蛋白质技术

tyw5668 请问是不是免疫组化、免疫荧光、Elisa？谢谢lianhongli 应该是酵母双杂、免疫共沉淀和共定位吧。gingivalis 不管答案是什么，千万不要以为这就是权威。方法是无限的。不怕做不到，就怕想不到。summityoung 1.酵母双杂交是初筛2.筛到得蛋白要用Co-IP、GST-Pull down进行验证bioyangyu tyw5668 wrote:请问是不是免疫组化、免疫荧光、Elisa？谢谢应该是楼上几位说的酵母 ...

yanjinghou 请问各位高手，怎么比对多个物种的同源蛋白序列？freecell google.com: multiple protein sequences alignment梧桐纷飞 dnaman dnasistthomasz 进入这里：http://www.ebi.ac.uk/Tools/muscle/yanjinghou 我下载了其推荐的软件，好像不能用。郁闷zhongkui 不是吧，google一下会有一大堆的了。用过几个，都挺好的，不过，几年前 ...

cakeman 在肽键合成过程中 peptidyl-tRNA的2-OH of final “A”有什么作用？谢谢freecell WHICH "A"? Where did you find it?cakeman 有质子穿梭作用的那个 我也不知道是哪个。。。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

榴莲宝宝 问一下“氨基酸序列突变 P194_H195dup"代表什么意思?谢谢！zhanglifei 同问同问，**freecell_在194位插入了脯氨酸，在195位插入了组氨酸。dup是Duplication。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

pmlt 我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里有很多这方面的帖子，你可以看看。doctormy pmlt wrote:我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 wrote:可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里 ...

dcr_80 细胞内信号蛋白 ：其功能是从细胞浆到细胞核的转位完成，量没有变化。除了SMAD家族外还有那些呢？好心的战友，帮帮我下。toddy99 STAT, nuclear receptors, NF-kB, beta-catinin,dcr_80 谢谢！！zfyyzz00 smad本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

littlekaka 我手头有一个胞浆蛋白，是一个离子通道的辅助亚基，我的实验设计希望它表达后上膜，现在我的初步设想是在这个蛋白的N端挂一个CD4，但是我担心CD4太大会影响我这个蛋白的本身功能（也许通过改变linker的长度可以减小影响），请问是否有人知道，有没有什么比较经典的改造方式，比如连一个其他什么蛋白甚至某段domain，而对蛋白本身的表达和功能没有影响，不胜感激！zhuqueleee 我记得以前看到一篇文 ...

oveiyi 先谢过了oveiyi 就是容易被氧化或者容易被还原的蛋白redox proteingingivalis 铁硫蛋白应该可以算。不知道血红蛋白能不能算？电子传递链中的蛋白质算不算？oveiyi 多谢楼上，这些都算哈，还有别的吗本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

luoqq1985 DNA Binding and Transcription Factor Pull-Down AssayArray Analysis of DNA-Binding Proteins请问这两个是什么方法？什么原理？谢谢，freecell Pull-down可译作“蛋白质下调”，基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”( ...

wbis 请教大家如何实验证明一种分泌蛋白是自分泌作用还是旁分泌作用？谢谢！zhujoker 我不知道你说的情况是什么样的情况，如果是养的细胞的话，那是不是不会出现这样的问题。如果是机体的话，你的这个问题就太复杂了，因为如果搞清楚了至少也是一篇10分的文章吧？如果要证明，也就只能是原代培养，分离组织挑单克隆培养细胞，然后进行鉴定了。单个细胞的话这个问题应该是能够解决了吧？索莱宝 唯一的方法就是免疫组化！董学易7235202 我 ...

yanjiangwang 请问在哪、怎么找一个蛋白质的保守氨基酸序列？谢谢！jiwu20 ncbi比对之后就知道了，还有蛋白质数据库也可以。skly 这个，我还没有学到，帮忙顶一下！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

fallmonkey 有些病毒会编码这样的蛋白酶，将翻译出的一条长多聚肽链，切成有活性的2-3个蛋白，细胞里面有么有这样的酶或机制？hanmingyue 纤维切割蛋白(filament-severing protein)这类蛋白能够同已经存在的肌动蛋白纤维结合并将它一分为二。由于这种蛋白能够控制肌动蛋白丝的长度，因此大大降低细胞中的粘度。经这类蛋白作用产生的新末端能够作为生长点, 促使G-肌动蛋白的装配。另外, 切割蛋白可作为加帽 ...

