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        【求助】关于PD098059的实验设计?

        丁香园论坛

        1152
        信号转导和抑制剂如PD098059等很精通,由于本人第一次做有关信号转导方面,我的问题为:
        我的课题大体思路: 应用Morris 水迷宫训练正常大鼠,在丘脑前核检测ERK的表达情况,同时我想应用ERK抑制剂PD098059干预.
        1. 脑内核团给药更特异,但由于丘脑前核太小,给药太困难,所以只能选择侧脑室,这种给药方法可行否?
        2.PD098059侧脑室给药,量参考文献,还是需自己摸剂量?

        3.给药时间:PD098059在定位航行后立即给药,第二天做空间探索(国外文献有的给药后48小时做空间探索)? 多长时间处死动物合适?
        4. 除了检测ERK外,还想检测CREB和C-FOS, 是否合理呢?

        另外:
        一、水迷宫训练时间一般要数日,ERK激活则是持续性激活(或是累积)?
        二、即使是ERK激活,那么,一定只局限在海马区,因为其他区域/细胞不太可能,因为ERK信号通过参与了多种功能调节。
        三、如果侧脑室给药需要多高的浓度呢?其他给药方式都可以较大剂量的给药,侧脑室估计就是几微升的给药量吧。
        四、ERK阻断的话会造成多种细胞/脑区的功能改变,你如何界定水迷宫如果出现的差异只是由于海马区障碍引起的,如果是影响了嗅觉,视觉,触觉等的功能呢(因为如一,要处理一段时间,必然会造成其他脑区结构功能的改变)?
        谢谢!
        自己顶顶吧
        ms这种拿抑制剂来做动物实验的不多,可能
        1 抑制剂使用量不好确定,却价格不菲
        2 基因的激活时间与剂量效应需要与实验的摸索,且动物实验,浪费时间与精力

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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