免疫学技术

相关专题 经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞 ...

相关专题 预先给动物注射少量异种血清，经过一定时间的致敏后，当第二次再注射相同的异种血清时即可引起过敏性休克。此发病机理与临床上常见的青霉素等药物及异种血清引起的人类过敏性休克相同。 【材料】健康豚鼠（体重200克左右），新鲜鸡蛋清，马血清，生理盐水，注射器等。 【方法】 1、取健康豚鼠二只（标明甲、乙）于皮下注射l∶10稀释的马血清0.1毫 ...

相关专题 一、原理 人和多种动物红细胞与白细胞一样，也具有重要的免疫功能。其基础是红细胞表面具有C3b受体（C3bR）。红细胞可通过其表面的C3bR，发挥清除免疫复合物（IC）、促进吞噬、提呈抗原及激活补体等多种作用。因此，建立的检测红细胞免疫功能的各种方法，也多以红细胞表面的C3bR为基础设计的。现已建立的主要有红细胞C3bR花环及IC ...

相关专题 一﹑原理 溶血空斑试验是体外检测单个抗体形成细胞（B淋巴细胞）的一种方法，即将经绵羊红细胞（SRBC）免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液，与一定量的SRBC结合，于37℃作用下，免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素，在补体的参与下，使抗体形成细胞周围的SRBC溶解，从而在每一个抗体形成细胞周围，形成肉眼可见的溶血空斑。每个空斑表 ...

相关专题 一、概述 细胞凋亡（apoptosisApo）是细胞增殖的反面，探讨的是细胞死亡的方式与机制。凋亡一词来源于希腊语。原指花瓣、叶片的脱落。自1972年Kerr首次提出细胞凋亡的概念以来，随着细胞生物学、免疫学和肿瘤学的研究发展，最近几年人们对细胞凋亡的重大理论意义和实际意义有了更深的理解。细胞凋亡是指在一定的生理和病理情况下，机 ...

相关专题 一、 概 述 (一) 基因免疫的概念 基因免疫(gene immunization)又称DNA免疫或核酸免疫，是指将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA) 与质粒重组后利用某种方法直接导入动物细胞内使带有目的基因的表达载体转化到体内通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白诱导宿主产生针对该抗原蛋白的抗体并引起特异的 ...

相关专题 原理 将待测样品中的抗原与已知抗体作用后，再与相应抗原—乳胶颗粒混合。因没有游离抗体的存在，乳胶颗粒表面的抗原不能与抗体结合出现凝集现象，即凝集被抑制。孕妇尿液中含HCG，用抗HCG与之结合后，再加HCG—乳胶，则不出现凝集现象。 方法 1、取玻片一张，左侧加生理盐水一滴，右侧加待检尿液一滴。 2、两侧各加抗HCG（HC ...

相关专题 实验目的 1.掌握T淋巴细胞E花环试验的原理、正常值，了解其方法和用途。 2.熟悉光镜下E花环的形态和计数方法。 实验原理 T细胞表面具有能与绵羊红细胞（SRBC）表面糖肽结合的受体，称为E受体（CD2）。已证实E受体是人类T细胞所特有的表面标志。当T细胞与SRBC混合后，SRBC便粘附于T细胞表面，呈现花环状。通过花环形成检查T细 ...

相关专题 一、免疫荧光法 　 １．直接法 （1）冰冻切片、涂片、印片或单层细胞培养物按要求进行固定，石蜡切片常规脱蜡后用酶消化处理，然后水化，用0.01mol/L PH7.2---7.4PBS洗5分钟，冷风吹干，放入湿盒中。 （2）滴加经稀释的荧光抗体，37℃ 30-60分钟或4℃ 过夜　　 （3）PBS 洗2次，蒸馏水洗1次 ...

相关专题 一、卵蛋白和生物素免疫染色 很早以前，人们就注意到给动物喂饲大量鸡蛋白时，可引起明显的“维生素H缺乏症”。经研究发现，在鸡蛋白中含有一种碱性蛋白质，分子量约为68，000，属于糖蛋白一类。当时命名为卵白素（Avidin）。卵白素具有4个由128个氨基酸组成的相同亚基，与生物素（又称维生素H）以及其他物质（例如荧光素和酶）具有很 ...

相关专题 一．卵白素和生物素免疫组织化学染色 1．标记卵白素—生物素（LAB）技术 （1）石蜡切片常规脱腊入水。 （2）0.3%H2O2—甲醇10分钟，水洗。 （3）PBS洗3次。 （4）加生物素(Biotin)标记的特异性一抗，37。C30分钟，置湿盒内。 （5）PBS洗3次。 （6）加酶标记的卵白素（Avidin） 37。C30分钟。 （ ...

相关专题 免疫组织化学技术是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，对组织或细胞内抗原或抗体物质定性和定位的组织化学技术。 免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法，免疫铁蛋白法。 免疫金法及放射免疫自影法等。用于病理诊断的主要有免疫荧光法和免疫酶法。免疫荧光法是现代生物学和医学中广泛应用的方法之一，包括荧光抗体和荧光抗原技术， ...

相关专题 一、免疫细胞化学技术的概述 ¨ 免疫细胞化学(immunocytochemistry ICC) – 是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定细胞内抗原的成分(主要是多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为～。 (一) 对抗原和抗体的要求 ¨ 具 ...

相关专题 在肿瘤的发生发展过程中免疫功能起着重要的作用，过去的观点认为免疫功能主要和白细胞有关，而红细胞在其中所起的作用一直未受重视。1981年siegel提出了红细胞免疫系统的新概念，开辟了机体免疫功能研究的新纪元。红细胞作为人体血液有形成份的主要组成部分与肿瘤细胞的接触机会比其他细胞要大1000倍。红细胞可以通过促吞噬作用、清除循环免 ...

相关专题 一、基本原理 吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体固有免疫中发挥重要作用。 小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。 二、材料 1 ...

相关专题 一、 基本原理 T细胞在体外培养时，受到有丝分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出现细胞体积增大，代谢旺盛，蛋白和核酸合成增加即向淋巴母细胞转化和增殖。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平，因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。淋巴细胞转化试验结果的读取可以有形态计数法、MTT法和同位素法三种。 MTT ...

相关专题 (In vivtro detection of antibody forming Cells——Test of Plague Forming Cell) 一、基本原理 溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹 ...

相关专题 一、实验原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或濒死细胞，而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验，利用细胞毒试验可以检查细胞膜抗原 ...

相关专题 一、实验原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡（Programmed Cell Death）是细胞的生命现象之一，它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关，自身免疫性疾病和肿瘤与细胞凋亡的抑制有关。细胞凋亡有别于细胞坏死 ...

相关专题 ELISA试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。然而，影响ELISA试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。一、ELISA试剂盒测定技术的发展临床测定技术的发展主要在于方法学的发展，而方法学的发 ...