细胞技术

bahai 大家好，最近学习雌激素信号转导的相关知识，不知道哪位仁兄仁姐手头有雌激素信号转导通路的图啊，谢谢各位！kaige88 送你三张kaige88 送你三张kaige88 送你三张3ffyy8888 呵呵，你可以找北医尚院士他们实验室了解，他们在这方面做的很漂亮的，今年就发了一篇相关的研究cellbahai 谢谢两位，非常感谢啊。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好 ...

daydayupmj 请教个问题，最近接触了一些脂联素的文章，有些混乱，1----血清中脂联素形式有球形还有全长型，还有的这样分即高分子量多聚体（HMW)，六聚体，三聚体，还有的这样写HMW,MMW,LMW.是不是MMW就是六聚体，LMW就是三聚体。还有说球形结构域是三聚体，是什么意思？有些混乱。2-----关于脂联素到底是抗炎的，还是一种炎症反应的标志物，是一种炎症因子。看了一篇关于脂联素的英文Adiponectin and infl ...

zhangxiaoli728 请教分子生物高手：gap-opening和gap-extension是什么意思呢，怎么理解？非常感谢！freecell Gap opening penalty：空格罚分设置，增加一个空格就罚相应的分值，增加这一分值会降低空格出现的频率。Gap extension penalty：空格扩展罚分，就是根据空格的长度来罚分，增加这一分值会使空格变短，末端空格不计入罚分。参考： http://abc.cbi.pku.edu. ...

lijl810 请大家帮帮忙，我现在需要使用DNAMAN的全套软件分析工具，希望大家能帮帮我，在此先谢谢大家了，需要英文版的。freecell http://www.lynnon.com/往事随风而去 我这儿就一个DNAman软件 何谓全套？下载见附件往事随风而去 下载见附件 2-2lijl810 谢谢大家的热心帮忙啊，非常感谢！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号： ...

rongshenghao 哪位知道由GTP或者ATP或者carbachol引起细胞内钙离子浓度升高确切的信号转导途径谢谢！！！rongshenghao 下面是我查到 的资料ATP(或者GTP)和carbachol都可以通过G蛋白偶联的途径使IP3增多，然后导致钙离子升高各位战友能够再具体详细说明下比如在这个通路中哪个蛋白激酶起作用？比如磷脂酶 (PLC)，水解磷脂酰肌醇二磷酸产生脂甘油(DAG)和IP3,那IP3是如何使内质 ...

Amanda1983 请教一下，genome-wide screenings是什么技术啊，翻译成中文是什么意思啊freecell 这个不是什么“技术”，而是一种研究基因与表型相关性的一种方式，即基因组规模上的筛查。比如说，想分析A疾病的发生机理，然后采用一定的手段，在整个基因组上“扫描”，但哪些基因与此疾病发生相关。你参考这篇文献：http://scholar.ilib.cn/A-ykyj200604026.html如果你对我的解答 ...

michaelhwp10 买了sigma公司的药，用来干预细胞。药粉用DMSO溶解后我把它放在四度冰箱，但是DMSO在四度时候会冻住。做一次实验我就拿出来融化一次，请问多次冻融会对这药的药效有影响吗？sosorunning 说不准有些反复冻融很稳定，也有些很不稳定，所以下次做的时候要分装。michaelmichael 分成小份放在-20度保存吧，不要放在4度。DMSO在低温时会凝固，但不影响药物的活性。至于可以反复冻融多少 ...

treesea 我想用western blot的方法，研究临床的手术切除的脑组织病理标本中Ras-MAPK信号通路的表达变化的情况。请问具体要研究哪些指标呢？在标本处理的时候需要注意哪些方面？谢谢~~treesea 期待中~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~michaelmichael 首先，你要保证样本蛋白不被降解；第二，要正确匀浆组织样本与蛋白定量，这样才胡保证一样的量是一致的；第三，你要选择磷酸化的抗体来研究该通路，同时还要观察总 ...

yy59410 请问，我现在要测线粒体膜通透性改变即JC-1的检测，想问下国产的试剂盒里凯基的好还是碧云天的好。希望高手指路啊。freecell 效果差不多。yy59410 谢谢！还有一个就是我用JC-1测MMP,是不是没必要再用罗丹明测ROS了！我做的是凋亡检测！wudonghui3516010 我现在也是在用JC-1，效果很明显，就碧云天就可以。平时-20保存，用时稀释1000倍。美可爱的土豆 请问一下楼主有没有做用碧云天的试剂盒 ...

