【原创】蛋白质纯化武器－设备篇（欢迎补充）
丁香园论坛
2043
工欲善其事，必先利其器。对照一下，你的实验室还缺那些？
（1）超声波细胞破碎机
适用于5－100g湿菌体超声破碎，实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。
（2）高压匀浆机
大规模生产用，对菌体量无限制。破菌效果好，但要注意冷却。
（3）高分散乳化机
均匀悬浮菌体用，比搅拌快，均匀性好，特别适合于大规模生产。另外，大规模生产时缓冲液的配制很有用，可快速溶解、混匀。推荐品牌：IKA 国产品牌：FLUKO；
（4）中空纤维超滤柱
大规模生产时做菌体收集用，要配合大蠕动泵及压力表。
小规模研发时也有用做浓缩的，但感觉死体积比较大。
（5）高速冷冻离心机
小试、中试菌体收集用，破菌后离心，包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌：BECKMAN、日立、Eppendorf
（6）磁力搅拌器
就是搅拌用了。缓冲液配制，包涵体溶解等。推荐品牌：国产的都行，最好配4或6工位的。
（7）真空泵
离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌：Millipore WP61型。
（8）过滤器
同真空泵配合使用。推荐品牌：Sartorius烧结金属垫板的不锈钢50mm滤器。
（9）pH计
缓冲液配制、样品pH调节用。推荐品牌：梅特勒
（10）电导仪
就是测定缓冲液及样品的电导了，做离子交换层析有时候要用到。
（11）纯水仪
如果没有管道系统的纯水设备，那就必需要的了。至少也是要去离子水、双蒸水或三蒸水。推荐品牌：MINI Q
(12)紫外可见分光光度计
测定蛋白浓度。推荐品牌：Beckman，岛津
（13）核酸蛋白检测仪
纯化时在线监测。如果不是用AKTA、Bio-Rad之类的高级仪器，就必须要了。
（14）蠕动泵
简单纯化系统用、包涵体稀释复性。推荐品牌：兰格、GE公司P50。
（15）纯化系统
高级的纯化系统了。推荐品牌：AKTA explorer、AKTA Purifier。不推荐bio-rad的DUOFLOW。
（16）膜超滤器
蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒素用。推荐品牌：Millipore Labscale、Pellicon（泵可用国产的兰格）
（17）蛋白电泳仪
SDS-PAGE、Westblot用。推荐品牌：Bio-Rad，国产上海天能。
（18）脱色摇床
电泳染色、脱色用。
（19）制冰机
破菌时冷却用。
（20）恒温培养箱
融合蛋白酶切去除tag时恒温用，做ELISA时用。
（21）凝胶成像仪
就是给电泳胶及WB拍照片用，要配照片打印机哦。就是一台数码相机，硬件各品牌没有本质差异，主要看那家的软件做的好，界面友好。
（22）电磁炉
加热电泳样品，方便，快捷。
（23）微波炉
电泳考染脱色。加热水，溶解尿素、硫酸铵等。
（24）微量取样器
就是枪了。从1ul到5ml都要的。还有一种电动的，可以用刻度吸管。推荐品牌：Gilson，eppendorf
(25)超净工作台
做蛋白样品的无菌过滤用。
（26）冰箱
不说了。
（27）电风扇
小量样品的浓缩风干。
个人感觉10-200ml的样品浓缩最为方便，比超滤、PEG等方法简单实用。
（28）电子天平
称重了。两种精度：0.1mg和0.01g。推荐品牌：梅特勒
（29）空调
这个我相信大家都不会反对，也是蛋白纯化对环境的要求。
（30）超声波清洗机
缓冲液脱气用，当然也可以采用真空泵抽真空的方法。特别是做疏水层析时，有机溶剂与水相混溶时脱气。
（31）酶标仪、洗板机
测定蛋白质免疫活性用。特别当我们纯化的蛋白原料含量很低时，SDS-PAGE无法有效监测就必须应用Elisa方法。
（32）恒温干燥箱、干烤箱
恒温干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗涤后的干燥，设定温度40-60度。
干烤箱用于干烤灭菌，内毒素去除等，设定温度180-220度。
（33）酸缸
就是做细胞培养常用的那种浸泡容器的东东，对药品级的蛋白纯化要求容器都要用酸缸泡过。
（34）UPS电源
保护层析设备，防止数据丢失，生产必备。
（35）层析冷柜 低温冷室
4度双门的那种大冷柜，可以把层析柱放进去，对温度敏感的蛋白纯化需要。
冷室作用同上，更彻底，只是运行费用更大。
（36）冷冻干燥机（器）
蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。
（37）不锈钢层析柱架、三叉夹
柱架有商品化的卖，但是没有自己DIY的好。可以自己设计好后找做不锈钢窗户的小店去做，很便宜。
夹层析柱的夹子首选三叉夹，很牢靠，最大可以夹50mm的GE夹套XK柱。
本帖仅做引玉，大家可以就每项设备展开讨论，看看那些东东，那些品牌对我们做蛋白质纯化的人来说是好用的。
本人会不断完善此帖，希望大家支持。
