DNA实验技术

我现在正在做的是AFLP方面的东西，结果检测必须要做变性胶电泳才能看到，但是前一阵子我做的一直不顺，条带少，我试着减少引物的筛选个数和降低退火温度结果还是这样，一时不知道从何处找原因，想求教你的是1、先看看我前两天做的变性胶电泳图片，条带太少，我看到的文献都是说条带在50到100的样子，为什么我跑的是这样子的呢，我做了减少引物的筛选碱基的个数和降低退火温度，结果还是差不多，请问各位做过AFLP的或者是跑变性聚 ...

第一章　质粒DNA的碱裂解法提取与纯化——【核酸基因技术版】已有zein 和newdragon 编写初稿，请两位战友商量并及时更新，采用一个版本！第二章　基因组DNA的碱裂解法提取与纯化——【核酸基因技术版】已有zein 编写初稿，请及时更新！第三章　真核细胞DNA的制备与定量——【核酸基因技术版】已有yujz149 编写初稿，请及时更新！第四章 噬菌体DNA提取——【核酸基因技术版】第五章　核酸电泳——【核酸基因技术版】已有wangjun报名 编写初稿！第六章　感受 ...

此资源转自小木虫，都可以下，相当清晰，但是需要安装米人，本人测试过了。希望好心的版主可以给点积分，谢谢了先对于刚进实验室的新手来说，有太多仪器不懂，有太多操作不了解，现在把浙大基因工程实验操作讲解视频分享给大家，希望能对实验室新手有帮助~1.细菌基因组DNA的提取.wmvhttp://d.namipan.com/d/ba51df852bf4755d02e6a74a8ef3e04000f112bd57a77f042.P ...

本人整理了论坛上关于战友所求助的各种质粒载体的图谱，后面所跟着的网站都是含有前面名称载体的详细图谱，希望对大家能有帮助！质粒pGEM-4Z载体图谱 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/5198013_0.htmlpGEX-4T-2载体图谱：http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4211077_0.htmlpGEX-4T-1载体图谱：htt ...

Blast指南http://www.dxy.cn/bbs/user/download/385095/BLAST%20tutorial%20%28part%201%29.htm如何进行BLAST,如何分析BLAST后的结果,请访问http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Education/BLASTinfo/tut1.htmlblast 讲座幻灯片http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&i ...

摘要：荧光条形码标记的单分子检测技术是一种全新的高通量检测基因表达谱、miRNA等分子的技术，其定量结果可与real-time PCR相媲美。由于它的高通量和高精确性填补了基因芯片和real-time PCR之间的技术空白，一经问世大受欢迎，其检测结果频频登载在nature、science、cell等顶级杂志上。NanoString公司研发的荧光条形码标记的单分子检测技术最早诞生于Leroy Hood博士创立的系统生物 ...

15天构建三个重组质粒经验－－态度决定成败－－献给刚刚进入实验室的新战友前言：我自己的课题是单克隆抗体的制备及其初步应用，总共花了六个月的时间基本做完。做完了之后我想现在单抗的文章不可能发到比较好的杂志，就想能不能利用剩下的将近一年的时间来再做一个比较好的课题。下面是从我的试验记录上面摘抄的一部分，也就是构建载体的这一段时间所记录的东西。第一天：同实验室的一位同学是做某蛋白上面的一段的免疫活性的研究，我就像我 ...

我5月18号向一位韩国Han-Yang大学的教授索要两个基因的质粒。得住于我们园子里面很多贴子的帮助，在他们的帖子的帮助下，今天（6月2号）老外终于把质粒寄来了。前后仅仅半个月和老外的接触，让我深刻体会到国外专家教授的那种科学无私的精神。把与他来往通信贴出来，供以后需要的朋友参考。也宣传一下这位教授（Sang-Hun Lee MD.PhD）的科学无私精神。Sent: Sunday, May 18, 2008 12:34 PMDear Dr Lee,I am wor ...

核酸、核苷酸的基本换算DNA电泳基本参数Pfu DNA聚合酶BCIP/NBT & BCIP/INTHistoChoice MBHistoChoice Clearing Agent核酸、核苷酸的基本换算1．核酸的换算：(1)摩尔数与质量：1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol1 μg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol1 μg SV40 DNA (5,243bp) = 0.29 pmol1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmo ...

一些分子生物学常用实验技术方法大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第一节 概 述　　在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。　　转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种 ...

