蛋白质技术

很多战友（包括我）对“复杂”的生物学软件和厚厚的软件使用说明书充满了恐惧，以至于始终不能够用它们来提高自己的工作效率。很多不太懂电脑的战友就是被这些复杂的东西吓得永远不敢去用软件的。我们做StepByStep的初衷就是让初学者按图索骥地几分钟之内就学会怎么用一个生物学软件，而更进一步的功能可以在使用中自己去慢慢摸索。StepByStep的中心思想：++++几分钟，一个例子学会一个软件的基本使用！++++目标读者：生命 ...

以下为有关于gst的帖子，供大家参阅：大肠杆菌表达的GST和人的GST有同源性么http://www.dxy.cn/bbs/thread/402809如何去除GST融合蛋白以外的GST的表达？http://www.dxy.cn/bbs/thread/711228请教GST蛋白的纯化http://www.dxy.cn/bbs/thread/585739GST pull downhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/496 ...

1. 参考书推荐A. 对初学者看什么资料比较好？解答：《抗体技术实验指南》和Antibodies（a laboratory manual， wrote by Ed Harlow ，david lane）两本书不错。2. 针对样品的常见问题B. 做线粒体膜UCP2蛋白的Western Blot （以下简写成Western Blot），提取线粒体后冻存（未加蛋白酶抑制剂），用的博士德的一抗，开始还有点痕迹，现在越来越差，上样量已加到120μg，换了个santa cloz的一抗仍不行。是 ...

工欲善其事，必先利其器。对照一下，你的实验室还缺那些？（1）超声波细胞破碎机适用于5－100g湿菌体超声破碎，实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。（2）高压匀浆机大规模生产用，对菌体量无限制。破菌效果好，但要注意冷却。（3）高分散乳化机均匀悬浮菌体用，比搅拌快，均匀性好，特别适合于大规模生产。另外，大规模生产时缓冲液的配制很有用，可快速溶解、混匀。推荐品牌：IKA 国产品牌：FLUKO ...

总结了论坛现有的sds-page及相关方面的绝大部分帖子，并没有进一步筛选精华，因为，可能每个人遇到的情况不同，一个人认为是精华不一定代表对所有人都适用，因此，集合了这么多帖子，也许里面某个小小的问题就是困扰实验的症结所在，主题后面的数字代表了回帖数目，可以据此决定是否有必要浏览该帖子。希望能够对大家有用，如有任何建议，欢迎提出。据说考马斯亮兰能染出颜色就能做出Western是么？SDS－PAGE中用琼脂糖封边有 ...

最近2个月一直在研究studier的auto-induction Protein Expression System.他今天三月份在Protein expression and purification上发表了一篇长达28页的文章“Protein production by auto-induction in high-density shaking cultures。 Protein Expression and Purification 41 (2005) 207–234” 综述了3 ...

推荐一个网站，可以下载如下分子生物学图书，都是精品：• 斯坦福大学分子生物学讲义http://www.foodmate.net/ziliao/sort/14/3219.html• 普通生物学——生命科学通论http://www.foodmate.net/ziliao/sort/14/4590.html• 分子克隆实验指南http://www.foodmate.net/ziliao/sort/14/7540.html• 分子生物学技术和食源性致病菌的快 ...

1. 在western实验中，通常有人采用TBS，有人采用PBS，在使用中有什么区别？　　选择合适的缓冲液对于维持一定PH值下蛋白质的稳定及保证实验的重复性是很重要的。PBS的缓冲能力强于TBS（因为混合缓冲液在一定的离子强度下常常具有更宽的缓冲范围），TBS在PH7.0以下缓冲能力较弱（不过PBS易污染）。但我们常常要根据我们实验目的选用合适的缓冲液，如在蛋白纯化中进行阴离子交换层析，阳离子缓冲液首选TBS；阳离子交换层 ...

xinxinmp3@56.com临床皮肤科杂志200403－04 13985.03Kb临床医师指南皮肤性病学分册 2340.80Kb国家基本药物临床手册（西药）.pdf 10953.50Kb皮肤科疾病诊断与治疗 13051.32Kb老年皮肤病学 王树椿jin.yi.xiao2@56.com化学工程师技术手册.part3.rar 10538.27Kb化学工程师技术手册.part2.rar 18534.02Kb液相色谱检测方法 9571.49Kb色谱柱 ...

在发贴之前先，请各位新老站友一定先检索一下相关话题的帖子，以避免对您时间和资源的浪费。目前在蛋白板块中有许多非常好的专业讨论帖子。许多求助的朋友在第一时间选择的可能是发新贴，忽视了以及的功能。您可以在通过键入keyword或者在Poster中输入站友的ID对本版以往的帖子进行检索。一定能在第一时间获取您所需要的信息。在icesugar75、codegreen主任积极倡议下，《蛋白质技术讨论版》中已有众多战友从 ...

