答的产物。 血清蛋白经电泳分离后呈现不同的迁移率，依次为白蛋白(albumin)，α、β、γ球蛋白(globulin)。抗体活性主要存在于γ球蛋白组分，为IgG；小部分则在β2球蛋白组分中，包括IgM、IgA。后来又陆 ...

编码轻链和重链的基因分布在不同的染色体上，如人的丸链基因位于第22号染色体，κ链基因位于第2号染色体；小鼠的则分别位于第16和第6号染色体。H链位于人的第14号染色体，小鼠的第12号染色体。每条链由不同的基因簇组成，如重链上有L、y、D、J和C基因簇，每种基因簇含有许多个不同的编码基因。 1．轻链基因结构 轻链有κ链和λ链两种，它们有不同的基因 ...

免疫球蛋白是具有抗原决定簇结合特异性的各种球蛋白分子的总称。多样性是免疫球蛋白的重要特性。自然界的抗原种类极多，每种抗原还有不同的抗原决定簇，因此具有多种特异性的免疫球蛋白分子的种类也必定是极其众多的，可以有几百万种。可是，脊椎动物基因组内所有的基因总共不过几万个左右。因此，决不可能有那么多的免疫球蛋白基因去编码每一种特定的免疫球蛋白分子。研究证明，这是通过基因重排来实现免疫球蛋白的多样 ...

　　病原侵入机体后，由于其生物学特征的不同，可分为胞外菌感染和胞内菌感染两类，机体对这两类感染的免疫反应是有差别的。 　　（一）胞外寄生菌的抗感染免疫　　1．抗体对细菌繁殖的抑制作用：抗体与细菌结合，可以出现凝集和鞭毛制动现象，但一般而言，对细菌的活力只有微弱的影响，甚至没有影响。如果抗体的结合能抑制细菌的重要酶系统或代谢途径，则可能抑制细菌的生长。例如，某些细菌（例如败血巴氏杆菌）从血清转铁蛋白 ...

基因免疫（gene immunization）又称DNA免疫（DNA immunization）、核酸疫苗（polynucleotide vaccine）、DNA疫苗、体细胞转基因免疫（somatic transgene immunization）。系指将靶抗原编码基因置于真核表达调控元件的调控下，将该质粒DNA直接进行动物体内接种，并以与自然感染类似的方式呈递抗原，诱生特异性体液和细胞免疫应答的 ...

肿瘤抗原（tumor antigen）泛指在肿瘤发生、发展过程中新出现或过度表达的抗原物质。机体产生肿瘤抗原的可能机制为：①基因突变；②细胞癌变过程中使原本不表达的基因被激活；③抗原合成过程的某写环节发生异常（如糖基化异常导致蛋白质特殊降解产物的产生）；④胚胎时期抗原或分化抗原的异常、异位表达；⑤某些基因产物尤其是信号转导分子的过度表达；⑥外源性基因（如病毒基因）的表达。肿瘤抗原有多种分类方法，其 ...

荧光团探针的选择依赖于下面的重要标准：A.仪器。比如，光源，滤片，检测系统。B. 多标记中对探针色彩区分程度的要求。例如，若丹明红-X (RRX)和德克萨斯红(TR)荧光素的区别就比四甲基若丹明（TRITC）或者Cy3的区别明显。C.要求的灵敏度。比如，Cy3和Cy5就比其他的荧光团探针要亮。Aminomethylcoumarin Acetate (AMCA) 耦联的AMCA吸收光波 ...

①防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。②多例多块组织同时需做冰冻且片时，可各自放于不同的支承器上，于冷冻台上冻起来，然后依据不同的编号，依序切片，这样做既不费时也不会乱。③放置组织冰冻前，应视组织的形状及 ...

二抗在免疫学实验中起着举足轻重的作用，二抗的选择也决定了整个实验的成败。实验中在选择二抗时必须注意以下几点：（1）一抗种属来源主要根据一抗种属来源来决定确定二抗的类型，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（如羊抗小鼠、兔抗小鼠等均可）。（2）一抗类型二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.单克隆抗体的类别及 ...