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http://protein.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=17703087&sty=1&tpg=1&age=0
（1）超声波细胞破碎机
适用于5－100g湿菌体超声破碎，实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。
（2）高压匀浆机
大规模生产用，对菌体量无限制。破菌效果好，但要注意冷却。
（3）高分散乳化机
均匀悬浮菌体用，比搅拌快，均匀性好，特别适合于大规模生产。另外，大规模生产时缓冲液的配制很有用，可快速溶解、混匀。推荐品牌：IKA 国产品牌：FLUKO；
（4）中空纤维超滤柱
大规模生产时做菌体收集用，要配合大蠕动泵及压力表。
小规模研发时也有用做浓缩的，但感觉死体积比较大。
（5）高速冷冻离心机
小试、中试菌体收集用，破菌后离心，包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌：BECKMAN、日立、Eppendorf
（6）磁力搅拌器
就是搅拌用了。缓冲液配制，包涵体溶解等。推荐品牌：国产的都行，最好配4或6工位的。
（7）真空泵
离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌：Millipore WP61型。
（8）过滤器
同真空泵配合使用。推荐品牌：Sartorius烧结金属垫板的不锈钢50mm滤器。
（9）pH计
缓冲液配制、样品pH调节用。推荐品牌：梅特勒
（10）电导仪
就是测定缓冲液及样品的电导了，做离子交换层析有时候要用到。
（11）纯水仪
如果没有管道系统的纯水设备，那就必需要的了。至少也是要去离子水、双蒸水或三蒸水。推荐品牌：MINI Q
(12)紫外可见分光光度计
测定蛋白浓度。推荐品牌：Beckman，岛津
（13）核酸蛋白检测仪
纯化时在线监测。如果不是用AKTA、Bio-Rad之类的高级仪器，就必须要了。
（14）蠕动泵
简单纯化系统用、包涵体稀释复性。推荐品牌：兰格、GE公司P50。
（15）纯化系统
高级的纯化系统了。推荐品牌：AKTA explorer、AKTA Purifier。不推荐bio-rad的DUOFLOW。
（16）膜超滤器
蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒素用。推荐品牌：Millipore Labscale、Pellicon（泵可用国产的兰格）
（17）蛋白电泳仪
SDS-PAGE、Westblot用。推荐品牌：Bio-Rad，国产上海天能。
（18）脱色摇床
电泳染色、脱色用。
（19）制冰机
破菌时冷却用。
（20）恒温培养箱
融合蛋白酶切去除tag时恒温用，做ELISA时用。
（21）凝胶成像仪
就是给电泳胶及WB拍照片用，要配照片打印机哦。就是一台数码相机，硬件各品牌没有本质差异，主要看那家的软件做的好，界面友好。
（22）电磁炉
加热电泳样品，方便，快捷。
（23）微波炉
电泳考染脱色。加热水，溶解尿素、硫酸铵等。
（24）微量取样器
就是枪了。从1ul到5ml都要的。还有一种电动的，可以用刻度吸管。推荐品牌：Gilson，eppendorf
(25)超净工作台
做蛋白样品的无菌过滤用。
（26）冰箱
不说了。
（27）电风扇
小量样品的浓缩风干。
个人感觉10-200ml的样品浓缩最为方便，比超滤、PEG等方法简单实用。
（28）电子天平
称重了。两种精度：0.1mg和0.01g。推荐品牌：梅特勒
（29）空调
这个我相信大家都不会反对，也是蛋白纯化对环境的要求。
（30）超声波清洗机
缓冲液脱气用，当然也可以采用真空泵抽真空的方法。特别是做疏水层析时，有机溶剂与水相混溶时脱气。
（31）酶标仪、洗板机
测定蛋白质免疫活性用。特别当我们纯化的蛋白原料含量很低时，SDS-PAGE无法有效监测就必须应用Elisa方法。
（32）恒温干燥箱、干烤箱
恒温干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗涤后的干燥，设定温度40-60度。
干烤箱用于干烤灭菌，内毒素去除等，设定温度180-220度。
（33）酸缸
就是做细胞培养常用的那种浸泡容器的东东，对药品级的蛋白纯化要求容器都要用酸缸泡过。
（34）UPS电源
保护层析设备，防止数据丢失，生产必备。
（35）层析冷柜 低温冷室
4度双门的那种大冷柜，可以把层析柱放进去，对温度敏感的蛋白纯化需要。
冷室作用同上，更彻底，只是运行费用更大。
（36）冷冻干燥机（器）
蛋白质保存较佳的方案。从手提式到药厂的大规模冻干室形式多样。
（37）不锈钢层析柱架、三叉夹
柱架有商品化的卖，但是没有自己DIY的好。可以自己设计好后找做不锈钢窗户的小店去做，很便宜。
夹层析柱的夹子首选三叉夹，很牢靠，最大可以夹50mm的GE夹套XK柱。
本帖仅做引玉，大家可以就每项设备展开讨论，看看那些东东，那些品牌对我们做蛋白质纯化的人来说是好用的。
本人会不断完善此帖，希望大家支持。
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