单分子测序技术的发展,使得科学家们在人类细胞发现了一类新的小RNA分子,并证实了多年以来的猜想--RNA可以直接由RNA复制而来,而不是非得借助于DNA的转录。这项由皮茨堡大学学者主持的研究,“第一次证实了RNA可以像DAN一样地复制”。这项研究也说明了人类RNA群体的多样性,并揭示单分子测序技术在准确和全面理解基因组轮廓中的重要作用。
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癌症和干细胞生物学的飞速发展凸显出稀有细胞的重要性。尽管新一代测序技术在基因表达研究上无比强大,但它们对如此少量的细胞还是无能为力。到目前为止,很多方法都需要多步样品制备和扩增,这样就有可能引入人为误差,让表达谱不甚准确。于是,我们需要更高保真性的方法。
据物理学家组织网报道,美国宾夕法尼亚大学的研究人员近日开发出一个纳米级的碳基平台,可用于电子探测单个DNA(脱氧核糖核酸)分子。该技术最终有望在快速DNA电子测序方面发挥“用武之地”。相关研究论文发表于最新一期的《纳米快报》。
DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以在转录水平抑制基因的表达。具体的过程是在胞嘧啶-鸟嘧啶(CpG二核苷酸)的5位碳原子上添加了一个额外的甲基团,形成5-甲基胞嘧啶。
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测序结果的判读
讲述内容:核酸电泳、杂交技术、PCR技术、基因芯片
Jian Yu ( Email: jianyu@jhmi.edu)Last edited on May 1 2000OverviewThis protocol was developed in Kinzler/Vogelstein laboratories to isolate cDNA fragments corresponding to novel SAGE tags that do not ...
Map-Based Cloning of KAM2
干细胞都可以进行多次分裂增殖(自生),并产生多种分化程度更高的子细胞。成体干细胞在各种成体组织的自生和修复中都发挥着不可替代的作用,比如骨髓中的造血干细胞可以通过分化产生各种血细胞,包括红细胞、巨核细胞、血小板以及多种淋巴细胞。成体组织的干细胞只能分化成某一系列的特定细胞,而早期的胚胎干细胞却具有全能性,也就是说,它们可以分化产生生物体中所有类型的细胞。因此,也许能使用囊胚时期的胚胎干细胞产生一个活体哺乳动物的想法让科学家们为之兴奋并努力了许多年。
一、如何获取已知目的基因的序列信息 先查找其蛋白相关信息了解该基因编码产物的基本情况与功能(www.expasy.org) 进一步查找其核酸相关序列信息,常用数据库:Genebank、EBI、DDBJ 二、目的基因cDNA序列的获取方法 cDNA文库扫描 RT-PCR 人工合成 组织RNA的提取 -在匀浆器中加工冷冻的组织 -通过注射器加工冷冻的组织 -在 ...
Alkaline lysis miniprep
IntroductionExtraction and purification of plasmid DNA from E.coli can be performed on a small scalewhere DNA is extracted from just 1-2 ml of bacterial culture (mini-prep) or from much larger volumes ...
IntroductionTransformation is a technique to introduce DNA into bacterial cells. There are many variations on a common theme but the key points are listed below. Check details with supplier of compete ...
实验目的了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义;学习外源DNA转化入受体菌细胞并筛选转化子的方法。实验原理转化(transformation)是将异源DNA分子导入另一细胞品系,使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段。其原理是细菌处于0℃, CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面,经42℃短时间热击处理,促进细胞吸收DNA ...
物种的遗传多样性在本质上是DNA 一级序列的多样性。近年来,随着DNA 测序技术的迅速发展和日益普及,DNA 测序在遗传多样性的研究中正在起着越来越大的作用。本章将介绍目前在遗传多样性研究中常用的一种手动和一种全自动双链DNA 测序方法。1 DNA 模板的制备在遗传多样性的研究中,由于样本量一般都较庞大,因而DNA 测序的速度就成了很关键的因素。因此,这类研究中常常直接测定纯化的PCR 双链产物而 ...
1. 实验目的和要求通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。 ...