简介
柠檬酸合酶（citroyl synthetase）在柠檬酸循环第一步反应中催化乙酰 CoA 与草酰乙酸结合，生成柠檬酸和带有硫醇基的 CoA（CoA－SH）。其中，乙酰 CoA 和草酰乙酸是柠檬酸合酶的激活剂，而 NADH、琥珀酰 CoA 是其抑制剂。
原理
柠檬酸合酶活性检测的基本原理是：在反应过程中生成的 CoA 可与二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）反应生成有呈色反应的二硝基苯甲酸（TNB）。通过检测 412 nm 的吸光度值，可分析柠檬酸合酶的活性。
材料与仪器
1、二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）
2、样品
步骤
柠檬酸合酶活性检测的基本流程如下：
A、将样品与二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）孵育，在反应过程中生成的 CoA 可与二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）反应生成有呈色反应的二硝基苯甲酸（TNB）。
B、检测 412 nm 的吸光度值，分析柠檬酸合酶的活性。
来源：丁香实验
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