细胞技术

shiliushi 我在看文献的时候，不是十分明白用相对光单位/mg 蛋白表示转染效率，相对光单位的值多大才表示转染效率高（50左右）呢？freecell 把文献贴出来。shiliushi Figure 7. In vitro and In vivo gene delivery assay by using GE11 peptide as the targeting element. A) Transfection efficiencies of various PEI, ePEI, or gPEI polyplexes in SMMC- ...

bdvetywz 各位战友，如何做凋亡通路？需要测哪些指标？如何证实动物是由于凋亡过度造成死亡的？谢谢!pingping05 你好！凋亡的检测指标非常多，比如说Hoechst 染色，形态学观察，流式，Tunnel,DNA-ladder等等，其中凋亡检测的金标准为TUNNEL和DNA-ladder,这两者 都可以定性和半定量表达凋亡的发生及其凋亡量的变化！magichunter 我觉得凋亡检测的金标准应该是电镜结果，tunnel不应算 ...

receptorr 我在做HaCaT细胞的磷酸化Akt(473)时，背景比较高，该怎么办？（即未处理组的Akt比较高）请高手支招。谢谢magichunter 说得太粗略了。receptorr 我做的细胞是HaCaT看看加入药物后HaCaT的磷酸化Akt是否有增高，所以希望没有加药的那一组HaCaT的磷酸化Akt水平低但是实际做时，发现没有加药的那一组HaCaT的磷酸化Akt水平比较高所以想问问各位高人，有什么办法把没有加 ...

sumu2006 我买了细胞线粒体分离试剂盒，想用于分离血小板线粒体。查文献发现有专门的血小板线粒体分离试剂盒。不想浪费之前的试剂盒，不知能否用于血小板，哪位高人可以指点下？万分感谢！Fasta921 两种试剂盒方法比较一下。再根据血小板小，无核等特点作出修改！dpw147 楼主你好，我想知道，你搞明白细胞的和血小板的线粒体分离试剂盒是否一样可用于血小板的线粒体分离？我现在也是买了细胞线粒体分离试剂盒。。。但要分的是血小板的 ...

hawkyin 1.当你已经发现了一个新的基因序列，但对其功能不知道，如何从分子水平研究它？2.有一个基因的蛋白产物定位于细胞核中，请设计一个研究方案进行后续的研究工作？Fasta921 hawkyin wrote:1.当你已经发现了一个新的基因序列，但对其功能不知道，如何从分子水平研究它？2.有一个基因的蛋白产物定位于细胞核中，请设计一个研究方案进行后续的研究工作？1、（1）定位分析（2）启动子分析（3）干涉该基因或过表达分析（4 ...

roy2708 信号转导和抑制剂如PD098059等很精通，由于本人第一次做有关信号转导方面,我的问题为:我的课题大体思路: 应用Morris 水迷宫训练正常大鼠，在丘脑前核检测ERK的表达情况，同时我想应用ERK抑制剂PD098059干预.1. 脑内核团给药更特异，但由于丘脑前核太小，给药太困难，所以只能选择侧脑室，这种给药方法可行否?2.PD098059侧脑室给药,量参考文献,还是需自己摸剂量?3.给药时间：PD098059在 ...

brushnan 请问用什么来刺激细胞产生可检测到的ROS，在哪种细胞里做？谢谢！baby1_9253344 氧化性物质，如重金属中的三氧化二砷和六价铬。可以查阅一些文献spatial 加盐、加冰水等生物或者非生物刺激，均可以诱导细胞ROS的快速产生。ecust小熊 spatial wrote:加盐、加冰水等生物或者非生物刺激，均可以诱导细胞ROS的快速产生。你这个作用强度不好控制。baby1_9253344 ecust小熊 wrote:你 ...

li_ping529 请问站内有哪位战友做AKt亚型的，想交流下经验，有做过AKt亚型的转染或相关文献吗？希望能共享，谢谢~~~:Ili_ping529 没人做过吗？帮忙问下吧~~~huxueliang 没有作过具体的,最常见的是AKT-1吧不知道你说的亚型的转染是什么意思li_ping529 我是想研究AKt亚型对治疗的影响，分别转染AKt1，AKt2，AKt3进细胞，有相关文献吗？我老板以前做过，但是现在他的质粒没办法用了~wosh ...

nemoliu 研究NF-kB激活问题方面，我见有些有些人做IKB的western blot,我想请教一下NF-kB激活后IKBα与IKBβ分别是上调还是下调？通常进行的western blot检测的是IKBα还是IKBβ？觉得对这些搞不清楚，希望高手赐教，谢谢了nemoliu 自己先顶一下，00501101 哈哈哈，我一直是菜鸟，在这里问高手，现在终于可以帮助别人了。心情很好这个需要你好好的看外文文献了。IKBα主要结合P65和 ...