以下是蛋白论坛关于层析纯化蛋白的大部分有一定深度的帖子（其中大多数讨论对于接触蛋白纯化的新手及做纯化工作的同仁来说都有积极意义），包括亲和层析、疏水层析、离子交换等几个系列，罗列主题多有概括以方便大家寻找。此项工作将一直进行下去直至版块有新的安排为止。层析纯化蛋白讨论集成之一(亲和层析)关于亲和层析的纯度问题CNBr-Sepharose 4B 的再生离子交换层析与亲和层析 离子交换?亲和层析?亲和层析间隔手臂分子的选择关 ...

1. 一般Native-PAGE方法非变性电泳非变性胶蛋白电泳求助：Native-PAGE方法Native-PAGE Protocol2. Native PAGE 分离碱性蛋白求助：碱性小肽非变性电泳非变性电泳的高手请进! 3. 回收目的蛋白如何从凝胶中提取蛋白，谢谢求助：关于从电泳凝胶中如何萃取蛋白质？水平SDS电泳求助有没有方便省钱的方法从PAGE胶回收蛋白想从sds胶里面回收蛋白，几个相关的问题SDS-PAGE电泳后可以回收再复性吗 ...

1.抗体的选择对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区的实验者而言，感触尤深。在这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），而且说是100微升，但至多 ...

1.毕赤酵母表达实验手册总结 2.关于毕赤酵母喜好密码子3.几篇关于毕赤酵母的文章 4.毕赤酵母发酵问题5.Help！毕赤酵母破壁问题？6.毕赤酵母转化问题7.毕赤酵母表达实验手册总结 8.关于毕赤酵母菌表达的大作修改稿 9.毕赤酵母分泌表达出现问题～～求救～～10.急！急！关于毕赤酵母表达小肽的技术11.影响外源基因在巴氏毕赤酵母中表达的因素 12.毕赤酵母电转化 13.再谈毕赤酵母的表达问题14.有用pPICZaA做毕赤酵母表达的吗？15. ...

离心原理　当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时，由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关，并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。象红血球大小的颗粒，直径为数微米，就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。此外，物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。扩散是无条件的绝对的。扩散与物质的质量成反比，颗粒越小扩散越严重。而沉降 ...

Proteomics: Methods and Protocols 2009-6蛋白质组学方法和技术by J?rg Reinders and Albert SickmannProduct DescriptionSince the development of the concept of “proteomics”, great progress has granted deeper insight into the cellular network, but the enormous range of protein abundance, ...

自我总结的Westen Blot步骤，简单实用！蛋白质的提取（整个过程冰上进行）一．组织膜蛋白裂解液 bufferA+1%蛋白酶抑制剂蛋白保存液 40%SDS+60%RIPA+1%蛋白酶抑制剂1.-80°C冰箱中取出组织放入研磨管中（研磨管和配套的研磨棒事先用去离子水冲洗，用纸吸干水)按600-700μl/100mg组织加裂解液研磨（研磨后研磨管和研磨棒用去离子水冲洗，用纸吸干水）2.用1000枪转入1.5ml离心管中4°C离心，15 ...

不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达？我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6，构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确，可是进行表达时，却未见蛋白表达，同时进行的试剂盒对照（含CAT基因的重组细胞中则有较好的表达。我听说约有70%的蛋白在原核表达系统中是不表达的，但不知道这样的情况会不会发生在我用的昆虫细胞表达系统，除了实验操作失误方面的原因，还有什么因素是不使蛋白表达的，请大 ...

先说一下Tricine胶的好处。Tricine胶比较容易将样品压平，具体原因我也没有搞清楚，但可以肯定的是这种胶跑出来的Marker又细又直，同样，显出来的条带也压的很好。与普通的SDS-PAGE胶跑出来的结果相比，Marker扩散没有那么厉害，各泳道条带间隔明显，不像普通胶的条带容易连到一起。反正跑出来的条带就是很漂亮。Tricine-SDS-PAGE胶的配方：（我一直用的就是10%这个浓度，把8KD和280KD ...

1,关于使用三氯醋酸沉淀法后蛋白质难于重悬的问题Q:1,Hi !I have been trying to clean and concentrate proteins form eucariotic cell culture medium in order to analyse them in 2D. I’ve read some papers were TCA precipitation was used and recommended for this purpose but I have not been able to redissolve my samples. I have u ...