蛋白质技术

http://www.swissproteomicsociety.org/links.htmlApplied Genomics and Proteomics - Open Mind Journals Briefings in Functional Genomics and Proteomics - Oxford University PressClinical Proteomics - Humana PressComparative and Functional Genomics - Wiley Current ...

http://www.10150.com/com/changadhere/ns_detail.php?id=15589&nowmenuid=17102&cpath=&catid=0基于ＣＢＰ标签技术的蛋白质表达与纯化系统 （用于高水平蛋白质表达和单步骤纯化）Protein Expression and Purification System是一种简单、温和、有效的方法，包括一个含有 calmodulin-binding peptide tag 钙调蛋白结 ...

Running Protein GelsSolutions10X Running Buffer (0.25 M Tris, 1.92 M glycine, 1% SDS)121 g Tris577 g glycine40 g SDSddh20 to 4 L (check pH at 1:10 dilution (pH=~8.8)).5X Sample Buffer (0.3125 M Tris pH 6.8, 10% SDS, 50% glycerol, 0.005% bromophenol blue, 25% 2-mercaptoethanol)1.56 ml 2M Tris pH 6.81 g SDS5 ml glycero ...

自由基与衰老关系的研究进展随着老龄人口的比率越来越高,阐明衰老的机制,延缓衰老,提高老年生活质量成为日益迫切的要求。自由基在衰老的发生发展中具有重要作用,是衰老机制的研究热点,许多学者对此进行了系统深入的研究,并取得了阶段性进展,本文就此作一综述。1　衰　老1.1衰老的概述:衰老是指生物体发育成熟后,随着年龄的增长,机体在形态、结构、功能方面出现的种种不利变化,如皮肤变薄起皱、色素形成、器官老化、智力下降等,衰老是一种正常的 ...

DNA序列测定技术序列测定的技术和策略Sanger双脱氧链终止法Maxam－Gilbert DNA化学降解法测序策略　　目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组寡核苷酸都有固定的起点，但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱 ...

Heterologous Proteins Expressed in Pichia pastoris来自：http://faculty.kgi.edu/cregg/Pichia2004.htm有以下几部分组成：Protein CommentsMode, amount,signal sequenceReferences and Links分别分物种来源如下：BacteriaAlpha galactosidaseS453Bacillus licheniform ...

国内做western的实验室现在很多，但是western因为是历时比较长，试剂多，总是出现各种各样的问题，园子里帖子很多，讲述经验的，在这发帖主要是想让大家抒发一些做western的感受以及感觉实验的key point是什么，最容易犯的错误是什么，希望大家踊跃发音，其中附一篇网上及园子里流传很广的一篇文章，希望大家多多跟帖，发表自己的感想这是园子里的一篇帖子，非常欣赏，转过来，希望大家多写写，主要是1 key point 2最 ...

电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类　　在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。F＝QE质点的前移同样要受到阻力（F）的影响，对于一个球形质点，服 ...

Western的原理几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所用条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并尽可能减少其相互间的聚集。最常用的方法是将强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，并通过加热使蛋白质解离后再加样于电泳凝胶上。变性的多肽与SDS结合并因此而带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在聚丙烯酰凝胶电泳中的迁移只与多肽的大小相关 ...

经过N年的非人的生活，俺终于毕业了，硕士，博士，真的是一种煎熬。但是当一切结束，回头看的时候才发现一切的辛苦化为乌有，只有那一本博士毕业论文给一点慰藉。就象死后重生内心再难起波澜。在这里我作一个小小的总结，以便让大家在读医学研究生生涯中能借鉴。一、.首先心态要积极，我就是心态比较消极，结果过的几年越来越觉得辛苦，到最后都快崩溃了。作科研本身就是一个充满困难，挑战困难的过程，在这里不要害怕失败，不要畏缩不前，从心理上不 ...

Western Blot为什么必须要用内参?要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的 ...

