【专题讨论】Tricine-SDS-PAGE胶的使用方法与心得（可分离8KD--280KD）
丁香园论坛
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先说一下Tricine胶的好处。
Tricine胶比较容易将样品压平，具体原因我也没有搞清楚，但可以肯定的是这种胶跑出来的Marker又细又直，同样，显出来的条带也压的很好。与普通的SDS-PAGE胶跑出来的结果相比，Marker扩散没有那么厉害，各泳道条带间隔明显，不像普通胶的条带容易连到一起。反正跑出来的条带就是很漂亮。
Tricine-SDS-PAGE胶的配方：（我一直用的就是10%这个浓度，把8KD和280KD都做出来了）
分离胶 积层胶
ddH2O 1.85 mL 2 mL
AB-3 1 mL 250 uL
Gel-Buffer(undefined) 1.65 mL 750 uL
甘油 0.5 mL —
10%AP 25 uL 22.5 uL
TEMED 2.5 uL 2.25 uL
(这个配方来自DXY，今天又回来了，呵呵)
undefinedGel-Buffer 配方：(200mL量)
Tris-Base 48.44g
Tris-HCl 31.52g
SDS 0.6 g
pH 8.45,很难溶，可以60°C水浴促进溶解。
AB-3 (100mL量)
丙烯 48g
双叉丙烯酰胺 1.5g
注意：丙烯溶解后会使溶液体积增大，故只要用约80mL水溶解即可，完全溶解后再定容。通风橱内操作，注意保护自己！
外槽电泳液（+极）（Anode Buffer）1undefined
Tris-Base 46.92g
Tris-HCl 17.73g
500mL体积，pH 8.9。
内槽电泳液（-极）（Cathode Buffer）1undefined
Tris-Base 24.22g
Tricine 35.84g
SDS 2g
200mL体积，pH 约8.25。
（内外槽电泳液的体积这样配，是因为一般电泳槽内槽一次只要150mL液体，而外槽需要400-500mL液体。）
Tricine胶比较容易将样品压平，具体原因我也没有搞清楚，但可以肯定的是这种胶跑出来的Marker又细又直，同样，显出来的条带也压的很好。与普通的SDS-PAGE胶跑出来的结果相比，Marker扩散没有那么厉害，各泳道条带间隔明显，不像普通胶的条带容易连到一起。反正跑出来的条带就是很漂亮。
Tricine-SDS-PAGE胶的配方：（我一直用的就是10%这个浓度，把8KD和280KD都做出来了）
分离胶 积层胶
ddH2O 1.85 mL 2 mL
AB-3 1 mL 250 uL
Gel-Buffer(undefined) 1.65 mL 750 uL
甘油 0.5 mL —
10%AP 25 uL 22.5 uL
TEMED 2.5 uL 2.25 uL
(这个配方来自DXY，今天又回来了，呵呵)
undefinedGel-Buffer 配方：(200mL量)
Tris-Base 48.44g
Tris-HCl 31.52g
SDS 0.6 g
pH 8.45,很难溶，可以60°C水浴促进溶解。
AB-3 (100mL量)
丙烯 48g
双叉丙烯酰胺 1.5g
注意：丙烯溶解后会使溶液体积增大，故只要用约80mL水溶解即可，完全溶解后再定容。通风橱内操作，注意保护自己！
外槽电泳液（+极）（Anode Buffer）1undefined
Tris-Base 46.92g
Tris-HCl 17.73g
500mL体积，pH 8.9。
内槽电泳液（-极）（Cathode Buffer）1undefined
Tris-Base 24.22g
Tricine 35.84g
SDS 2g
200mL体积，pH 约8.25。
（内外槽电泳液的体积这样配，是因为一般电泳槽内槽一次只要150mL液体，而外槽需要400-500mL液体。）
版主skykiller留言:
制胶配方中的Tris base是tricine，不是Tris，请战友们注意。
制胶配方中的Tris base是tricine，不是Tris，请战友们注意。
