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免疫组织化学是一种什么方法？免疫组织化学方法是一种把分子水平的物质准确具体表达出来的一种方法，这些分子水平的物质可能与癌细胞，细菌，病毒等等有关。自从成功地制作出这些特异性的抗体，使组织结构可以从分子水平中显示出来，这些特异性抗体可以与肿瘤细胞中特定的结构结合，这些抗体被称为单克隆抗体。把这些单克隆抗体孵育在组织切片上，与特定的靶细胞进行特异的反应。如单克隆抗体可以与癌细胞发生特异性反应，单克隆抗体可以从特定 ...

石蜡切片免疫组化染色步骤· 石蜡切片免疫组化染色步骤·· 1、载玻片的处理：抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：1.1 APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20~30秒钟， ...

我做的是大鼠肾脏MMP-9和PAI-1的免疫组化染色。MMP-9为山羊抗鼠的，PAI-1为兔抗鼠的，均为中山公司产品。选用中山公司相应的二抗试剂盒。反复做了好几批片子可结果总是不尽如人意，背景颜色比较深，难以判断阳性结果。具体步骤如下：1、石蜡包埋组织切片4μm，用的是中山公司的多聚赖氨酸防脱片的玻片，捞片后置60℃烤箱烤片2-4小时。2、半月后，脱蜡水化3、PBS液冲洗，3分钟×3；4、切片置于1％triton-x-100 ...

　　免疫组化技术是在抗原抗体特异反应存在的前提下，借助于免疫细胞化学的手段，检测抗原（或抗体）在组织细胞内存在部位的一门新技术。其原理是利用免疫的核心——用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应抗原（或抗体）进行定性、定位或定量检测。，近20年来，由于单克隆抗体生产技术的不断进步，检测系统的改进以及抗原修复方法，特别是热处理方法在福马林固定的石蜡切片上的应用，免疫组化技术有了飞跃性的进展。加上近年来在应用方面积累的经验 ...

石蜡切片免疫组化染色步骤1、载玻片的处理：抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：1.1 APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20~30秒钟，取出稍停片刻，再入纯丙酮 ...

免疫组化是一项简单而常用的实验技术，但要想获得良好的染色结果却也不是很容易，影响染色结果的因素有很多，现就我的实验过程总结如下：一．抗原修复　组织在福尔马林或其它固定液中固定会引起位于蛋白或蛋白间的亚甲基桥的桥连,引起许多抗原决定簇被封，抗原修复以暴露抗原决定簇十分必要。足够的抗原修复是影响免疫组化染色结果最重要的因素,有时候甚至较检测系统更为重要。如在组织切片前未进行某种形式的抗原修复,免疫染色果将不能令人满 ...

免疫组化常用方法二步法：EnVision SystemEnVision显色系统是将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体（即EnVision）直接放大信号40-50倍，把传统的二抗、三抗分别孵育合为一次孵育。特点：敏感、省时、方便、背景低（避免了内源性生物素干扰）。EnVision工作程序：1） 脱蜡、水化组织切片。2） 预处理组织切片（据一抗具体说明而定）3） 蒸馏水漂洗，置于TBS中。4） 阻断内源性过氧化物酶（仅用于EnVisi ...

有好几个同仁发消息问CD31染色，刚工作比较忙，今天分享一下我做的是免疫荧光，也试做过免疫组化，都可以做出来抗体：小鼠抗CD31单克隆抗体英国Abcam公司（CD31抗体说明书里面有说多聚甲醛会掩盖抗体，所以推荐速冻切片，也尝试过速冻切片，不使用多聚甲醛，但是这个技术个人掌握不好，所以还是用了多聚甲醛固定）二抗：山羊抗小鼠488单克隆抗体美国CST公司特别说明：我是从同学那里得到的经验，可能绿光稍微好做些，之前做 ...

一、标本制作　　可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。　　二、荧光抗体染色方法　　（一）直接法　　1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室温或37℃染色30min，切片置入能保持潮湿的染色盒内，防止干燥。　　2．洗片 　倾去存留的荧光抗体，将切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗两次，搅拌，每次5min，再用蒸馏水洗1m ...

