蛋白质技术

最近在做原核的诱导表达，现对原核表达IPTG诱导原理进行总结，同时在一楼也有一些问题，欢迎大家拍砖！！！乳糖（Lac）操纵子（operator）学说：当葡萄糖和乳糖同时存在时，细菌优先利用葡糖糖，当葡萄糖利用完以后，细菌经历一个生长停滞期，开始利用乳糖，细菌会出现“二次生产曲线”。乳糖操纵子的基因表达受 阻碍蛋白 和 CAP（分解代谢产物的激活蛋白，又称CRP，cAMP receptor protein）的双重调控。乳糖操纵子的结构：其中P ...

蛋白表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明，利用蛋白表达系统表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。常见的蛋白表达系统包括大肠杆菌/原核蛋白表达系统、酵母/真核蛋白表达系统、哺乳动物细胞蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统、植物蛋白表达系统。在此针对一些常见的问题进行总结，与大家共享，共同学习。Q1：为什么蛋白表达出来了，SDS-PAGE检测时大小不符？A1：进行 ...

Contents:Table of ContentsAdhesion Protein ProtocolsPrefaceContentsContributors1— Monoclonal Antibodies Specific for Leukocyte Adhesion Molecules Selective Protocols of Immunizati...1— Introduction2— Materials3— Methods4— NotesReferences2— Epito ...

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Nondenature PAGE）主要是根据蛋白质分子的电荷性质、电荷多少和分子的大小来进行蛋白质分离。虽然它的分辨率不高，但它不像变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）那样使蛋白质变性，电泳后的蛋白质保持其生物活性，可以进行进一步的蛋白质分子结构与功能的测定.1 材料1.1设备 低温台式离心机（德国Beckman公司），高速台式离心机 TGL-16C（上海安亭科学仪器厂），DYY-10型三恒电泳仪（北 ...

TCA-DOCFor precipitation of very low protein concentration1) To one volume of protein solution, add 1/100 vol. of 2% DOC (Na deoxycholate, detergent).2) Vortex and let sit for 30min at 4ºC.3) Add 1/10 of Trichloroacetic acid (TCA) 100% vortex and let sit ON at 4ºC (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Ma ...

看到一篇很好的文献，在这里共享一下，希望对做分离纯化的站友有点帮助。来源：http://www.bioon.com/experiment/protein/protein4/200412/86142.html全文：摘 要 综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。　　多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物活性的多肽的研究，一直是药物开发的一 ...

Glycoprotein Analysis in BiomedicineGlycoprotein Analysis in Biomedicine(Methods in Molecular Biology)Glycoprotein Analysis in Biomedicine brings together a comprehensive range of protocols related to carbohydrate biochemistry. The first half of the manual outl ...

一、样品提取：三氯醋酸—丙酮沉淀法（1） 在液氮中研磨叶片（2） 加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃8000rpm以上1 小时）弃上清。（3） 加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。（4） 上样前加入裂解液，室温放置30 分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。（5） 用Br ...

“蛋白质双向电泳技术应用高级研讨班”通知随着分子生物学的发展和蛋白质组学研究的开展和深入，蛋白质这个生命活动的主要承担载体的表达和功能研究已成为21世纪生命科学的重要研究课题。蛋白质是基因功能的实施的载体，对蛋白质结构、定位和蛋白质-蛋白质相互作用的研究将为阐明生命现象的本质提供直接的基础。要对蛋白质进行上述研究，首先需要将蛋白质从其复杂的体系中分离纯化出来。在众多蛋白质研究的技术中，双向电泳技术为科学家了 ...

09新书：The Septins .PDFPeter A. Hall (Editor), S. E. Hilary Russell (Editor), John R. Pringle (Editor)ISBN: 978-0-470-51969-1Hardcover380 pagesJanuary 2009Septins have recently attracted a strong interest form researchers of diverse fields of biological and medical sciences. A co ...

摘 要3－磷酸甘油醛脱氢酶折叠中间体与分子伴侣GroEL的“半位结合”模式“分子伴侣”的发现和鉴定改变了蛋白质折叠研究的经典概念，开辟了崭新的蛋白质生物合成研究的时代，为解译第二遗传密码并最终全面阐明分子生物学中心法则奠定了基础。分子伴侣功能的研究是蛋白质折叠研究领域中最活跃的前沿，其中分子伴侣与其帮助的靶蛋白之间的识别、相互作用以及解离又是分子伴侣作用机制研究最根本的内容。李剑研究了当前最受注意的分子伴侣Gr ...