dingxiangyua 有哪位高手知道F-GFP和GFP-actin的抗性分别是什么?急求Fasta921 定位在膜上的GFP （F-GFP）绿荧光蛋白(GFP)标记肌动蛋白(GFP-Actin)抗性？不明白！biyuntian478 lz是啥意思？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

trick 准备做关于PKC 活化从胞浆转位到膜上的WESTERN由于是加细胞因子刺激，所以要收比较多的样品，如果要超离的话太麻烦了不知道各位有没有不需要超离的提取液体的配方由于先是做些预实验，暂时还不准备买试剂盒，但是如果大家有什么好的试剂盒也给推荐下吧:)licanming 我也需要做这个！但好像基本都是用超离和试剂盒做的！andyyu LB + 2% sds本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方 ...

happy_840524 请问一下高手，我的MCF-7细胞老是养养就长出触角，而且长出触角后越长越慢，复苏了再养还是这样，我觉得我的培养液和操作都没有问题，因为另外一个细胞养的挺好，请高手指点。r1990en 我也是这种情况啊，不知道楼主的问题最后是怎么解决的？冬天的落阳 我的细胞也这样本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcomi ...

zhaohu552211 我正在做大鼠肝脏组织，现在做凋亡，请问做什么指标？我打算做DNA Ladder和AnnexV,请问用什么试剂盒比较好，价格先不考虑。我现在急求大鼠的ALR的序列，请各位多帮助，非常感谢zhaohu552211 请大家帮助:):)感谢大家Fasta921 Annexin V-FITC/PI 国产晶美的也不错！你检测的细胞没有其他荧光干扰吧，如果有GFP，不能用FITC，因为它们荧光通道相同。PS：把我血淋淋的教训告诉 ...

幽幽水 请问各位：如果所取肿瘤组织只有米粒大小，能同时做免疫组化和细胞培养吗？幽幽水 请各位给些建议，我现在弄开题报告，马上要开题了，很急。谢谢，十分谢谢！Fasta921 先培养细胞吧，不能断了自己的后路。呵呵免疫组化可以放在细胞培养后点做。幽幽水 呵呵，nlyydy 如果是医院取的组织建议先做细胞培养做免疫组化可以试着申请病理科取腊块或者切片，一般医院都有保存wanglinling 免疫组化一般取黄豆大点吧。一粒米要做两种有点不现实 ...

bixihi 3’侧翼区（3‘flanking region, 不是3'UTR）可能有哪些功能呢？大家讨论一下好吗？sulicon 这是个什么概念？？一般说flanking 都要对应一个site吧？？freecell 3' flanking region: A region of DNA which is not copied into the mature mRNA, but which is present adjacent to 3' end of the gene. It was originally thought that the 3' flanking DNA ...

licanming 我在sigma上看到许多Bisindolylmaleimide，有Bisindolylmaleimide I II IV V VI VII VIII acetate salt X hydrochloride XI hydrochloride I hydrochloride等10中不同的试剂，有些说是针对大鼠脑PKC的（说明书），我不知是否指组织特异性（英文理解力有限）？但I II VI我还未看出有什么区别！文献大多选用I，但I要9000多人民币，其它同等量的 ...

bacchante 本来想构建三个activated 上游kinase，但是觉得转染心肌细胞还是比较麻烦。因此求助各位，看看有没有药物激动剂什么的，直接加到细胞里面算了。谢谢bacchante 自己顶一下，高手请出面，到底P38和ERK以及JNK的药物激活剂是什么？突突突 SP600125，selleck，美国进口，JNK 抑制剂本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 ...

pophjp 请问alpha-synuclein的等电点是多少呢？不胜感激~-~Fasta921 pophjp wrote:请问alpha-synuclein的等电点是多少呢？不胜感激~-~http://expasy.org/tools/pi_tool.html输入你蛋白的氨基酸序列就知道PIpophjp 谢谢Fasta921，帮老忙了呵呵~-~本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄 ...

licanming 我的GF109203x（Bisindolylmaleimide I，Gö 6850）是sigma的，看说明书上是用DMSO配制母液，但未有说明稀释母液可以用哪些试剂，还是用DMSO吗？我看过一篇文献是用培养基稀释的。请问各位有无经验？一般都是用什么来配的？如果还用DMSO，那会不会DMSO过多，引起细胞损伤？licanming 可以用PBS稀释吗？licanming 通过这两天阅读文献，发现都是用培养基来配的，所 ...

songyd06 Src激酶中,Src汉语怎么读?英语全称是什么？Fasta921 sarcoma gene 肉瘤基因。能诱导肉瘤(sarcoma)的形成，故将此基因命名为src基因。songyd06 谢谢！小弟水平低，再问一句，src读的时候直接读sarcoma还是有其他的简写读法？Fasta921 songyd06 wrote:谢谢！小弟水平低，再问一句，src读的时候直接读sarcoma还是有其他的简写读法？读sarc！:):)本文由丁香园 ...