POCT 发展很快，主要得益于一些新技术的应用。 POCT 技术的基本原理大致可分为四类： （1） 把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料内 ，成为整合的干燥试剂块 ，然后将其固定于硬质型基质上 ，成为各种形式的诊断试剂条。 （2） 把传统分析仪器微型化 ，操作方法简单化 ，使之成为便携式和手掌式的设备。 （3） 把上述二者整合为统一的系统。 （4） 应用生物感应技术 ，利用生物感应器检测待测物。 有关 POCT 的技术学分类见下表POCT 的技术学分类分类方法原理简单 ...

性传播疾病的实验室诊断(第二版)定 价： ?69.00作 者：叶顺章　主编出 版 社：科学出版社出版时间：2009-1-1版 次：2页 数：224字 数：332000印刷时间：2009-1-1开 本：16开纸 张：胶版纸印 次：2I S B N：9787030235718包 装：精装内容推荐实验室诊断是性传播疾病（简称性病）诊治工作的重要环节。本书对梅毒、生殖器疱疹、软下疳、性病性淋巴肉芽肿、淋病、生殖道衣原体感染、生殖道支原体感染、细菌性阴道病、生殖道念珠菌病、阴道毛滴虫病、HIV感染、尖锐 ...

至今为止，园内检测miRNA方法的帖子集合miRNA的定量检测一般是测成熟的还是前体miRNA细胞中的miRNA 的表达水平用什么方法比较好不知现在有没有这么一种芯片：检测miRNA的target 检测miRNA引物设计 rt-pcr检测mirna的引物 rt-pcr检测mirna的引物如何设计利用real time PCR检测mature miRNA22bp左右的miRNA也可以代替Northern blot用real-time PC ...

　　PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染.　　(二)PCR试剂的污染:主要是由于在P ...

克隆PCR产物1)克隆PCR产物的最优条件是什么？最佳插入片段：载体比需实验确定。1：1（插入片段：载体）常为最佳比，摩尔数比1：8或8：1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保温1小时，或4oC过夜。在这2种温度下，缺T-凸出端的载体会自连，产生蓝斑。室温保温1小时能满足大多数克隆要求，为提高连接效率，需4oC过夜。2)PCR产物是否需要用凝 ...

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染.　　(二)PCR试剂的污染:主要是由于在P ...

恼人的污染！该死的污染！求助：DNA污染如何避免污染如何避免PCR产物污染PCR实验室污染PCR污染与对策PCR污染与对策PCR污染与对策PCR污染与对策紧急求助！pcr污染PCR污染与对策RT-PCR中DNA污染问题请教！急切4次PCR 仅有一次污染（阴性对照见条带），why？Hi,DEAR 师傅:如何在阴性对照组中避免DNA污染的问题PCR污染，原因不知道，请各位高手帮忙分析，谢谢如题，给像我一样在苦苦思考为什么PC ...

1。PCR产物纯化需要的体积以及浓度http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3733888_0.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1477572_0.html2。PCR产物纯化后连接需要的体积http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3846185_0.htmlhttp://www.dxy. ...

1.样品制备20-50 mg食品及标准品研磨成粉，按以下方法抽提DNA：PrepMan Ultra Sample Preparation Reagent (AB, 4318930), DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen)2.SDS检测板设置Plate类型：Single Reporter, Real Time。FAM层：未知样品、标准品、对照均设定为UNKN；不同类型的检测孔可在Sample Name栏以不同名称相互区分。命名请参照以下规则：标准品：1 Mai ...

平端连接　　通常情况下，PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接，但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性，能在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基，使合成的PCR产物成为3'突出一个碱基的DNA分子。这种DNA分子的连接效率很低。由于PCR产物的效率通过较高，。在采用大量T4DNA连接酶并配以5-10u T4 RNA连接酶时，可显著提高其连接效率。对于较短PCR产物，用PUS19的Hinc ...

PCR污染与对策　　PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染.　　(二)PCR试剂的污染: ...