检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素：分析试验应用的类型l样本蛋白的结构性质l样本的种属l抗体宿主的种类l抗体的标记和检测l1.分析试验应用的类型 一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，如：可以应用于WB IHC ICC ELASA分析等，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型， ...

抗体与免疫球蛋白有什么不同？生物科技发展在中国整个科技史都处于落后状态，近年来，国家科技迅猛发展，取的了可喜的成绩，过去有很长一段时间有人用电泳证明血清中抗体活性在γ球蛋白部分，故曾把抗体统称为两种（γ）球蛋白。后来发现，抗体并不都在γ区；并且位于γ区的球蛋白，也不一定都具有抗体活性。　　 1964年，世界卫生组织举行专门会议，将具有抗体活性以及与抗 ...

收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。液体类标本： 标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可 ...

① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序滴加，是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配。如，一抗是兔来源，一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是羊来源，必须用抗羊的二抗来匹配。④ 检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液是否正确。一抗的稀释液不能用来稀释二抗。⑤ 检查抗体的有效期和保存条件，尤 ...

（一）免疫酶染色试验 （immunoenzyme staining test，IEST） 免疫酶染色试验以含寄生虫病原的组织切片、印片或培养物涂片为固相抗原，当其与待测标本中的特异性抗体结合后，可再与酶标记的第二抗体反应形成酶标记免疫复合物，后者可与酶的相应底物作用而出现肉眼或光镜下可见的呈色反应。（二）皮内试验 （intrader rpmal testID） 宿主在病原体刺激后，体内产生亲细胞性 ...

优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，严格遵照规定操作，必能得出准确的结果。　　可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可 ...

有丝分裂细胞周期各时相的DNA 含量不同通常正常细胞的G1/ G0 期具有二倍体细胞的DNA 含量(2N) ，而G2/ M 期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N) ，而S 期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。因此，用DNA染料处理细胞后，可以将细胞周期各时相区分为G1/ G0 期S 期和G2/ M 期并可通过计算获得各时相的百分率。M期是细胞周期的重要研究对象，但由于G2期和M期的DNA含量一 ...

抗体的稀释度包括特异性抗体，中间抗体及标记抗体。任何一种免疫组化方法要想得到令人满意的染色效果，必须将抗体进行最佳稀释。一般来说，抗体的稀释度取决于下列因素。 (一)抗体的浓度(亦称滴度) 每毫升溶液内所含抗体分子越多，滴度就越高，该抗体可高度稀释，尤其是特异性一抗的稀释度。一般商品化抗体只知道每毫升含多少抗体蛋白量，不知道所含抗体分子。自己制备抗体可通过琼脂糖双扩散或放射免疫法进 ...

子宫内膜抗体(endomethal antibody，EMAb)是子宫内膜异位病患者受到异位内膜的刺激，或经血逆流等因素导致免疫应答紊乱产生的一种自身抗体，并与子宫内膜中靶抗原结合，在补体参与下，引起子宫内膜免疫病理损伤，影响孕卵着床，也容易发生早期流产。目前检测EMAb的方法有间接免疫荧光法(1FT)、双向免疫扩散法(1D)、间接血凝法(PHA)及ELISA法等。IFF法需刮取子宫内膜制备抗原片 ...

α2巨球蛋白(α2-macroslobulin，α2M)是血清中有重要生物学活性的大分子糖蛋白，分子量725kD。主要由肝脏合成，骨骼肌也能合成，半寿期约10d。α2M是一种广谱蛋白酶抑制剂，可与多种肽链内切酶形成不可逆性复合物，是纤溶酶的主要抑制物，在维持出、凝血平衡上具有重要作用。它除具有抗放射损伤作用外，尚可参与免疫调控。业已证实，&alpha ...