百分之7大脑 IP10（ interferon-inducible protein-10），即CXCL10，是1985年Luster等在研究IFN-γ诱发的免疫应答时从U937细胞中克隆到的。我想问的是IFN-γ是怎么诱发产生IP10的？IFN-γ的信号传导是否只有JAK/STAT途径？是否通过这条途径诱导产生IP10？我只知道的是IFN-gama的JAK/STAT途径，到细胞核，然后就不知道了，有哪位大侠给我解惑解惑？或者提供 ...

hehades 哪位朋友测过线粒体膜通道孔（MPTP）? 我想测骨骼肌细胞不知道哪种方法好,是用骨骼肌悬浮细胞还是用冰冻切片? 哪种方法可靠?十分感谢iscience 一般用活细胞吧 。参考这篇文献：African Journal of Pharmacy and Pharmacology Vol.2(2). pp. 014-021, April, 2008http://www.academicjournals.org/AJPP/PDF/pdf2008/Apr/Manash%20et ...

sounderxu 请问谁有clone manager软件，发给小弟一份，实验急用，万分感激邮箱sounder001@126.comfreecell 自己为何不在丁香园搜索一下？http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2991955_0.htmlsounderxu 这个下载不了啊本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号 ...

happylimi 请教：如何提取细胞中的cAMP？和普通蛋白的裂解buffer一样么？happylimi 知道和裂解普通蛋白的buffer不一样了，要用TCA将蛋白沉淀下来除去，但是后续报道有用乙醚洗然后用60度氮蒸干的，但是这个我们实验室没有条件做，还有其他的后续处理方法么？ylcui 如果实验室有进口的探头式超声破碎仪的话，直接加PBS超声破碎悬浮细胞即可。有时要加磷酸二酯酶抑制剂。贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解B ...

eeflying 目前有两种化合物，分别为Bcl-2和PARP的抑制剂，虽然这两个指标通常作为细胞凋亡的指标常用于分子生物实验，但是，如何证明这两个分子被抑制的实验却第一次碰到，请各位战友支招，我要直接检测哪个蛋白的WB 或者做什么实验合适？magichunter 用western检测bcl-2的含量变化，检测PARP活性裂解片段的含量变化以及原型态PARP的含量变化。eeflying 你和我犯的一样的错误，目前不是看PAR ...

dongyunzhao 请问：http://pictar.bio.nyu.edu/网址打不开，是不是链接改了？freecell http://nematoda.bio.nyu.edu:8080/NBrowse/N-Browse.jsp?last=falsehttp://pictar.mdc-berlin.de/dongyunzhao 谢谢斑竹lya2009 这两个网址好像还不行。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的 ...

sonny_zan 我实验的关键步骤，现在就是不知道有什么办法可以阻滞LPS刺激后PBMC分泌TNF-alpha，考虑过用p38 MAPK抑制剂SB203580，后来查到一篇文献说SB203580对LPS刺激后p38 MAPK的活性影响甚微或无。请各位大侠给点意见啦！我快急死了~~~xiongran 拿抗体把PBMC表面的TLR4封闭掉试试看！pureclear 可以考虑用TNF-a的中和抗体 可以中和细胞产生的TNF-a R&D公司有本 ...

荷满堂 想研究下肿瘤细胞的信号通路，不知道研究信号通路的方法可否与流式细胞术结合起来？请大家知道下！littlepiggie 这是一个不错而且可行的想法。细胞经过固定/穿透（fixation/permeabilization)之后，荧光标记的抗体可以进入细胞浆以及细胞核中，识别，比如说，蛋白质的磷酸化位点。之后，通过流式细胞仪检测荧光强度，就可以分析信号激活的程度。而这种方法的主要优点就是，可以同时标记细胞的表面抗原，进而 ...

圈圈儿2009 请问有哪位朋友养有p53野生型白血病细胞吗？若没有，告诉我细胞种类也行，我已经查了很多资料了，白血病细胞大多数是p53缺失型的，只见到几个实体瘤是p53野生型的。课题急需对照细胞，一时找不到，若能帮忙，千恩万谢！alixtardxy No, most leukemia cells, except CLL, have WT p53.The problem is that leukemia cells generally overexpress MDM2 to promotes p ...

girl19860627 E.coli修复DSB损伤与真核DSB方式比较？？版主freecell留言:提问的时候，要在标题说清楚问题。小长 DNA 双链断裂（DNA double-strand break, DSB）发生双链断裂的染色质部位被泛素化修饰后能够招募修复蛋白质到该部位对DNA损伤进行修复。DNA损伤反应信号网络（DNA-damage response (DDR) signalling network）可以依DNA损伤的不同而介导不同的修复 ...

下沙 各位战友，关于NF-kB的激活，我查了一些资料，有人认为通过western研究P65的表达量可以反映NF-kB的激活。因为P65的磷酸化和IkB的磷酸化可以反映NF-kB的激活，我比较困惑的是到底采用western检测P65、磷酸化P65还是IkB呢？是检测胞浆中的蛋白吗？如果是检测P65，NF-kB激活时，P65是升高还是降低呢？谢谢！magichunter 1、提取细胞全蛋白，然后测定磷酸化的P65表达，如果表达 ...