以前做的很好看的条带现在怎么做也做不出来原来的效果了，所有的液体和buffer都换了，尝试了很多次，都没见改善，大家来帮忙看看问题出在哪里？1，做的好的内参：不管齐不齐，但至少条带是一根一根的，边界很清楚，没有糊，没有影子，干净，即使中间空一个泳道，也不会出现串孔的现象。2，做的好的目的蛋白：可能拍照的原因出现了很多格子，但是不影响，目的条带是两条带，同样每跟都很清晰，没有串孔，没有拖带，边缘没有发毛发糊。以上两条是同一 ...

我看了论坛里的很多关于tricine－sds－page帖子，发现了一个很大的问题：“英文版”和“中文版”在电泳buffer的配制上存在很大的矛盾。“中文版“ 的阴，阳极buffer的pH分别是 8.25 和8.9而”英文版"的配方的pH刚好相反。 请问到底哪个版本是对的。下面是我引用的中文的版本：1，电极缓冲液要重新配制了。tricine－sds－page与一般的sds－page不同，它含有阴，阳两极缓冲液，在配制的时候pH值要注意了，不要 ...

人体的各种生理反应都是由蛋白参与和调节的，而这些蛋白的表达和活性同时也受多水平，多方面的调节。这种调节既有转录水平的，也有翻译水平。既有转录后的修饰，也可以是蛋白翻译后的修饰调节。对这些蛋白的调节也有多种的形式，包括磷酸化——去磷酸化，乙酰化——去乙酰化，羧基化，甲基化，糖基化等等。这种多水平，多方面的调节构成了人体内庞大而复杂的调节体系，精确地调节了人体内的各种生理、生化反应。蛋白的乙酰化和去乙酰化是蛋白活性调节的 ...

一、Western Blot成功要素 与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第 ...

中国蛋白质组学第二届学术大会为了迎接第三届国际蛋白质组学大会10月25-28日在我国北京召开，也为了促进我国蛋白质组学研究的向纵深发展，中国生物化学与分子生物学会蛋白质组学专业委员会（筹）和中国人类蛋白质组组织(CHUPO)（筹）会同中国科学院大连化学物理研究所于2004年8月10-12日在辽宁省大连市联合主办中国蛋白质组学第二届学术大会。一、会议安排：　　学术大会设有大会报告和分会报告二种形式、大会将邀请有关院士、 ...

Wiley ebooks for biotechnologyProtein Crystallography in Drug Discoveryhttp://rapidshare.com/files/56066269/Protein_Crystallography_in_Drug_Discovery.pdfProtein microarray technologyhttp://rapidshare.com/files/56066804/Protein_m ...

蛋白质结构功能区查询与分析：Pfam数据库下面的内容是从Pfam主页直接转贴过来的，大家可能都知道了，做蛋白研究的应该去看看。Pfam is a large collection of multiple sequence alignments and hidden Markov models covering many common protein domains and families. For each family in Pfam you can:1. Look at multiple alignments2. View ...

在园子里讨论RIPA的很多，但仅仅只有最终物质的量浓度，要具体配制时还要换算成质量单位，十分不便。我在网上搜到了相应的改良RIPA的具体配法，希望能够有用。下面的内容将RIPA的基本配方、蛋白酶抑制剂配方以及磷酸酶抑制剂配方分开，对于有机会直接买蛋白酶抑制剂cocktail以及做磷酸化的战友而言十分方便。那样的话只需配制基本配方即可。Preparation of Modifed Radioimmunoprecipita ...

其实研究王晓东的科研思路，发现这个规律是相当明显的，他自己也曾在讲课时提到科研的三板斧，其中的两板斧肯定是：建立体外生化检测系统，用这个系统跟踪蛋白纯化过程。他的过人之处就在于他的实验室能用 100升的细胞，过5，6个column最终纯化得到单一的生化组分。这个毅力有点像那个从几十万个猪脑提取某个激素的故事，他的实验比提激素可能要简单，但是他提取的不是一个，而可能是几个，这几个将细胞调亡线粒体途径阐述得相当干净明了 ...