ccy115 大家请帮帮忙吧！我从MDCK细胞上抽提胞浆蛋白和核蛋白，胞浆蛋白浓度在0.5-1.5mg/ml 之间，核蛋白在1.0-2.5mg/ml之间，然后我各用了10ug蛋白上样量来做Western bolt检测IkB类因子和P65因子，蛋白大小在40KD到65KD之间，用的是半干转50mA,90min,转0.22UmPVDF膜后把胶拿去染色，没残留有目的条带区域蛋白，说明蛋白已经转印在膜上了，但是做了很多次了都没有曝光出条 ...

伽利略 ...............................chenlydd 两者都有,蛋白磷酸化水平与其功能密切相关：检测其磷酸化水平可用抗磷酸化位点抗体检测。www.cellsignal.com公司有相应抗体出售。P65磷酸化位点:regulates apoptosis: S536‑pregulates cell growth: S536‑pregulates cell motility: S536‑pregulates transcription: S205‑p, T254‑p, S ...

benbenlixiubo 各位战友好！请问，蛋白激酶pkc epsilon都磷酸化哪些蛋白，我最近搜了几个如N型钙离子通道1-2、2-3loop、trpv1蛋白s800，觉得应该还有其他相关蛋白，希望有这方面知识背景的同志们再指点一二!谢谢zhujoker 建议参考以下网站，因涉及内容较多，所以不在此给你阐述。http://en.wikipedia.org/wiki/Protein_kinase_Cyingshang 建议参考下面这 ...

pengmin8866 各位前辈!我是新手,刚做关于Galectin-3 的实验,要测定血清中的量,不知道用什么方法好.请帮我找找血清中的Galectin-3 的论文及方法啊!万分感激!freecell http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18319555http://d.wanfangdata.com.cn/NSTLQK_NSTL_QK17971240.aspxhttp://www3.interscience ...

qiubiaodsg 我最近在做pull down 实验，先用western blot 标记的是被拉的蛋白，结果片子上是一片白板，连作为对照的input（只有被拉的蛋白）都没曝出来，请各位高手知道一下吧，谢谢。本人western 没有问题。dianaofyezi 如果连对照都没有出来，就首先应该考虑程序流程的问题，无论是否发生了pull down，起码对照应该成立不是么？然后再考虑的是相互作用的蛋白的问题。poriae if the input is not goo ...

surgerybaoyu 请教下各位前辈，我收集术后引流液想检测蛋白分子，但是这个腹膜液中由于手术原因带有血液，而且发生了溶血，想问下对于这种检测上清液中的蛋白影响大嘛？还能测吗？有什么办法解决？或者经验借鉴？谢谢，不甚感激freecell 检测什么蛋白分子？surgerybaoyu freecell wrote:检测什么蛋白分子？TPA、PAI本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可 ...

馨er 我在做基因筛查，发现了一个突变，而且氨基酸发生改变，我想用软件预测蛋白及蛋白功能有没有改变，怎么做？谢谢指教！freecell 我没有读过类似的文献，可以用软件来预测功能有没有改变。在这种情况下，个人认为就该基因表达产物的典型功能，做一个对比的实验。基本就能说明问题，证明是否有义突变。馨er 哦，问题是我这里不能做这方面的实验，我只能想办法用软件预测！希望多多指教！gingivalis 有没有这个蛋白质的三级结构？或者BL ...

吴佰霖 老板的一个课题，一个分泌性蛋白，可结合一些小分子，与膜上受体结合，但是用重组表达的蛋白与 pcDNA过表达这个蛋白的生物学效果不一样请问有什么研究策略吗freecell 你的研究材料？ 研究目的？吴佰霖 材料：细胞系，酵母表达重组蛋白，pcDNA表达克隆载体，研究目的是分泌性蛋白结合受体后在胞内的信号通路，或相关作用分子xiongran 在下游构建一个报告基因，至于上游可以是配体分子表达以后与受体结合激活信号通路，有的情况下 ...