近期蛋白质结构研究突破大汇总在过去的9月中有许多影响因子极高的杂志都刊登了许多对蛋白质结构研究的突破，它们各自采用不同的原理，但目的都是攻克行使生物功能的大分子——蛋白质。目前研究蛋白的手段并不多，其中一些如核磁共振做起来即费时，成功率也不高，因为蛋白晶体非常难以获得。在9月18号Nature Structural and Molecular Biology 网络版上发表了一篇由来自加州大学圣地牙哥分校（UCSD）科研人员完成 ...

1,超声效果判定:a)一般要在超的过程中监测，超几下就做个玻片染色，在你的视野里应该还能看到几个没有破碎的菌才行，没有这样完好的菌存在就说明你超过了，蛋白就会完蛋了。监测几次就有经验了，也不用每次都染就行了。最简单的方法：涂片--革兰氏结晶紫溶液染色0.5分钟---显微镜观察切记：只用结晶紫染色,别忘了染色后再用水稍冲洗一下b)我们的作法是：在第一次使用超声破碎仪时监测OD600以确定功率和时间，取5微升样品加入1毫升 ...

1. iTRAQ技术原理是什么？多个（每组最多8个）来源不同的蛋白样品经过不同标签标记后，可以合并后同时进行质谱分析。在每个肽段二级质谱图上，相应每个样品的报告离子强度用以表征该蛋白在不同样品中相对含量的高低，而肽段碎片离子可用于蛋白的鉴定分析。是鉴定与定量同时进行的一种定量技术。2. 关于“样品重复”，技术重复和上机重复有什么区别？“样品重复”，也可以称为生物重复。生物重复是指样品来自同一处理组的不同样品，是整个实验的完全 ...

标题:植物蛋白提取试剂植物蛋白提取试剂 P1258Plant total protein extraction kit (cat # P1258)描述：植物蛋白提取试剂适用于多种植物根，茎，叶及果实等的新鲜或冻存组织。植物组织成分复杂，含有较多酚类物质、多糖、色素、次生代谢物质等，致使植物蛋白质的分离提取变得困难和复杂。本试剂采用优化的试剂和程序，能有效提取多种植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，有效去除植物组织所含的多酚、多糖、醌、色素、脂质、次生 ...

题目：Data_Analysis_and_Visualization_in_Genomics_and_Proteomics编者：Francisco Azuaje (Editor), Joaquin Dopazo (Editor)ISBN: 0-470-09439-7Hardcover 284 pages May 2005格式：PDF大小：2.41MB原书连接：http://as.wiley.com/WileyCDA/WileyTitle/productCd-047 ...

　在制造蛋白质类药物时,蛋白质分子受到物理或化学因素的影响,性质常有所改变,这类变化统称为变性。蛋白质在变性过程中,伴随有下列现象 : ① 生物活性的丧失; ② 一些侧链基团的暴露; ③ 一些物理化学性质的改变; ④ 生物化学性质的改变。为防止蛋白质变性,目前广泛应用的是冷冻干燥技术(freeze2drying) 。冷冻干燥技术是将含水物质在低温下冻结, 然后在真空条件下通过对冻干物料加热使冰升华,再除去物料中部分吸附水,得到干制品。用这种方法制造的药品所希 ...

本内容需要回复后才能下载！本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除真实的蛋白质色谱（高清英文版）Practical Protein Chromatography名称Practical Protein ChromatographyBiological methodsMethods in Molecular Biology第 第 11 卷 卷, Jeffrey W. Pollard编者Andrew Kenney, Susan Fowell版本插图版出版商Humana Press, 1 ...

Publisher: Wiley-VCHNumber Of Pages: 304Publication Date: 2006-01-09Sales Rank: 488335ISBN / ASIN: 3527308199EAN: 9783527308194Binding: HardcoverManufacturer: Wiley-VCHStudio: Wiley-VCHAverage Rating:Total Reviews:--------------------------------------------------------- ...

应用SDS-PAGE显示小分子多肽SDS-PAGE在分离、鉴定和纯化蛋白质方面有着广泛应用，其有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度，其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小，比率接近于1：20时，孔径达到最小值。分子量低于10kD的小分子肽类，即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离，或是显不出色，或是显带较弱，带型弥散。且分子量越小，效果也越差。为了能在SDS-PAGE上显示测定 ...