什么是高通量测序？高通量测序技术（High-throughput sequencing，HTS）是对传统Sanger测序（称为一代测序技术）*性的改变, 一次对几十万到几百万条核酸分子进行序列测定, 因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing，NGS )足见其划时代的改变, 同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能, 所以又被称为深度测序(Deep sequencing) ...

真核细胞的mRNA在加工过程中有一个比喻为“穿鞋戴帽”的过程，因此mRNA的3'末端都带有一段Poly A，这是利用逆转录酶制备cDNA文库的基础。但是由于cDNA的5'端的序列各不相同，如何获得全长的cDNA，如何扩增由微量的mRNA逆转录得到的cDNA文库、如何利用已知片断序列得到全长的cDNA（即RACE），曾经是一个令人困扰的问题。常见的做法是在合成cDNA的双链后在两端连上接头，利用已知的接头序列再进行扩增 ...

以下是我翻译的脂质体说明书，请多指教————————————————————————————InvitrogenLipofectamineTM 2000Cat. No. 11668-027 Size: 0.75 mlCat. No. 11668-019 Size: 1.5 ml含量及保存：LipofectamineTM 2000 为液态，浓度为1mg/ml。储存在4℃，注意不能冻存。重要原则：进行转染时应遵循下面的原则：1．对大多数细胞来说，DNA(ug)与脂质体(ul)混合的比例应为1:2至1:3。例如 ...

琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳片段的回收将在以后的文章中介绍，在这里我先介绍一下琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法，方便大家学习交流。从琼脂糖凝胶中回收DNA，是一种简单不过的常规实验操作。但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验――比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等，所以这一步的操作也显得非常重要。胶回收的质量好 ...

1.原理和方法总则操作指南质粒的简单提取特殊类型质粒提取酵母质粒提取 基因疫苗质粒提取 双歧杆菌质粒提取 重组质粒的提取2.质粒的保存与运输质粒的保存低浓度质粒的保存滤纸上质粒的溶解3.试剂与试剂盒Promega的Wizard试剂盒Promega试剂盒效果谈4.经验之谈质粒提取的一点经验 提取失败请注意关于低拷贝质粒简便的质粒提取方法振荡的手法为什么会出现沉淀一篇关于质粒提取的好文章大提质粒经验谈5.质粒的酶切

精华【连接转化讨论专栏】 连接反应大全 【鸡毛蒜皮】之5－连接反应中巧用内切酶 连接技术讨论区PCR与连接PCR连接关于PCR产物及酶切产物与载体的连接 PCR产物与表达载体连接的问题PCR产物能够直接用做T-载体的连接吗平端连接 平端连接高手（讨论专贴）平端连接平端连接的怪现象? 平端连接的怪现象(2)平末端连接的条件？ 平末端连接构建载体的一些个人经验连接问题集 连接的问题关于连接偶的连接问题！还是连接问题求助：DNA连接问题关于连接的 ...

1. 什么是Reads?高通量测序平台产生的序列就称为reads。2. 什么是Contig？拼接软件基于reads之间的overlap区，拼接获得的序列称为Contig（重叠群）。3. 什么是Scaffold？基因组de novo测序，通过reads拼接获得Contigs后，往往还需要构建454 Paired-end库或Illumina Mate-pair库，以获得一定大小片段（如3Kb、6Kb、10Kb、20Kb）两端的序列。基于这些序列， ...

对于刚开始做实验的人来说，收集资料比不可少，然而现在重复性资料很多很杂，要想在较短的时间内获得更过的信息，就必须找到高效的信息资源，我以下的内容也是从各种渠道收集来的资料，我把它们做了整理，截取了其中比较有价值的内容进行编排，希望你看过之后能对核酸杂交有个全面的认识，在做实验时少犯错误。核酸杂交（Nucleicacid hybridization），又称核酸分子杂交。原理：是核酸变性和复性理论。双链的核酸分子在某些理 ...

标题：【申请上传】Molecular Biology of the Gene (Watson J.D., et al., 5th edition, 2004)内容：Molecular Biology格式：PDF大小：110 MB语种：英文简介：http://www.pearsoned.co.uk/Bookshop/detail.asp?item=300126#Description位置：老赵一号航母核酸基因技术区/pub/Molecular Biology of the Gene--------------- ...

本人倾情上传本校基因工程专业的试题及答案。作为送给核酸技术讨论版的礼物。希望版主加分。基因工程与基因体外表达练习题及其答案一、填空题1． 基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。2． 基因工程的两个基本特点是： (1)____________，(2)___________。3． 基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。4． 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小 的片段，可以构建显示该区域各 ...